菌落測(cè)試前應(yīng)該注意的規(guī)定和事項(xiàng)

     1.1    安全須知

     本儀器所引用的安全規(guī)范為Safety Class I的規(guī)定（機(jī)體具有保護(hù)用的接地端子）。在開啟本機(jī)的輸入電源開關(guān)前，請(qǐng)先選擇正確的輸入電壓（220V）規(guī)格。

     維護(hù)和保養(yǎng)

     為防止觸電的發(fā)生，請(qǐng)不要打開儀器的背板。本儀器內(nèi)部所有的零件，絕對(duì)不需使用者的維護(hù)。如果儀器有異常情況發(fā)生，請(qǐng)尋求全控或其指定的經(jīng)銷商予以維護(hù)。所附方塊圖僅供參考之用。

     本菌落測(cè)試儀、輸入電源線、暗艙式光源和相關(guān)附件至少每年要仔細(xì)檢驗(yàn)一次，以保護(hù)使用者的安全和儀器的精確性。

     使用者的修改

     使用者不得自行更改儀器的線路或零件，如被更改，儀器的保證則自動(dòng)失效并且本公司不負(fù)任何責(zé)任。使用未經(jīng)全控公司認(rèn)可的零件或者附件也不予保證。如發(fā)現(xiàn)送回檢修的儀器被更改，本公司會(huì)將儀器的電路或零件修復(fù)回原來設(shè)計(jì)的狀態(tài)，并收取維護(hù)費(fèi)用。

     操作人員必須隨時(shí)給予教育和訓(xùn)練，使其了解各種操作規(guī)則的重要性，并依照安全規(guī)則操作菌落測(cè)試儀。

     1.2技術(shù)用語

     菌落：細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖而形成的能被肉眼識(shí)別的生長(zhǎng)物，它是由數(shù)以萬計(jì)相同的細(xì)菌集合而成。當(dāng)樣品被稀釋到一定程度，與培養(yǎng)基混合，在一定培養(yǎng)條件下，每個(gè)能夠生長(zhǎng)繁殖的細(xì)菌細(xì)胞都可以在平板上形成一個(gè)可見的菌落。

     菌落總數(shù)：在一定條件下（如需氧情況、營(yíng)養(yǎng)條件、pH、培養(yǎng)溫度和時(shí)間等）每克（每毫升）檢樣所生長(zhǎng)出來的細(xì)菌菌落總數(shù)。

     像素：構(gòu)成影像的最小單位。

     1.3 使用準(zhǔn)備

     輸入電壓的需求和選擇：本菌落計(jì)數(shù)儀使用的是220V AC±15% 50Hz單相電源。

     使用的周圍環(huán)境條件：溫度：0°C- 40°C;相對(duì)濕度：在20%到80%之間;高度：海拔4000米以下。

     儲(chǔ)存和運(yùn)輸：

     本菌落測(cè)試儀可以在以下條件儲(chǔ)存和運(yùn)輸：

     周圍溫度…………………………………….-10°C到65°C。

     相對(duì)濕度…………………………………….20%到80%。

     高度…………………………………………海拔5000米以下。

     搬動(dòng)儀器時(shí)務(wù)必切斷電源，不然可能導(dǎo)致機(jī)箱內(nèi)電路短路，或者保險(xiǎn)絲燒毀。本儀器必須避免溫度的急劇變化，溫度急劇變化可能導(dǎo)致水氣凝結(jié)于機(jī)體內(nèi)部。

 

 

     第二章：技術(shù)規(guī)范

     2.2 系統(tǒng)參數(shù)

     培養(yǎng)皿類型：<160mm

     成 像

Ø CMOS規(guī)格：1000萬像素，32位真彩
Ø 分辨率：0.05mm
Ø圖像拍攝：焦距、白平衡、色溫可調(diào)
     光  源

Ø 拍攝箱：全封閉、無日光干擾、自動(dòng)居中、暗箱拍攝
Ø光源：LED雙冷光源拍攝系統(tǒng)

