02 驗(yàn)證項(xiàng)目
精密度

批內(nèi)精密度：選取至少5個(gè)新鮮全血樣品，樣品的淋巴細(xì)胞亞群細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)覆蓋低中高水平。每個(gè)標(biāo)品從熒光染 色到上機(jī)檢測(cè)重復(fù)3次，并確保所有測(cè)試都在同一臺(tái)儀器的同一批內(nèi)測(cè)定，整個(gè)操作過(guò)程由同一個(gè)操作 人員完成。先計(jì)算每個(gè)樣品重復(fù)3次后檢測(cè)結(jié)果的CV,然后計(jì)算所有樣品的平均CV，所有樣品的平均CV 宜＜10％，最大不超過(guò)20％。實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)不同水平的淋巴細(xì)胞亞群細(xì)胞計(jì)數(shù)設(shè)定不同程度的可接受CV 標(biāo)準(zhǔn)。

日間精密度：宜使用正常和異常兩個(gè)濃度水平的全血質(zhì)控品，每天從熒光染色到上機(jī)測(cè)定重復(fù)操作3次， 至少重 復(fù)4天，整個(gè)操作過(guò)程可由不同操作人員完成。先計(jì)算每天每個(gè)全血質(zhì)控品重復(fù)3次檢測(cè)結(jié)果的CV值，然 后據(jù)此計(jì)算每個(gè)全血質(zhì)控品4天的平均CV，最后得出兩個(gè)全血質(zhì)控品檢測(cè)結(jié)果的平均CV。判定標(biāo)準(zhǔn)同上。

穩(wěn)定性

樣品穩(wěn)定性：驗(yàn)證樣品在確定的抗凝及處置條件下的穩(wěn)定性。采集健康人或患者的樣品至少 5 份，即刻染色-裂 解-固定并上機(jī)測(cè)定，以此結(jié)果作為基線參考水平，按照實(shí)驗(yàn)室的具體環(huán)境溫度控制條件和預(yù)期的樣品待檢時(shí)間，在抗凝劑保存時(shí)間內(nèi)，設(shè)置不同的時(shí)間點(diǎn)對(duì)上述樣品進(jìn)行重復(fù)處理和上機(jī)測(cè)定，獲取檢測(cè)結(jié)果，并與基線水平結(jié)果進(jìn)行比較，以相對(duì)偏差或絕對(duì)偏差表示，檢測(cè)結(jié)果應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)室制定的驗(yàn)證要求。淋巴細(xì)胞亞群計(jì)數(shù)過(guò)低者，宜以絕對(duì)偏差進(jìn)行驗(yàn)證；亦可對(duì)試劑說(shuō)明書(shū)聲明的穩(wěn)定性條件進(jìn)行驗(yàn)證。

處理后標(biāo)本穩(wěn)定性：旨在明確處理后標(biāo)本的最長(zhǎng)待檢時(shí)間。采集健康人或患者的樣品至少5份，對(duì)完成染色-裂解-固定 后的標(biāo)本即刻上機(jī)檢測(cè)結(jié)果作為基線水平。按實(shí)驗(yàn)室獲得檢測(cè)結(jié)果的最長(zhǎng)可接受時(shí)間為期限，設(shè)置不同 的時(shí)間點(diǎn)對(duì)固定后標(biāo)本進(jìn)行上機(jī)檢測(cè)。結(jié)果判定同上一條。亦可對(duì)試劑說(shuō)明書(shū)聲明的穩(wěn) 定性條件進(jìn)行驗(yàn)證。

線性范圍

適用于淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)。根據(jù)試劑說(shuō)明書(shū)聲明的線性范圍，取一份淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)或亞群 計(jì)數(shù)接近線性范圍上限的臨床樣品，采用樣品稀釋液按照比例制備 5～9 個(gè)不同濃度的標(biāo)本，濃度范圍應(yīng)覆蓋臨床醫(yī)學(xué)決定水平；通過(guò)染色-裂解-固定后，上機(jī)測(cè)定， 每個(gè)標(biāo)本重復(fù)測(cè)定 4 次，取均值。分析實(shí)際測(cè)定的亞群細(xì)胞數(shù)量均值與理論值之間的相關(guān)性，相關(guān)系數(shù) r 應(yīng)≥0.975。

可比性

抗體試劑批次變更前后的可比性驗(yàn)證：宜使用至少3份健康人的新鮮全血樣品和2份不同濃度質(zhì)控品，采用新批號(hào)抗體試劑和當(dāng)前批號(hào)抗體 試劑進(jìn)行熒光染色、上機(jī)檢測(cè)，以當(dāng)前批號(hào)試劑檢測(cè)結(jié)果為參考，計(jì)算相對(duì)偏差或絕對(duì)偏差。檢測(cè)結(jié)果 應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)室制定的驗(yàn)證要求。驗(yàn)證要求的制定應(yīng)考慮不同水平的淋巴細(xì)胞亞群計(jì)數(shù)設(shè)定不同程度的偏 差值，淋巴細(xì)胞亞群計(jì)數(shù)過(guò)低者，宜以絕對(duì)偏差進(jìn)行驗(yàn)證。

不同檢測(cè)系統(tǒng)間的可比性驗(yàn)證：宜使用至少 5 份新鮮全血樣品（樣品的淋巴細(xì)胞亞群細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)覆蓋低中高水平）和 2 份不同濃度 水平的全血質(zhì)控品，完成染色-裂解-固定后，分別采用待評(píng)價(jià)檢測(cè)系統(tǒng)和比對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)。比對(duì) 檢測(cè)系統(tǒng)應(yīng)為儀器性能良好、規(guī)范開(kāi)展室內(nèi)質(zhì)量控制、室間質(zhì)量評(píng)價(jià)成績(jī)合格的淋巴細(xì)胞亞群常規(guī)檢測(cè) 系統(tǒng)，以比對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)的測(cè)定結(jié)果為參考，計(jì)算相對(duì)偏差或絕對(duì)偏差。檢測(cè)結(jié)果應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)室制定的驗(yàn) 證要求。驗(yàn)證要求的制定應(yīng)考慮不同水平的淋巴細(xì)胞亞群計(jì)數(shù)設(shè)定不同程度的偏差值，淋巴細(xì)胞亞群計(jì) 數(shù)過(guò)低者，宜以絕對(duì)偏差進(jìn)行驗(yàn)證。

不同檢測(cè)人員間的可比性驗(yàn)證：宜使用至少5份新鮮全血樣品和2份不同濃度水平的全血質(zhì)控品，分別由實(shí)驗(yàn)室內(nèi)淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè) 培訓(xùn)合格的不同檢測(cè)人員完成染色-裂解-固定、上機(jī)檢測(cè)和數(shù)據(jù)分析，計(jì)算不同檢測(cè)人員間檢測(cè)結(jié)果的 相對(duì)偏差或絕對(duì)偏差。驗(yàn)證結(jié)果應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)室制定的驗(yàn)證要求。

準(zhǔn)確度

可使用室間質(zhì)評(píng)回報(bào)結(jié)果驗(yàn)證淋巴細(xì)胞亞群項(xiàng)目的準(zhǔn)確度。