熒光免疫層析原理的簡單介紹
瀏覽次數(shù):463 發(fā)布日期:2024-10-8
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熒光免疫層析的概念就是一種基于抗體-抗原特異性識別的分析技術(shù),通過熒光信號來檢測移動的目標(biāo)分子。該技術(shù)結(jié)合了免疫學(xué)、熒光學(xué)和生物化學(xué)等多個學(xué)科,具有高特異性、快速、簡便應(yīng)用廣泛等優(yōu)點,不過層析檢測有一定的滯后性,檢測物里的目標(biāo)物達(dá)到一定的濃度才能被檢測到,相比于PCR靈敏度不高。下面簡單介紹一下免疫熒光層析。
一、熒光免疫層析原理
熒光免疫層析技術(shù)以固定有檢測線(包被抗原,T 線)和質(zhì)控線(抗抗體,C 線)的條狀纖維層析材料為固定相,以測試液為流動相,熒光標(biāo)記抗體或抗原固定于連接墊,通過毛細(xì)管作用使待分析物在層析條上移動。
對于帶有多個抗原決定簇的大分子抗原(蛋白、病毒等),通常采用「三明治」型雙抗夾心免疫層析方法,即待測物在流動相作用下先與熒光標(biāo)記抗體結(jié)合,當(dāng)?shù)竭_(dá)檢測線時再與包被抗體結(jié)合形成雙抗夾心的「三明治」型。
檢測時,樣品溶液在毛細(xì)效應(yīng)下向上層析會出現(xiàn)兩種顯示結(jié)果:如果是陰性,樣本與熒光抗體不結(jié)合,熒光抗體與特定樣品偶聯(lián)劑結(jié)合,配套儀器檢測結(jié)果為陰性;如果是陽性,則樣本與熒光抗體先發(fā)生反應(yīng),當(dāng)樣本抗原含量達(dá)到一定量時,熒光抗體就不再與測試區(qū)的特定樣品偶聯(lián)劑結(jié)合,配套儀器檢測結(jié)果為陽性。
二、熒光免疫層析用途
1. 生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域:檢測人體內(nèi)各種生物分子,如腫瘤標(biāo)記物、病毒、細(xì)菌、藥物等,用于臨床診斷、治療監(jiān)測等方面。
2. 生命科學(xué)領(lǐng)域:檢測蛋白質(zhì)、核酸、細(xì)胞和細(xì)胞分子等,用于基因表達(dá)分析、蛋白質(zhì)相互作用研究、細(xì)胞分析等方面。
三、熒光免疫層析的缺點
由于實驗室溫度、濕度、光照等條件不穩(wěn)定、試劑盒存儲不當(dāng)、熒光素底物穩(wěn)定性差等原因,可能會導(dǎo)致檢測結(jié)果不穩(wěn)定。
四、熒光免疫層析發(fā)展趨勢
熒光免疫層析技術(shù)在臨床診斷領(lǐng)域的應(yīng)用最為廣泛,特別是在傳染病快速篩查、腫瘤標(biāo)志物檢測以及心血管疾病早期診斷等方面發(fā)揮了重要作用。
除了臨床診斷外,熒光免疫層析分析還逐漸應(yīng)用于食品安全檢測、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域,為這些領(lǐng)域的快速檢測提供了有力支持。
熒光免疫層析市場在未來幾年內(nèi)將繼續(xù)保持穩(wěn)健增長的態(tài)勢。隨著技術(shù)進(jìn)步和市場需求的雙重驅(qū)動,我們有理由相信該行業(yè)將迎來更加廣闊的發(fā)展前景。