     統(tǒng)計(jì)功能

Ø菌落識(shí)別技術(shù)：AutoCount菌落智能識(shí)別技術(shù)。
Ø平皿類型：傾注、涂布、膜濾平皿、3M紙片。
Ø菌落統(tǒng)計(jì)速度：300個(gè)菌落約3秒。
Ø全皿菌落統(tǒng)計(jì)：菌落總數(shù)統(tǒng)計(jì)，并按多檔尺寸分類顯示。
Ø區(qū)域選擇統(tǒng)計(jì)：可選擇任意圓形圈定區(qū)域進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
Ø鼠標(biāo)點(diǎn)擊統(tǒng)計(jì)：快速標(biāo)記、添加菌落，適合培養(yǎng)皿邊緣菌落的計(jì)數(shù)。
Ø人工輔助修正：刪除任意區(qū)域內(nèi)的誤選菌落。
Ø統(tǒng)計(jì)效果調(diào)整：可人為調(diào)整菌落分析的精度。
Ø直徑分類統(tǒng)計(jì)：設(shè)置直徑范圍，統(tǒng)計(jì)特定大小的菌落。

Ø顏色識(shí)別統(tǒng)計(jì)：根據(jù)色度、亮度、飽和度篩選特定菌落。（部分機(jī)型具有）
Ø統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)處理：培養(yǎng)樣本稀釋度輸入實(shí)現(xiàn)自動(dòng)換算。

     數(shù)據(jù)庫
Ø存儲(chǔ)：菌落圖像和全部統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)庫存儲(chǔ)。
Ø查詢：按日期、編號(hào)、樣品類型等條件自動(dòng)搜索查詢，查詢結(jié)果以報(bào)表形式顯示。

Ø數(shù)據(jù)導(dǎo)出：可將查詢到的檢測(cè)結(jié)果導(dǎo)出為獨(dú)立文件夾，內(nèi)有記錄樣品參數(shù)及檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)表文檔及菌落圖像。

     報(bào)表打印
Ø定制報(bào)表：具有對(duì)統(tǒng)計(jì)結(jié)果構(gòu)成報(bào)表的定制功能（需要聯(lián)系本公司專門定制）。

Ø報(bào)表打印：對(duì)圖像、統(tǒng)計(jì)結(jié)果、和編輯內(nèi)容等全部信息的報(bào)表打印。

     RTAC-01型：

     1. POWER鍵   機(jī)箱電源鍵。

     2. 樣品倉(cāng)進(jìn)/出鍵   通過該鍵控制樣品倉(cāng)出入。

     3. 光源選擇鍵   選擇下光源或上光源，默認(rèn)為下光源。

     4.樣品倉(cāng)蓋板

     RTAC-02型：

     1. 顯示器屏幕

     2. AUTO鍵   作為自動(dòng)適應(yīng)顯示制式按鈕操作鍵。

     3. MENU鍵   顯示器菜單選擇鍵。

     4. 減少鍵   選擇顯示器亮度、對(duì)比度、影響調(diào)整、色彩調(diào)整等選項(xiàng)時(shí)的調(diào)整鍵。

     5. 增加鍵   選擇顯示器亮度、對(duì)比度、影響調(diào)整、色彩調(diào)整等選項(xiàng)時(shí)的調(diào)整鍵。

     6. POWER鍵   顯示器電源鍵。

     7. 電源按鈕   菌落計(jì)數(shù)器主機(jī)電源按鈕。

     8. 樣品倉(cāng)及光源   盛放樣品及拍攝相片時(shí)的暗倉(cāng)，及冷光源。

     9、10、USB接口

     3.2側(cè)面板及背面板說明

     1. 機(jī)箱把手   搬運(yùn)本儀器使用機(jī)箱把手以方便運(yùn)輸。

     2. 電源口   標(biāo)準(zhǔn)電源線接口，采用220V交流電，內(nèi)置5A阻容保險(xiǎn)絲，如遇到保險(xiǎn)絲熔斷，請(qǐng)聯(lián)系本公司更換。

