Giorgis Isaac,1Michael D. Jones,1Besnik Bajrami,1Wassim Obeid,2James Langridge,3Patrick Hatcher2
1沃特世公司(美國馬薩諸塞州米爾福德)
2歐道明大學(xué)(美國弗吉尼亞州諾?)
3沃特世公司(英國曼徹斯特)
應(yīng)用優(yōu)勢
■展示根據(jù)鏈長和雙鍵數(shù)量分離多種游離脂肪酸(FFA)
■無需衍生化,可實現(xiàn)更簡單快速的樣品制備,避免干擾
■有機溶劑提取物可直接進樣至系統(tǒng)中,節(jié)省了每次分析的時間和成本
■三分鐘內(nèi)即可完成色譜分離,速度比GC/MS快10倍
■與GC/MS不同,借助UPC2®可以輕松分析低揮發(fā)性的極長鏈脂肪酸(>24個碳原子)
沃特世解決方案
ACQUITY UPC2TM 系統(tǒng)
TransOmics™ 信息學(xué)軟件
Xevo® G2 QTof 質(zhì)譜儀
ACQUITY UPC2 HSS 色譜柱
關(guān)鍵詞
游離脂肪酸,超高效合相色譜,UPC2,TransOmics,飛行時間質(zhì)譜,UPC2/MS/MS
簡介
游離脂肪酸和構(gòu)成復(fù)合脂質(zhì)的脂肪酸都在代謝中發(fā)揮著一些關(guān)鍵作用——作為主要的代謝燃料(儲存和運輸能量)、所有細胞膜必不可少的成分和基因調(diào)控因子。此外,膳食中的脂質(zhì)可提供多不飽和脂肪酸,這類脂肪酸是功能強大的局部作用代謝產(chǎn)物(如類花生酸)的前體。常見的動植物來源脂肪酸均為偶數(shù)鏈,每條鏈含16至24個碳原子,并具有0到6個雙鍵。但是大自然中總有著無數(shù)的例外,實際上甚至還存在多達近100個碳原子的奇數(shù)碳和偶數(shù)碳脂肪酸。此外,雙鍵可以為順式(Z)和反式(E)構(gòu)型,也可以具有各種其它結(jié)構(gòu)特征,包括分支點、環(huán)、含氧官能團等等。
脂肪酸鏈可以在特定的位點含有一個或多個雙鍵(具有順式(Z)或反式(E)構(gòu)型的不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸),也可以是完全飽和的。LIPIDMAPS脂肪酸系統(tǒng)命名法用“∆”指示雙鍵相對于羧基的位置1。脂肪酸結(jié)構(gòu)在分子的一端(指定為Omega,ω)含有一個甲基,另一端為羧基?拷然奶荚臃Q為α碳,緊接著下一個碳原子則稱為β碳。通常,還會使用字母“n”代替ω,以指示離甲基端最近的雙鍵位置2。圖1展示了不同直鏈脂肪酸的結(jié)構(gòu)。
從生物材料中分離游離脂肪酸(FFA)是一項復(fù)雜的工作,必須隨時注意防止或盡量減少水解酶的影響。完成分離后,可通過典型的色譜方法對脂肪酸進行分析,包括氣相色譜/質(zhì)譜法(GC/MS)和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC/MS/MS)。但是,這些方法都有著各自的不足之處。
例如,GC法需要將脂肪酸進行衍生化,以便水解并轉(zhuǎn)化為甲酯,這一過程不僅耗時,而且在衍生化過程中還存在脂肪酸重排的風險,使得無法確定形成的酯是來自FFA還是完整的復(fù)合脂質(zhì)。此外,對于具有高分子量(>C24)的低揮發(fā)性極長鏈脂肪酸來說,即使在脂肪酸甲酯(FAME)衍生化后,其GC/MS分析依然存在問題。
本文介紹的UPC2/MS FFA分析是一種簡便快速的方法,與其它諸如GC/MS等需要進行FAME衍生化的技術(shù)相比,可顯著縮短分析時間。此外,含有脂質(zhì)的有機層提取物可以直接進樣至系統(tǒng)中,無需溶劑交換即可兼容反相LC方法。
下載完整應(yīng)用紀要請點擊: