為了幫助行業(yè)更好地理解和實(shí)施這一新章節(jié)，美國(guó)藥典（USP）提供了針對(duì)第<86>章使用“使用重組試劑的細(xì)菌內(nèi)毒素測(cè)試”的常見問題解答，旨在全面解析和澄清相關(guān)疑問，確保行業(yè)能準(zhǔn)確理解和高效應(yīng)用這一創(chuàng)新試劑進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)。以下是對(duì)這些問題的詳細(xì)梳理：

Q1：如果第<86>章“使用重組試劑進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)”是1000以下的章節(jié)，為什么需要按照該章節(jié)的規(guī)定完成附加驗(yàn)證？
目前，第<86>章中的方法被視為第<85>章“細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)（BET）”的替代方法。替代方法的定義可在一般注意事項(xiàng)6.30中找到:“替代方法或程序是指除相關(guān)物品的藥典方法或程序以外的任何方法或程序。”

由于第<86>章包含替代方法，因此用戶有責(zé)任確保主要方法（非產(chǎn)品特定方法）已經(jīng)過驗(yàn)證（根據(jù)<1225>藥典程序驗(yàn)證），并且該方法經(jīng)過驗(yàn)證，適用于所測(cè)產(chǎn)品/材料（根據(jù)<1226>藥典程序驗(yàn)證），從而確認(rèn)方法是否適用于檢測(cè)特定產(chǎn)品或材料。對(duì)于第<86>章，應(yīng)評(píng)估供應(yīng)商對(duì)檢測(cè)試劑盒的主要驗(yàn)證，以確定其是否符合USP<1225>中要求的方法驗(yàn)證要求。符合藥典方法驗(yàn)證要求（第<1226>章包含在第<86>章“準(zhǔn)備檢測(cè)”一節(jié)中。

如第<86>章所述，用戶需要查看供應(yīng)商提供的（或內(nèi)部開發(fā)的）主要驗(yàn)證包，以確保該方法的驗(yàn)證狀態(tài)適合其預(yù)期用途。成功完成這些步驟（第<86>章中的主要驗(yàn)證審查和成功完成預(yù)備測(cè)試）可用于證明所選方法適用于所測(cè)試的特定材料。由于迄今為止使用這些試劑的經(jīng)驗(yàn)有限，監(jiān)管機(jī)構(gòu)可能在驗(yàn)收前要求提供更多的具體驗(yàn)證數(shù)據(jù)。

Q2：第<86>章是否與Ph Eur2.6.32協(xié)調(diào)？如果不協(xié)調(diào)，可以協(xié)調(diào)嗎？
對(duì)于美國(guó)藥典（USP）、標(biāo)準(zhǔn)，跨藥典協(xié)調(diào)工作是通過藥物討論組（PDG）進(jìn)行的，與ICHQ4B保持一致。

美國(guó)藥典（USP）、歐洲藥典（EP）、印度藥典委員會(huì)（IPC）和日本藥典（JP）使用鱟源檢測(cè)試劑進(jìn)行的細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)已協(xié)調(diào)一致，為全球和認(rèn)可主要藥典的市場(chǎng)中的最終用戶帶來了巨大利益。通過PDG進(jìn)行協(xié)調(diào)是可以實(shí)現(xiàn)的，也是人們所期望的；目前正在努力開展討論，以便今后與PDG實(shí)現(xiàn)協(xié)調(diào)。

Q3：為什么重組試劑沒有添加到第<85>章？
因?yàn)榈?lt;85>章是一個(gè)與歐洲、印度和日本的相應(yīng)章節(jié)相協(xié)調(diào)的章節(jié)。這些章節(jié)是ICHQ4B的一部分，這意味著它們?cè)贗CH地區(qū)的監(jiān)管機(jī)構(gòu)內(nèi)被認(rèn)為是可以互換的。因此，要及時(shí)進(jìn)行修改比較困難。希望協(xié)調(diào)當(dāng)前和未來的rBET章節(jié)；請(qǐng)參閱上面有關(guān)協(xié)調(diào)的問題。

