1.儀器與試藥
1.1　儀器
電感耦合等離子體質(zhì)譜儀；微波消解儀；電子天平；超純水系統(tǒng)。
1.2　試藥
混合標(biāo)準(zhǔn)溶液[含鋰(Li)、鈹(Be)、鈉(Na)、鎂(Mg)、鋁(Al)、鉀(K)、鈣(Ca)、V、Cr、錳(Mn)、鐵(Fe)、Co、Ni、Cu、鋅(Zn)、鎵(Ga)、As、Se、銣(Rb)、鍶(Sr)、Ag、Cd、銫(Cs)、Ba、Hg、Tl、Pb、鈾(U)各10μg·mL−1，批號(hào)：51-116CRY2]、汞標(biāo)準(zhǔn)溶液(含量9.98μg·mL−1，批號(hào)：13-7HGY2)、內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液[含鉍(Bi)、鍺(Ge)、銦(In)、Li、鈧(Sc)、鋱(Tb)、釔(Y)各100μg·mL−1，批號(hào)：51-082CRY2]和調(diào)諧液[含鈰(Ce)、Co、Li、鈦(Ti)、Y各10μg·mL−1，批號(hào)：30-203GSX2]均購(gòu)于美國(guó)Agilent公司；柑橘葉[編號(hào)GBW10020(GSB-11)]生物成分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)購(gòu)于中國(guó)地質(zhì)科學(xué)院地球物理地球化學(xué)勘察研究所。硝酸為分析純(65%)，水由超純水系統(tǒng)制得。43種兒科常用中藥口服液體。

2.方法與結(jié)果
2.1　溶液制備
2.1.1　內(nèi)標(biāo)、參比溶液　
精密量取內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2%硝酸溶液配制成濃度為1μg·mL−1的溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液；精密量取內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2%硝酸溶液配制成濃度為100ng·mL−1溶液，作為半定量測(cè)定的參比溶液。
2.1.2　標(biāo)準(zhǔn)溶液　
取混合標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2%硝酸溶液分別配制成各元素濃度均為1、10、20、50、100、500ng·mL−1的系列混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液，作為系列標(biāo)準(zhǔn)溶液1；取汞標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2%硝酸溶液分別配制成濃度為0.01、0.1、0.2、0.5、1、2、5ng·mL−1系列汞元素標(biāo)準(zhǔn)品溶液，作為系列標(biāo)準(zhǔn)溶液2。
2.1.3　供試品溶液　
口服溶液劑、合劑(編號(hào)：1~34)：精密量取樣品1mL，置消解罐中，加入硝酸8mL，100℃預(yù)消解30min，放冷，密塞，微波消解(消解程序見(jiàn)表2)，放冷，取出。將消解液轉(zhuǎn)移至50mL量瓶?jī)?nèi)，用少量2%硝酸溶液洗滌消解罐3次，合并洗滌液，用2%硝酸溶液定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液1。糖漿劑、膏劑(編號(hào)：35~54)：取樣品約1g，精密稱(chēng)定，置消解罐中，與口服溶液劑、合劑同法配制，作為供試品溶液2。同法平行制備空白溶液。

如定量測(cè)定元素超出標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍，用2%硝酸溶液定量稀釋至線性范圍，作為測(cè)定該元素的供試品溶液。

2.2　半定量分析
2.2.1　半定量分析儀器參數(shù)　
氦反應(yīng)模式，RF功率1550W，采樣深度8mm，霧化氣流量0.80L·min−1，蠕動(dòng)泵轉(zhuǎn)速0.3rps，霧化室溫度2℃，補(bǔ)償氣流量0.25L·min−1；質(zhì)譜圖采集模式，峰型6個(gè)點(diǎn)，重復(fù)次數(shù)1，掃描次數(shù)100。
2.2.2　半定量分析方法　
檢測(cè)包括m/z為7(Li)~238(U)的75種元素。依次采集儀器背景噪音(超純水)、參比溶液、空白對(duì)照溶液、54個(gè)供試品溶液的數(shù)據(jù)，以參比溶液元素響應(yīng)值及濃度值，計(jì)算并更新半定量響應(yīng)因子，繪制半定量靈敏度曲線，見(jiàn)圖1。以靈敏度曲線為基礎(chǔ)，篩查樣品溶液中的元素種類(lèi)和濃度。

2.2.3　半定量分析結(jié)果　
根據(jù)半定量測(cè)定的濃度計(jì)算得到樣品中元素的含量。參考ICHQ3D中口服途徑元素雜質(zhì)限量，編號(hào)9樣品的Pb殘留量超過(guò)規(guī)定限度；參考中國(guó)藥典2020年版[4]，編號(hào)10、12、26和28樣品的Hg殘留量超過(guò)規(guī)定限度；其他元素以及其他的樣品的各元素均在規(guī)定限度范圍以?xún)?nèi)。2.2.4　元素篩選　根據(jù)半定量分析結(jié)果判定元素是否存在或有無(wú)定量必要，結(jié)合藥典和ICH指導(dǎo)原則等文獻(xiàn)資料確定定量分析的重金屬及有害元素種類(lèi)。排除的元素包括6種內(nèi)標(biāo)元素，硼(B)、碳(C)、氮(N)等非金屬元素，日常規(guī)攝入量較多且大部分樣品中含量較高的Na、Mg、K、Ca等元素，含量普遍極低甚至未檢出的金(Au)、鈀(Pd)、銥(Ir)等元素。選定半定量檢出量較大、屬于中國(guó)藥典中規(guī)定的重金屬及有害元素或ICHQ3D中規(guī)定的1、2、3類(lèi)元素雜質(zhì)進(jìn)行定量分析，包括V、Cr、Co、Ni、Cu、As、Se、Ag、Cd、Ba、Hg、Tl、Pb等13種。

