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                                當(dāng)前位置 > 首頁 > 技術(shù)文章 > D-熒光素鉀鹽及D-熒光素使用中的常見問題

                                D-熒光素鉀鹽及D-熒光素使用中的常見問題

                                瀏覽次數(shù):8422 發(fā)布日期:2016-11-3  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

                                1、D-熒光素適合做哪些實驗?

                                D-熒光素鉀鹽和5-氟-熒光素,作為Luciferase的作用底物,常用于以下實驗:
                                    1. 報告基因分析
                                    2. In vivo imaging (動物活體成像)
                                    3. In vitro imaging (細(xì)胞體外分析)
                                    4. ATP測定
                                    5. 其它luciferase及其基因相關(guān)的分析和研究工作

                                2、D-熒光素應(yīng)用于活體成像的基本原理

                                細(xì)胞中D-熒光素酶參與的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)遵守酶促反應(yīng)的基本原理,在底物D-熒光素鉀過量的情況下,反應(yīng)產(chǎn)生的光子數(shù)(發(fā)光量)與細(xì)胞中的D-熒光素酶的量成正相關(guān),從而可以推算出細(xì)胞的數(shù)量。

                                3、D-熒光素鉀鹽溶液的穩(wěn)定性

                                D-熒光素鉀鹽易溶于水和緩沖液,溶解度可高達(dá)25mg/mL。一般使用濃度為3-15 mg/mL。

                                溶液的pH值、溶液中的氧氣和保存時間對其保存過程中的穩(wěn)定性非常重要。當(dāng)溶液的pH<6.5(發(fā)生水解作用)或>7.5(發(fā)生消旋化作用,D型轉(zhuǎn)化為L型)的情況下,D-熒光素鉀鹽相對不穩(wěn)定。如果溶液中存在少量的氧氣,將加速D-熒光素鉀的降解速度。

                                D-熒光素配成溶液后,在最佳的保存條件(-80°C,最佳pH,無氧氣)下,存在固定的降解速度:0.2%/天,因此配成溶液保存的D-熒光素應(yīng)盡量在1年內(nèi)使用完。

                                有水存在的情況下,主要發(fā)生消旋化作用,即D-熒光素轉(zhuǎn)化成L-熒光素,有報道稱L-熒光素對熒光素酶催化的酶促反應(yīng)有抑制作用。

                                4、D-熒光素、D-熒光素鈉和D-熒光素鉀之間的區(qū)別

                                主要區(qū)別在于溶解和分散性能。D-熒光素鉀鹽在水和緩沖液中的溶解度高,且溶解速度較快,故在一般的生物學(xué)試驗中常用D-熒光素鉀鹽。

                                5、D-熒光素鉀鹽的保存和運輸條件 

                                保存條件:≤-20°C,避光,保持干燥。(在不打開包裝的條件下,可保存兩年時間)。

                                運輸條件:高純度的D-熒光素鉀鹽可在短時間內(nèi)常溫條件下保存,運輸條件為常溫。

                                原裝(沒有打開包裝)熒光素的包裝瓶中充有氬氣,保證其穩(wěn)定性,打開包裝后,請嚴(yán)格按照保存條件保存。

                                D-熒光素鉀鹽具有易溶于水的特性,其暴露于空氣中,易吸潮。在稱量過程中,請考慮其易吸潮的特性,先進(jìn)行溫度平衡,再快速稱取。

                                了解產(chǎn)品詳情,請登錄:http:///tools/search.asp?kw2=Luciferin&tn=5

                                來源:北京啟維益成科技有限公司
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