下面提供了常見生物緩沖液(包括配方)的列表。 離子強(qiáng)度應(yīng)適當(dāng)調(diào)整(偶合反應(yīng)通常為〜25-100mM)。 請注意,列表僅為常見生物緩沖液,建議研究人員參考文獻(xiàn)并嘗試使用不同的緩沖液。
(1)磷酸鹽緩沖鹽水(PBS); pH值7.4
磷酸氫二鉀:1.82 g / L(MW 174.2)
磷酸二氫鈉:0.22 g / L(MW 120.0)
氯化鈉:8.76 g / L(MW 58.4)
使用去離子水使體積達(dá)到1L。 調(diào)節(jié)pH至7.4(使用1 N HCl或1 N NaOH)。
(2)硼酸鹽緩沖液; pH值8.5
a. 硼酸H3BO3:12.4 g / L(MW 61.8)
b. 四硼酸鈉:19.1 g / L(MW 381.4)
將50mL(a)加入14.5mL(b)。用去離子水使體積達(dá)到200mL。 使用3 M NaOH將pH調(diào)節(jié)至8.5。
(3)醋酸緩沖液; pH范圍3.6至5.6
a. 0.1 M乙酸:(5.8mL制成1000mL)
b. 0.1 M乙酸鈉:8.2 g / L(無水; MW 82.0)
按指示的比例混合乙酸和乙酸鈉溶液,并用去離子水將最終體積調(diào)節(jié)至100mL。 使用1N HCl或1N NaOH調(diào)節(jié)pH。
mL Acetic Acid |
46.3 |
41.0 |
30.5 |
20.0 |
14.8 |
10.5 |
4.8 |
mL of Na Acetate |
3.7 |
9.0 |
19.5 |
30.0 |
35.2 |
39.5 |
45.2 |
pH |
3.6 |
4.0 |
4.4 |
4.8 |
5.0 |
5.2 |
5.6 |
(4)檸檬酸磷酸鹽緩沖液; pH范圍2.6至7.0
a. 0.1 M檸檬酸:19.2 g / L(MW 192.1)
b. 0.2 M磷酸氫二鈉:35.6 g / L(二水合物; MW 178.0)
按照指示的比例混合檸檬酸和磷酸鈉溶液,并用去離子水將體積調(diào)節(jié)至100mL。 使用1N HCl或1N NaOH調(diào)節(jié)最終pH。
mL Citric Acid |
44.6 |
35.9 |
29.4 |
24.3 |
19.7 |
13.6 |
6.5 |
mL of Na Phosphate |
5.4 |
14.1 |
20.6 |
25.7 |
30.3 |
36.4 |
43.6 |
pH |
2.6 |
3.4 |
4.2 |
5.0 |
5.8 |
6.6 |
7.0 |
(5)碳酸鹽-碳酸氫鹽緩沖液; pH范圍9.2至10.4
a. 0.1 M碳酸鈉:10.6 g / L(無水; MW 106.0)
b. 0.1 M碳酸氫鈉:8.4 g / L(MW 84.0)
按指示的比例混合碳酸鈉和碳酸氫鈉溶液,并用去離子水將體積調(diào)節(jié)至200mL。 使用1 N HCl或1 N NaOH調(diào)節(jié)最終pH。
mL Na Carbonate |
4.0 |
9.5 |
16.0 |
22.0 |
27.5 |
33.0 |
38.5 |
mL of Na Bicarbonate |
46.0 |
40.5 |
34.0 |
28.0 |
22.5 |
17.0 |
11.5 |
pH |
9.2 |
9.4 |
9.6 |
9.8 |
10.0 |
10.2 |
10.4 |
(6)MES緩沖液; pH范圍5.7至7.2
• 將19.2g MES游離酸(MW 195.2)溶解在約900mL的純水中。 用1 N HCl或1 N NaOH滴定至所需的pH,并用純水將最終體積調(diào)節(jié)至1000mL。
抗菌劑通常將低濃度(0.05-0.1%)的抗菌劑(例如疊氮化鈉或硫醇鹽)添加到存儲緩沖液中,特別是對于長期存儲。 應(yīng)謹(jǐn)慎選擇抗菌劑,因?yàn)樗鼈兛赡鼙憩F(xiàn)出不同的穩(wěn)定性,涉及特殊的處置注意事項(xiàng)等。例如,疊氮化鈉可能與鉛和銅管反應(yīng)生成爆炸性金屬疊氮化物。 因此,在處理時(shí),必須使用大量的水沖洗管道并防止疊氮化物積聚。