膠原蛋白的提取方法主要分為兩類：動(dòng)物源提取法和基因重組法。前者通過酸法、堿法或者酶法從動(dòng)物皮膚、跟腱部位提取膠原蛋白。酸法將前處理（去脂、切片、粉碎）后的樣品酸解，獲得酸溶性膠原蛋白，優(yōu)點(diǎn)是蛋白三螺旋結(jié)構(gòu)完整、成纖維性能好，成本較低但存在較高的免疫原性風(fēng)險(xiǎn)。酶法常使用胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶地切割膠原蛋白的末端肽，主體溶于中性或酸性溶液中，最終被提取，該方法獲得的膠原純度高、理化性質(zhì)較好，常用于高附加值產(chǎn)品的開發(fā)。
 

基因重組法是將人膠原蛋白基因序列進(jìn)行特定設(shè)計(jì)、酶切和拼接、連接載體后轉(zhuǎn)入工程細(xì)胞，通過發(fā)酵表達(dá)生產(chǎn)膠原蛋白。主要包括表達(dá)體系的構(gòu)建、發(fā)酵以及純化3個(gè)過程。表達(dá)體系存在原核、真核、昆蟲病毒、哺乳動(dòng)物等多個(gè)表達(dá)體系，但目前可進(jìn)入工業(yè)化生產(chǎn)或已商品化的重組膠原蛋白主要采用基于大腸桿菌、酵母等微生物發(fā)酵的技術(shù)。
 

相比動(dòng)物源提取法，重組法可加工性（如水溶性和乳化特性）較好，能降低免疫原性。
 

作為分離純化的第一步，細(xì)胞破碎是至關(guān)重要的一環(huán)。細(xì)胞破碎的過程能夠有效釋放細(xì)胞內(nèi)的目標(biāo)物質(zhì)，以確保后續(xù)純化步驟的順利進(jìn)行和最終產(chǎn)品的質(zhì)量。高壓均質(zhì)是最常用的機(jī)械裂解方法，具有良好的可放大性，且不需要添加額外的試劑。
 

ATS安拓思提供全系列的高壓均質(zhì)機(jī)產(chǎn)品，可支持從實(shí)驗(yàn)室到生產(chǎn)的不同規(guī)模應(yīng)用，最高處理流量可達(dá)4,000 L/H。

注射用膠原蛋白的制備工藝流程主要包括以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟：

1、原料準(zhǔn)備：首先，選擇優(yōu)質(zhì)的膠原蛋白作為主要原料，這可以是從動(dòng)物源（如魚類、豬皮、牛皮等）提取的膠原蛋白，或者是通過生物技術(shù)手段生產(chǎn)的重組膠原蛋白。同時(shí)，準(zhǔn)備好所需的輔料，如穩(wěn)定劑、緩沖劑、保濕劑等，這些輔料的選擇應(yīng)符合藥品生產(chǎn)的相關(guān)規(guī)定。

2、溶液制備：按照一定比例將膠原蛋白與緩沖劑溶解，同時(shí)加入適量的穩(wěn)定劑和保濕劑。通過充分?jǐn)嚢杌旌�，確保溶液均勻。

3、pH調(diào)節(jié)：使用酸堿調(diào)節(jié)劑對(duì)溶液進(jìn)行pH調(diào)節(jié)，使其達(dá)到適宜的酸堿度。這一步驟至關(guān)重要，因?yàn)樗�可以確保膠原蛋白的穩(wěn)定性和活性。

4、過濾：將制得的溶液通過特定孔徑的過濾器進(jìn)行過濾，以去除雜質(zhì)和微生物。這一步驟對(duì)于保證產(chǎn)品的純凈度和無菌性至關(guān)重要。

5、均質(zhì)化處理：利用高壓均質(zhì)機(jī)對(duì)膠原蛋白溶液進(jìn)行均質(zhì)化處理。通過高壓和剪切力，使膠原蛋白顆粒更加細(xì)膩均勻，提高產(chǎn)品的質(zhì)量和穩(wěn)定性。

6、無菌灌裝：在無菌條件下，將處理好的膠原蛋白溶液灌裝到適合的容器中，如注射器或瓶中。

7、質(zhì)量控制與檢測(cè)：對(duì)制備好的注射用膠原蛋白進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制與檢測(cè)。這包括理化性質(zhì)測(cè)試、微生物檢測(cè)、生物學(xué)活性測(cè)試等，以確保產(chǎn)品符合規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。