     3. USB接口

     第四章 人機(jī)界面說明

     “新檢驗(yàn)”：每次開始檢驗(yàn)前，點(diǎn)擊“新檢驗(yàn)”按鈕，將上次檢驗(yàn)數(shù)據(jù)清除，開始本次檢驗(yàn)。

     “樣品信息”：點(diǎn)擊“樣品信息”按鈕，可以輸入樣品信息。樣品信息是計(jì)數(shù)分析的基礎(chǔ)，必須真實(shí)完整的錄入。（詳見“樣品參數(shù)界面說明”）

     “拍攝照片”：點(diǎn)擊“拍攝照片”按鈕，采集樣品照片。

     “計(jì)數(shù)分析：點(diǎn)擊“計(jì)數(shù)分析”按鈕，可以打開計(jì)數(shù)分析模塊，對(duì)采集的照片進(jìn)行分析。（詳情見“計(jì)數(shù)分析界面說明”）

     “生成報(bào)表”：點(diǎn)擊“生成報(bào)表”按鈕，可將本次數(shù)據(jù)存入報(bào)表，并可以存檔備查或直接打印出來。如不生成報(bào)表，則可以反復(fù)計(jì)數(shù)分析直到得到滿意結(jié)果。（詳情見“報(bào)表界面說明”）

     “查詢歷史記錄”：點(diǎn)擊“查詢歷史記錄”按鈕，可以按時(shí)間、樣品名、樣品型號(hào)等來查詢以往檢測(cè)數(shù)據(jù)。（詳情見“查詢歷史記錄界面說明”）

     “綜合數(shù)據(jù)處理”：專門用于對(duì)檢測(cè)結(jié)果的處理，根據(jù)國(guó)標(biāo)要求分為兩種算法。（詳見“綜合數(shù)據(jù)處理界面說明”）

     “退出”：點(diǎn)擊“退出”按鈕，退出系統(tǒng)，其中RTAC-2型儀器將關(guān)機(jī)。

     當(dāng)點(diǎn)擊完“新檢驗(yàn)”按鈕之后�！皹悠沸畔ⅰ卑粹o將由“灰色”變?yōu)椤昂谏�”即：即可點(diǎn)擊“樣品信息”按鈕，調(diào)出“樣品信息界面”。在此界面中可以通過鍵盤輸入“樣品名稱”“樣品類型”“樣品型號(hào)”“稀釋度”等樣品基本信息，及“檢驗(yàn)依據(jù)”，“培養(yǎng)基”等樣品附加信息。其中：“樣品名稱”、“樣品類型”、“報(bào)表類型”、 “稀釋度”、“密度”、“處理類型”為必填樣品信息，如未正確填入將出現(xiàn) 等錯(cuò)誤提示。其余為選填。樣品信息是計(jì)數(shù)分析的基礎(chǔ)，必須真實(shí)完整的錄入。錄入樣品信息完成后，在主界面下方的信息欄將會(huì)出現(xiàn)本次檢驗(yàn)的樣品信息。如果樣品信息錄入有誤，可以雙擊本條信息，選擇“刪除本條信息”再重新錄入。

     4.3拍攝相片界面說明

     點(diǎn)擊“設(shè)置”可對(duì)相機(jī)進(jìn)行高級(jí)操作：用戶可根據(jù)樣品形態(tài)特征，選取不同的拍攝設(shè)置，達(dá)到更好的相片效果。

     錄入樣品信息之后點(diǎn)擊“拍攝圖片”，系統(tǒng)將采集樣品圖片。然后點(diǎn)擊“計(jì)數(shù)分析”調(diào)出計(jì)數(shù)分析模塊。

