根據(jù)國家標準,生活飲用水菌落總數(shù)標準限值為100CFU/mL。CFU是指菌落形成單位,也就是在一定的培養(yǎng)條件下,能夠生長出來的細菌數(shù)量。這個標準限值是指在每毫升的水中,菌落總數(shù)不能超過100個。本方案利用微生物法及自動菌落計數(shù)儀達到快速檢測出生活飲用水中的菌落總數(shù)。
 
方案詳情：

• 實驗原理

通過1mL水樣在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上、在有氧條件下36℃士1℃培養(yǎng)48h后,所得1mL水樣中的菌落總數(shù)的方法。
二、實驗準備
1、儀器和設備
①  高壓蒸汽滅菌器
②  培養(yǎng)箱：36℃±1℃
③  電爐
④  電子天平
⑤  冰箱
⑥  菌落計數(shù)儀（SK,PSF1100或PSF2200）
⑦  PH計或精密PH試紙
⑧ 無菌吸管：1 mL（具0.01 mL刻度）FDT-SP01001
⑨ 無菌吸管：10 mL（具0.1 mL刻度）FDT-SP01010
⑩ 手動移液器：fluidot  1 mL  MSP1K
⑪ 吸頭：1.5mL   FDT-1500-1-TSF
⑫ 滅菌平皿：fluidot  FDT-9CM-2-S，直徑90 mm。
⑬ 全自動培養(yǎng)皿分裝儀：fluidot  FDT-MF80
⑭ 采樣瓶
2、培養(yǎng)基和試劑
① 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基
 
 
三、實驗步驟
1、以無菌操作方法用手動移液器吸取1ml,充分混勻的水樣,注入無菌平皿中,通過全自動培養(yǎng)皿分裝儀(fluidot, FDT-MF80)自動傾注約15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,儀器自動前后左右旋搖平皿,使水樣與培養(yǎng)基充分混勻。
 
2、待冷卻凝固后,翻轉平皿,使底面向上,置于36℃士1℃培養(yǎng)箱內培養(yǎng)48 h+2h,進行菌落計數(shù),即為1ml水樣中的菌落總數(shù)。
 
四、菌落計數(shù)方法
1、在自動菌落計數(shù)儀上按照表一的數(shù)值，設置好條件。
2、使用自動菌落計數(shù)儀，快速識別重疊或模糊的菌落，1-3秒出結果后保存，繼續(xù)識別其它的培養(yǎng)皿，直到所有培養(yǎng)皿計算完畢。
 
五、結果報告
1、選擇平均菌落數(shù)在 30~300之間者進行計算,若只有一個稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍則將該菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告結果(見表1中實例1)。
2、若有兩個稀釋度,其生長的菌落數(shù)均在 30~300之間,則視兩者之比值來決定,若其比值小于2,應報告兩者的平均數(shù)(如表1中實例2)。若大于或等于2,則報告其中稀釋度較小的菌落總數(shù)(如表1中實例3和實例4)。
3、若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300,則應按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告結果(見表1中實例5)。
4、若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30,則應按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告結果(見表1中實例6)。
5、若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30~300之間,則應以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告結果(見表1中實例7)。
6、若所有稀釋度的平板上均無菌落生長,則以未檢出報告結果。
7、如果所有平板上都菌落密布,不要用“多不可計”報告,而應在稀釋度最大的平板上,任意計數(shù)其中2個平板1cm'中的菌落數(shù),除2求出每平方厘米內平均菌落數(shù),乘以皿底面積63.6cm',再乘其稀釋倍數(shù)報告結果。
8、菌落計數(shù)的報告:菌落數(shù)在100以內時按實有數(shù)報告,大于100時,采用兩位有效數(shù)字,在兩位有效數(shù)字后面的數(shù)值,以四舍五人方法計算,為了縮短數(shù)字后面零的個數(shù)也可用10的指數(shù)來表示(見表 1)。
 
9、以CFU/g 為單位報告。