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高通量高精度菌落挑取工作站PIXL助力合成生物學(xué)研究
瀏覽次數(shù):974 發(fā)布日期:2024-5-30 來源:本站
僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
在合成生物學(xué)大環(huán)境下,作為英國生命科學(xué)行業(yè)中自動化儀器領(lǐng)域的領(lǐng)導(dǎo)者,Singer公司在2017年與NUS-SynCTI簽署了一項研究合作協(xié)議,來構(gòu)思和開發(fā)一種新型自動化的高通量菌落挑選設(shè)備。能在自動化的生產(chǎn)平臺上高效運轉(zhuǎn),并大大增強了高通量的分析能力。這就是新一代的高通量菌落挑取系統(tǒng)—Singer-PIXL
當(dāng)前,越來越多的實驗室會選擇用機器人取代人工來挑取數(shù)以千萬計的菌落,而其中關(guān)注的就是挑菌的準(zhǔn)確率。自動挑菌的設(shè)備具有挑取一致性、可重復(fù)性、工作時間長的優(yōu)點。然而,并不是所有的自動挑菌設(shè)備都能達到高精度挑菌,它們在挑取時經(jīng)常會觸碰到其他物質(zhì),這也是全面檢測自動挑菌設(shè)備準(zhǔn)確性的重要原因。
Singer公司提供的挑菌平臺PIXL,多功能、可定制、允許用戶控制挑菌過程的每個步驟。在這里,為了檢測PIXL菌落挑取平臺的挑取準(zhǔn)確性,從兩方面來進行實驗:
1、挑取單個菌落而產(chǎn)生不交叉污染,兩個菌落間的小距離是多少?
利用“棋盤陣列”實驗,來檢測PIXL挑取陣列菌落的能力。在陣列模式下,PIXL在1536密度陣列下能完美地挑取每一個菌,準(zhǔn)確率達到了100%。其中兩個相鄰菌落中心點之間的距離為2mm,假設(shè)菌落的平均直徑為1mm,我們可以推算出,1536密度陣列中,相鄰菌落邊緣間的距離約為1mm。當(dāng)然,如果菌落直徑大于1mm,相鄰菌落邊緣間的距離小于1mm。可以看出,PIXL準(zhǔn)確挑菌且不交叉污染所要求的小相鄰菌落邊緣間的距離為1mm。
1536密度陣列的菌落間距示意圖
2、瓊脂的高度會如何影響挑取準(zhǔn)確率?
瓊脂不平或瓊脂高度的改變是引起挑菌準(zhǔn)確率下降的常見原因,因為從菌落到相機的距離直接影響菌落的位置計算,這是瓊脂高度改變引起的變量因素。較低的瓊脂高度導(dǎo)致菌落到相機的距離更遠,使相機獲取的菌落大小較實際情況更小。另外,較高的瓊脂高度導(dǎo)致菌落到相機的距離更近,使菌落看起來更大。
A)“正常”高度瓊脂 B)更高的瓊脂高度 C)更低的瓊脂高度
為了克服這種常見誤差,PIXL內(nèi)置了一種智能度量標(biāo)準(zhǔn),自動偵測瓊脂高度并據(jù)此調(diào)整菌落位置信息。
為了檢測這一性能,向Singer PlusPlates中傾注不同體積的瓊脂,并將芽殖酵母細(xì)胞點種到這些瓊脂上,培養(yǎng)2天后,從每塊板上挑取96個菌落。其準(zhǔn)確性通過兩種方法測定:一是通過在源板上尋找挑取痕跡;二是通過在目標(biāo)板上培養(yǎng)菌落并檢測菌落的生長。
結(jié)果發(fā)現(xiàn),當(dāng)平皿中有34~46ml瓊脂時,相當(dāng)于瓊脂高度在4.7~6.3cm,挑取準(zhǔn)確率高于99%。40ml瓊脂的高度為5.5cm,是Singer PlusPlate平皿高度的一半。
PIXL在不同的瓊脂高度上,挑菌準(zhǔn)確率高于99%
在另一個單獨的測試中,發(fā)現(xiàn)平皿中瓊脂不平,可能是準(zhǔn)備平皿時桌面不平導(dǎo)致的,但這并不會影響挑取的準(zhǔn)確性。PIXL在平皿的不同位置成功挑取了40個菌落。這進一步證實挑菌平臺可以適應(yīng)不同瓊脂高度的平皿。
Singer-PIXL三大優(yōu)勢
1友好的用戶界面
Singer-PIXL使用觸摸屏界面來引導(dǎo)用戶完成整個工作流程,并能在幾分鐘內(nèi)選擇正確的菌落。對于用戶而言,它的操作非常簡單,通常10分鐘就能讓新用戶掌握軟件功能的90%。簡而言之,輕松無憂。
2精準(zhǔn)挑選的技術(shù)
PIXL擁有著新研發(fā)的挑取技術(shù)—Pinpoint ,能保障實驗過程的可靠性和無菌性。其挑選菌落的針頭無需像使用金屬針的挑菌設(shè)備一樣,每次都必須對其進行滅菌。Singer-PIXL使用的是基于聚合物材料的PickupLine無菌挑菌線,該材料能被切割以產(chǎn)生無菌末端作為新針頭來轉(zhuǎn)移微生物菌落,去除清洗滅菌環(huán)節(jié),降低交叉污染的風(fēng)險,減少耗材成本。
3自動識別瓊脂厚度
精準(zhǔn)挑選技術(shù)的另一個優(yōu)勢是可以自動應(yīng)對瓊脂厚度的變化,以確保在不損壞瓊脂平板的情況下挑選并轉(zhuǎn)移平板上的菌落 。而且執(zhí)行挑選的精準(zhǔn)度可達50微米,確保細(xì)小菌落的準(zhǔn)確挑取。優(yōu)化的挑取動作適用于大多數(shù)的粘性菌:挖、高頻振動、輕拍。
PIXL作為新一代高通量高精度菌落挑取工作站,有著無與倫比的優(yōu)勢,從研發(fā)到設(shè)計、從模型到實踐,都是面向用戶的真實反饋和體驗。作為英國SINGER公司在大中華區(qū)的獨家合作伙伴,磐麥科技將會和SINGER一起繼續(xù)努力,不斷進步,為廣大科研客戶提供幫助。
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