     可以通過主界面上的菜單和工具欄對(duì)樣品相片進(jìn)行“打開”、“打印”“放大”“縮小”等操作。

放大、縮小按鈕

     4.4.1對(duì)平皿的檢測(cè)：

     在“樣品信息界面”的“處理類型”中選擇“平板”類型，點(diǎn)擊“打開”按鈕，選取需要計(jì)數(shù)的樣品相片（默認(rèn)相片為本次檢驗(yàn)所拍攝的相片）

     在“精度設(shè)置”選項(xiàng)中選擇計(jì)數(shù)精度：默認(rèn)為“中”精度，適用于大多數(shù)樣品�！案摺本�度，對(duì)于細(xì)小點(diǎn)狀菌落計(jì)數(shù)效果較好�！暗汀本�度，適用于片狀菌落。

     點(diǎn)擊“區(qū)域選擇”按鈕：按照提示選擇計(jì)數(shù)區(qū)域：

（1）正確的計(jì)數(shù)區(qū)域（綠色區(qū)域在培養(yǎng)皿內(nèi)輪廓內(nèi)）

（2）錯(cuò)誤的計(jì)數(shù)區(qū)域

     選定計(jì)數(shù)區(qū)域后點(diǎn)擊鼠標(biāo)左鍵，“確定選擇區(qū)域”。如需重新選擇樣品相片，則點(diǎn)擊右鍵，系統(tǒng)將取消計(jì)數(shù)區(qū)域選擇。選定計(jì)數(shù)區(qū)域后，系統(tǒng)將自動(dòng)處理樣品相片，并彈出一級(jí)控制臺(tái)：

     一級(jí)控制臺(tái)

     在此控制臺(tái)中，用戶可以通過八個(gè)圖像處理通道和一個(gè)閾值調(diào)整滑動(dòng)條進(jìn)行調(diào)整和修正。步驟如下：

     1、通過選擇圖像處理通道，按照不同的方案處理樣品相片。從中選擇最為符合樣品相片形態(tài)的結(jié)果。（默認(rèn)通道為“灰度”通道，適用于大多數(shù)菌落相片，但對(duì)于不同的菌落形態(tài)，可以選擇不同的處理通道，已達(dá)到更好的效果）

     2、在基本結(jié)果的基礎(chǔ)上，可以通過調(diào)整閾值，對(duì)處理結(jié)果進(jìn)行微調(diào)（大多數(shù)情況下，系統(tǒng)自適應(yīng)的閾值即為最優(yōu)閾值，不需要微調(diào)，直接確定即可）

     閾值調(diào)整滑動(dòng)條

     確定圖像處理結(jié)果后，點(diǎn)擊“確定”按鈕，調(diào)出二級(jí)控制臺(tái)及菌落分布結(jié)果。橘黃色圈所圈定的區(qū)域，即為系統(tǒng)識(shí)別菌落。用戶可以通過左邊的控制臺(tái)，對(duì)此判定進(jìn)行修正，并最終確定菌落結(jié)果。

     主要操作方法為：

     “手動(dòng)添加”按鈕 ：可以在結(jié)果圖片上手動(dòng)添加菌落識(shí)別框，通過鼠標(biāo)滾輪可調(diào)節(jié)識(shí)別框大小。

     “手動(dòng)刪除“按鈕 ：可以手動(dòng)刪除一些錯(cuò)認(rèn)的菌落，通過鼠標(biāo)滾輪調(diào)節(jié)刪除區(qū)域大小，可以有選擇的單獨(dú)刪除，也可以面積刪除。只要?jiǎng)h除框內(nèi)包括菌落識(shí)別框圓心，即可刪除。（注意：手動(dòng)刪除僅在“保存該類”按鈕未按下之前有效，“保存該類”后，將不能手動(dòng)刪除）