2.3　定量分析
2.3.1　定量分析儀器參數(shù)　
氦反應(yīng)模式，RF功率1550W，采樣深度8mm，載氣流量1.05L·min−1，蠕動(dòng)泵轉(zhuǎn)速0.10rps，霧化室溫度2℃；質(zhì)譜圖采集模式，峰型3個(gè)點(diǎn)，重復(fù)次數(shù)3，掃描次數(shù)100。
2.3.2　定量分析方法　
依次采集系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液1和標(biāo)準(zhǔn)溶液2、空白溶液、54個(gè)供試品溶液，采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量測(cè)定樣品中13種元素的含量。按同位素豐度表推薦的質(zhì)量數(shù)選取同位素，分別為51V、52Cr、59Co、60Ni、63Cu、75As、79Se、107Ag、111Cd、137Ba、202Hg、203Tl、208Pb。其中，51V和52Cr以45Sc作內(nèi)標(biāo)，59Co、60Ni、63Cu、75As和79Se以72Ge作內(nèi)標(biāo)，107Ag和111Cd以115In作內(nèi)標(biāo)，137Ba以159Tb作內(nèi)標(biāo)，202Hg、203Tl和208Pb以209Bi作內(nèi)標(biāo)。
2.3.3　線性關(guān)系考察　
取標(biāo)準(zhǔn)溶液1和標(biāo)準(zhǔn)溶液2，進(jìn)行測(cè)定。以每秒計(jì)數(shù)值(CPS)為縱坐標(biāo)(Y)，以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)(X)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見(jiàn)表3。
2.3.4　檢測(cè)限和定量限　
取空白溶液連續(xù)進(jìn)樣11次，以空白溶液測(cè)定值的3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差所對(duì)應(yīng)的待測(cè)元素濃度作為檢測(cè)限，以空白溶液測(cè)定值的10倍標(biāo)準(zhǔn)偏差所對(duì)應(yīng)的待測(cè)元素濃度作為定量限，結(jié)果見(jiàn)表3。
2.3.5　儀器精密度試驗(yàn)　
取濃度為50ng·mL−1的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液和0.5ng·mL−1的汞元素標(biāo)準(zhǔn)溶液，各連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算13種元素每秒計(jì)數(shù)值(CPS)的RSD。結(jié)果見(jiàn)表3，表明儀器精密度良好。

2.3.6　重復(fù)性試驗(yàn)　
取編號(hào)3樣品，按“2.1.3”項(xiàng)下方法平行制備供試品溶液6份，進(jìn)樣測(cè)定各元素的濃度，計(jì)算RSD。結(jié)果見(jiàn)表3，表明方法的重復(fù)性良好。
2.3.7　穩(wěn)定性試驗(yàn)　
取編號(hào)3供試品溶液，室溫放置，分別于0、1、3、6、9、12、18和24h進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算13種元素CPS的RSD。結(jié)果見(jiàn)表3，表明供試品溶液在24h基本穩(wěn)定。
2.3.8　加樣回收試驗(yàn)　
取編號(hào)3樣品6份，分別精密加入10μg·mL−1混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液200μL和1μg·mL−1汞元素標(biāo)準(zhǔn)品溶液20μL，按“2.1.3”項(xiàng)下方法制備供試溶液，進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算13種元素加樣回收率及RSD，結(jié)果見(jiàn)表3，表明方法的準(zhǔn)確度良好。
2.3.9　方法可靠性驗(yàn)證　
取柑橘葉約0.5g，精密稱(chēng)定，按“2.1.3”項(xiàng)下方法配制測(cè)定溶液、按“2.3.2”項(xiàng)下方法測(cè)定，計(jì)算含量，結(jié)果見(jiàn)表4。結(jié)果顯示，各元素的測(cè)定值均在認(rèn)定值的可信范圍內(nèi)，表明方法測(cè)定的結(jié)果可信。
2.3.10　定量分析結(jié)果　
按“2.3.2”項(xiàng)下方法測(cè)定54批樣品，結(jié)果見(jiàn)圖2。參考ICHQ3D中口服途徑元素雜質(zhì)限量，編號(hào)9樣品的Pb殘留量超過(guò)規(guī)定限度；參考中國(guó)藥典2020年版[4]，編號(hào)10和26樣品的Hg殘留量超過(guò)規(guī)定限度；其他元素以及其他的樣品的各元素均在規(guī)定限度范圍以?xún)?nèi)。
方法來(lái)源：[1]周遠(yuǎn)華,夏學(xué)深,張立雯,等.基于ICP-MS的兒科常用中藥口服液體制劑的重金屬及有害元素殘留量測(cè)定及其風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[J/OL].中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué),1-7[2024-09-18].https://doi.org/10.13748/j.cnki.issn1007-7693.20231171.