Q4：USP如何評(píng)估多種產(chǎn)品和材料的研究數(shù)據(jù)，以證明將第<86>章確立為適用章節(jié)是合理的？
USP通用章節(jié)微生物學(xué)專家委員會(huì)的內(nèi)毒素和熱原小組委員會(huì)根據(jù)小組委員會(huì)的集體專業(yè)知識(shí)、現(xiàn)有的同行評(píng)審文獻(xiàn)、對(duì)公開和提交的機(jī)密最終用戶數(shù)據(jù)和驗(yàn)證的廣泛審查以及政府聯(lián)絡(luò)人的意見制定了第<86>章。繼續(xù)生成rBET數(shù)據(jù)并提交給全球藥典將能夠確定跨產(chǎn)品的適用性。

Q5：為什么重組級(jí)聯(lián)試劑（rCR）被納入第<86>章？
USP微生物專家委員會(huì)（MEC）內(nèi)毒素小組委員會(huì)在廣泛審查公開和提交的機(jī)密最終用戶數(shù)據(jù)和驗(yàn)證以及現(xiàn)有的同行評(píng)審文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上制定了第<86>章。同行評(píng)審文獻(xiàn)中存在大量使用rFC和rCR的BET數(shù)據(jù)，MEC在制定本章時(shí)還審查了非公開/保密數(shù)據(jù)。在考慮這些信息的同時(shí)，還認(rèn)識(shí)到重組試劑相當(dāng)于天然因子C的生物技術(shù)，而天然因子C是負(fù)責(zé)檢測(cè)馬蹄蟹內(nèi)毒素的生物傳感器。

此外，rCR酶級(jí)聯(lián)始于rFC。綜合所有這些信息和數(shù)據(jù)，MEC一致認(rèn)為，納入rCR得到了所審查的科學(xué)和數(shù)據(jù)的支持。推進(jìn)rBET章節(jié)符合USP擴(kuò)大使用無動(dòng)物方法和材料的承諾。

Q6：是否需要進(jìn)行廣泛的可比性/等效性研究，以證明從第<85>章過渡到第<86>章是合理的？
對(duì)于大多數(shù)內(nèi)毒素檢測(cè)產(chǎn)品來說，不需要進(jìn)行廣泛的可比性/等效性研究。在大多數(shù)情況下，只需證明產(chǎn)品特定方法的適用性即可，這在實(shí)踐中與第<85>章類似�？赡芸倳�(huì)有例外情況，這些例外情況應(yīng)基于最終用戶的經(jīng)驗(yàn)和材料特性。在某些情況下，可與相關(guān)監(jiān)管機(jī)構(gòu)一起對(duì)方法進(jìn)行主動(dòng)審查。

第<86>章采用了與第<85>章相同的內(nèi)毒素容許限度、測(cè)量單位和主要參考標(biāo)準(zhǔn)。這與從兔熱原試驗(yàn)（RPT）過渡到內(nèi)毒素檢測(cè)時(shí)實(shí)施的第<85>章形成鮮明對(duì)比，后者沒有這些質(zhì)量控制功能，僅包括動(dòng)物飼養(yǎng)最佳實(shí)踐。

此外，rBET是建立在數(shù)十年成熟的生物技術(shù)科學(xué)基礎(chǔ)之上的，其作用機(jī)制相同：rFC是鱟因子C的克隆，細(xì)菌內(nèi)毒素的檢測(cè)是通過生物傳感器鱟因子C進(jìn)行的。

Q7：第<86>章的實(shí)施是否會(huì)影響USP第<151>章熱原檢測(cè)法的使用？
第<86>章的引入是USPMEC開發(fā)非動(dòng)物測(cè)試模型的第一步。雖然第<86>章的引入對(duì)章節(jié)<151>沒有直接影響，但它為引入可替代動(dòng)物測(cè)試模型的新技術(shù)提供了一個(gè)框架。在MEC利益相關(guān)者的支持下，正在探索其他技術(shù)（例如單核細(xì)胞活化測(cè)試，MAT）以供未來引入。增加新的體外技術(shù)和/或儀器技術(shù)是USP致力于擴(kuò)大無動(dòng)物試驗(yàn)方法和材料使用范圍的一部分。