     “采樣“按鈕 ：對(duì)于某些較為復(fù)雜的識(shí)別結(jié)果，可以通過“采樣”手段來篩選所需菌落形態(tài)。

即：首先點(diǎn)擊“采樣”，圈選一個(gè)符合要求的菌落，（注意：圈選框應(yīng)略小于所選菌落，否則會(huì)引起較大誤差，圈選的菌落盡量選擇較大較為典型的菌落）。再通過調(diào)節(jié)“半徑”和“允許范圍”來調(diào)節(jié)系統(tǒng)根據(jù)典型菌落所識(shí)別出的相似菌落數(shù)。 ，確定后點(diǎn)擊“保存該類”按鈕生成該類。如樣品圖片中含有超過一種類型的菌落，則反復(fù)操作“采樣”---“調(diào)整”---“確定”步驟，直到完全圈選完所有種類，再點(diǎn)擊“保存并退出“按鈕，完成計(jì)數(shù)。

     “默認(rèn)參數(shù)”：當(dāng)調(diào)整參數(shù)偏離較大時(shí)，點(diǎn)擊“默認(rèn)參數(shù)”按鈕，使參數(shù)恢復(fù)到默認(rèn)狀態(tài)。

     “恢復(fù)上一步”按鈕：恢復(fù)上一步操作。

     “清空”按鈕：取消使用者在第二控制臺(tái)對(duì)圖片的所有操作，使樣品圖片恢復(fù)到初始狀態(tài)，即第一控制臺(tái)確定后的狀態(tài)。

     “統(tǒng)計(jì)結(jié)果”：顯示當(dāng)前已確認(rèn)菌落的數(shù)值。

     “保存并退出”：保存菌落計(jì)數(shù)結(jié)果并退出，并將數(shù)據(jù)計(jì)入報(bào)表。（正常計(jì)數(shù)結(jié)束后，按此按鈕退出“

     “退出”：放棄計(jì)數(shù)結(jié)果并退出，計(jì)數(shù)結(jié)果不理想，希望重新開始技術(shù)環(huán)節(jié)，按此按鈕退出。

     “采樣直徑”：采樣點(diǎn)的直徑選擇，與鼠標(biāo)滾輪操作效果相同。

     “半徑”與“容許范圍”：通過調(diào)整該兩種參數(shù)的數(shù)值調(diào)節(jié)采樣點(diǎn)與菌落點(diǎn)的半徑相似程度，篩選不同形態(tài)的菌落，以取得較為合適的菌落點(diǎn)類型。

     典型情況操作范例：針對(duì)不同的樣品菌落分布形態(tài)分為三種情況進(jìn)行處理：

第一種：菌落較為典型，形態(tài)近似于圓形，與背景差異明顯。

例如： 對(duì)于這種情況，僅需在二級(jí)控制臺(tái)通過簡(jiǎn)單的手動(dòng)添加刪除菌落即可達(dá)到理想效果。

第二種：菌落較為細(xì)小，且形態(tài)不分明，近似于小點(diǎn)，與背景差異明顯。

例如： 對(duì)于這種情況，需要在選定計(jì)數(shù)區(qū)域之前在“ ”按鈕中，選擇“高”精度來進(jìn)行特別處理，輔之以手動(dòng)添加刪除，即可以進(jìn)行有效的計(jì)數(shù)分析。

第三種：菌落形態(tài)不規(guī)則，背景有大量的水漬、暗紋等干擾信號(hào)，菌落大小不一差異較大。

例如： 對(duì)于這種情況，首先在一級(jí)控制臺(tái)中對(duì)閾值進(jìn)行微調(diào)，篩去不符合條件的一部分污漬

再在二級(jí)控制臺(tái)中選擇“采樣”按鈕，選擇典型點(diǎn)進(jìn)行采樣，調(diào)整“半徑”和“容許范圍”篩選符合菌落形態(tài)條件的區(qū)域。

通過多次采樣采集到符合條件的菌落類。

再通過手動(dòng)添加刪除篩選部分噪點(diǎn)

