石蠟制片與冷凍制片的實(shí)驗(yàn)步驟及高效得到高質(zhì)量冰凍切片的方法介紹
瀏覽次數(shù):1966 發(fā)布日期:2023-2-1
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組織學(xué)設(shè)備是免疫組化實(shí)驗(yàn)的必備設(shè)備,而免疫組化的常用切片主要包括石蠟切片和冰凍切片兩種。
石蠟制片的步驟:
取材→脫水(固定、脫水、透明、浸蠟)→石蠟包埋→切片→染色、封片→鏡下觀察。
這里涉及到的常用基礎(chǔ)組織學(xué)設(shè)備有:脫水機(jī)、包埋劑、石蠟切片機(jī)、染色機(jī)、封片機(jī)、顯微鏡等。
冷凍制片的步驟:
取材→冷凍包埋→切片→染色(手動(dòng)也行)→鏡下觀察。
必須用到的基礎(chǔ)組織學(xué)設(shè)備有:速凍儀、冷凍切片機(jī)、顯微鏡。
免疫組化有哪些痛點(diǎn)?免疫組化實(shí)驗(yàn)根據(jù)樣本類型、抗體類型、切片要求等條件的不同,對應(yīng)免疫組化要求也不同。同時(shí)石蠟切片在免疫組化實(shí)驗(yàn)中制片步驟繁瑣,組織前處理要求高,可能破壞抗原,需要做抗原修復(fù);而冰凍切片能夠較好地保存組織的抗原免疫活性,做免疫組化時(shí)不需抗原修復(fù)這一步。想要避開抗原修復(fù)這一步驟,免疫組化切片時(shí)可以選擇冰凍切片。冰凍切片雖然無需抗原修復(fù),但在免疫組化時(shí)常常會(huì)遇到:
- 細(xì)胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu);
- 切片厚度也較石蠟的厚,會(huì)直接影響切片質(zhì)量;
- 如果冷凍切片機(jī)箱體制冷不足,就需要使用速凍儀輔助冷凍包埋組織。
采用冷凍包埋組織,這對于實(shí)驗(yàn)室來說,也是一筆不小的運(yùn)維成本。選擇一臺(tái)高質(zhì)量的冷凍切片機(jī),不僅可以獲得高質(zhì)量冰凍切片,還可省去速凍儀輔助冷凍包埋組織這一步驟,也能滿足新技術(shù)人員的切片需求來保證實(shí)驗(yàn)的正常開展等。
如何高效得到高質(zhì)量冰凍切片?
瑞沃德冷凍切片機(jī)用于免疫組化實(shí)驗(yàn)冷凍切片時(shí),可解決以上所有難題 :
1、緩解片子偏厚問題
▲圖:瑞沃德冰凍切片機(jī)切片實(shí)拍圖
- 壓縮機(jī)冷量輸出大可做二次溫控補(bǔ)償;PID控溫,使得箱體溫度在一定范圍內(nèi)波動(dòng)且可以自動(dòng)恢復(fù);
- 頂/級(jí)十字交叉導(dǎo)軌搭配五相高分辨率步進(jìn)電機(jī)、精密絲桿和水平進(jìn)樣滑塊,組成高精準(zhǔn)進(jìn)樣系統(tǒng);
- 以上兩點(diǎn)保證切片無需設(shè)置過厚就能切出滿足需求的片子。
2、緩解冰晶產(chǎn)生的壓力
▲瑞沃德冰凍切片機(jī)可開啟快冷功能
冰晶主要產(chǎn)生于樣本冷凍包埋階段,因?yàn)槔鋬鲞^程緩慢從而產(chǎn)生冰晶,這就要求設(shè)備的冷凍效果要滿足樣本速凍需求。瑞沃德冷凍切片機(jī)速凍臺(tái)最低溫度可達(dá)-42℃,快速制冷點(diǎn)溫度最低可達(dá)-60℃,滿足速凍需求,同時(shí)箱體和樣本頭均可單獨(dú)制冷,從而減少冰晶產(chǎn)生,保證切片質(zhì)量。
3、運(yùn)維成本低
瑞沃德冷凍切片機(jī)具備2個(gè)半導(dǎo)體快速制冷點(diǎn)和15個(gè)常規(guī)制冷點(diǎn),滿足任務(wù)量大的應(yīng)用場景,同時(shí)速凍臺(tái)制冷效果達(dá)到行業(yè)國際標(biāo)準(zhǔn),達(dá)到速凍包埋效果,無需使用速凍儀包埋。冷凍包埋成本更低。同時(shí)具備操作日志記錄,可及時(shí)有效開展切片工作復(fù)盤,優(yōu)化切片條件,提高切片質(zhì)量。
4、自動(dòng)切片考慮到一些新技術(shù)老師開展免疫組化實(shí)驗(yàn),對冷凍切片機(jī)不熟悉,無法掌握切片條件導(dǎo)致出現(xiàn)切片質(zhì)量問題。瑞沃德冷凍切片機(jī)具備自動(dòng)切片功能,設(shè)置好切片條件,開啟自動(dòng)切片,保證切片質(zhì)量高且穩(wěn)定同時(shí),更加貼合新人的實(shí)驗(yàn)場景,保證實(shí)驗(yàn)高效開展