得到最終菌落識(shí)別圖片。

點(diǎn)擊“保存及退出“完成計(jì)數(shù)環(huán)節(jié)。

     4.5 報(bào)表界面說明

     計(jì)數(shù)分析結(jié)束后，可以點(diǎn)擊“生成報(bào)表”按鈕，此時(shí)會(huì)有如下提示：

如選擇“取消”，則跳回前一步驟，可以重新進(jìn)行計(jì)數(shù)分析。如選擇“確定”，則系統(tǒng)自動(dòng)生成如下報(bào)表：

該報(bào)表為訂制統(tǒng)一格式報(bào)表，內(nèi)容包括“樣品信息”“檢驗(yàn)結(jié)果”“樣品圖片”等相關(guān)信息�？梢灾苯舆x擇打印或者存檔。存檔為QRP格式報(bào)表文件。

     4.6 查詢歷史記錄界面說明

     本系統(tǒng)可以隨時(shí)查詢歷史報(bào)表。點(diǎn)擊“查詢歷史記錄”即可調(diào)出查詢歷史報(bào)表界面：

在本系統(tǒng)中，報(bào)表可以將日期、樣品名作為查詢條件。其中“日期”為系統(tǒng)默認(rèn)查詢條件，需要添加其他查詢條件時(shí)，必須將條件前的復(fù)選框選中：

當(dāng)選擇并輸入查詢條件之后，點(diǎn)擊右方“查詢”按鈕

即可在下方的信息欄里查詢到符合條件的檢驗(yàn)記錄。

雙擊檢驗(yàn)記錄，可以選擇直接打印或?qū)С鰯?shù)據(jù)

也可以單擊檢驗(yàn)記錄，在界面右方的按鈕中選擇“打印”或“導(dǎo)出”。

    導(dǎo)出的數(shù)據(jù)為以該次檢驗(yàn)時(shí)間、樣品名和檢驗(yàn)次數(shù)為名稱的文件夾。內(nèi)有相同名稱的TXT文件和JPG圖片文件，分別為樣品的相關(guān)信息、檢驗(yàn)結(jié)果和該次檢驗(yàn)的照片。檢驗(yàn)數(shù)據(jù)文件夾，2009-10-6為該次檢驗(yàn)的時(shí)間，CV-098為樣品名，1為檢驗(yàn)次數(shù)（第一次）。相同文件名的圖片文件，為該樣品該次檢驗(yàn)的照片。

Word文件，內(nèi)有該樣品該次檢驗(yàn)的相關(guān)信息和檢驗(yàn)結(jié)果。

Info文件內(nèi)容

     4.7 數(shù)據(jù)處理界面說明

     為了方便快捷的對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行處理，點(diǎn)擊“綜合數(shù)據(jù)處理”調(diào)出數(shù)據(jù)處理模塊:

     針對(duì)不同的檢驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)處理分為兩種情況：

（1）若只有一個(gè)稀釋度平板上的菌落數(shù)符合計(jì)數(shù)范圍，計(jì)算兩個(gè)平板菌落的平均值，再乘以稀釋度作為每克（每毫升）菌落總數(shù)（第一種計(jì)算方法）。

（2）若有兩個(gè)連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)滿足技術(shù)要求，N= 120000"<00"wx:font wx:val="Cambria Math"/>C/(n1+0.1*n2)/d'> 公式處理。式中：

N………………………… 樣品菌落數(shù)

ΣC…………………………適宜計(jì)數(shù)的平板菌落數(shù)之和

n1…………………………第一個(gè)適宜計(jì)數(shù)的稀釋度的平板數(shù)

n2…………………………第二個(gè)適宜計(jì)數(shù)的稀釋度的平板數(shù)

d………………………….稀釋因子（第一稀釋度）

數(shù)據(jù)處理時(shí)，按照以上兩種分類分別填入相關(guān)數(shù)據(jù)，點(diǎn)擊“計(jì)算”按鈕，即可得到最終處理結(jié)果。

 

     第五章 操作流程