纖維連接蛋白,也稱纖連蛋白,英文名稱fibronectin(英文縮寫FN)是一種高分子量糖蛋白,Fibronectin可以分為血漿纖連蛋白(plasma FN)和細胞纖連蛋白(cFN)。在血漿中以可溶性二聚體形式存在,而在細胞表面和細胞外基質中以二聚體或多聚體形式存在。血漿纖連蛋白由肝細胞合成,并以一種非活性、緊密的構象存在于血流中,它是纖維蛋白凝塊的一個主要組分。細胞纖連蛋白廣泛存在于細胞外基質中,通過與細胞表面整合素等受體相互作用,發(fā)揮細胞黏附、遷移和信號轉導作用。
重組人纖維連接蛋白 (rhFN)是體外表達的人源性纖維連接蛋白,選取特定的人纖連蛋白功能性片段,表達密碼子優(yōu)化的重組纖連蛋白,從而既可以解決大量生產的問題,同時也降低了成本,與天然FN功能和效應相同。
本產品包括細胞結合域(central cell-binding domain,含RGD序列),肝磷脂結合域(heparin-binding domain)和 CS1 位點三個功能區(qū)域。它由 574 個氨基酸組成,分子量 63 kDa。
本產品用重組大腸桿菌基因表達生產人粘連蛋白片段,高純度,高活性,無動物源性污染。
重組人纖連蛋白(rhFN)具有以下主要應用:
一、用于細胞培養(yǎng):
rhFN可促進細胞貼壁、細胞黏連生長增殖、維持良好細胞狀態(tài)。用于體外哺乳動物細胞培養(yǎng)基中,可以增強多種細胞對基質的黏附,提高細胞生長和擴增效率,特別適用于骨髓間充質干細胞、內皮細胞和神經干細胞等的培養(yǎng)。
細胞的黏連是機體結構得以維持、細胞生長完成的必要條件,研究結果表明:rhFN作為細胞培養(yǎng)的基質,可以促進細胞的黏連生長,使多種細胞的貼壁率達到90%以上(對照組為10%),細胞形態(tài)結構良好,細胞的代謝率增強,DNA、RNA及蛋白質合成速度提高約5倍,細胞的集落率升高幾倍,原代培養(yǎng)的成活率明顯提高,細胞生長時間縮短。
同時,rhFN能刺激細胞增殖。作用原理是:rhFN和抗CD3抗體可分別與T淋巴細胞上的VLA和TCR結合,兩者共同作用激活酪氨酸激酶pp125FAK,通過Ras途徑刺激T細胞的增殖和分化,使其獲得上千倍的增殖。
二、提高病毒轉染效率
本產品能夠大幅地提高逆轉錄病毒感染哺乳動物細胞的感染效率,其作用原理是:細胞表面 VLA-4 及 VLA-5 可分別與本產品上的 CS-1 位點及細胞結合域結合,逆轉錄病毒載體可以與肝磷脂結合域結合。
在經本產品包被的培養(yǎng)容器表面,細胞與病毒載體以高濃度共存,從而顯著提高病毒的轉染效率。
本產品包被在細胞培養(yǎng)皿表面時,顯著增強了哺乳動物和昆蟲細胞的轉染能力。
三、應用于材料表面涂層,促進細胞黏附
纖連蛋白存在于多種動物細胞表面的大分子細胞外膜蛋白,是細胞外基質和基底膜中的主要非膠原性糖蛋白。在細胞黏附中起中心作用,可調節(jié)細胞極性、分化和生長。
rhFN用于3D細胞培養(yǎng)技術中制備細胞外基質,為細胞提供更加生理性的微環(huán)境,有利于維持干細胞的自我更新和定向分化。用rhFN來包被容器可以增強細胞的附著、生長和分化。與在平坦的2D塑料表面上生長的細胞不同,包被表面上的細胞生長更接近天然環(huán)境。
對于貼壁依賴性細胞系,rhFN可作為非動物源性細胞附著和生長的有效基質,用其包被培養(yǎng)容器后,可促進多種細胞的快速附著和良好生長。
將rhFN涂到微球載體上作為細胞大量生產的介質,可以節(jié)省空間,節(jié)省原材料,成為應用培養(yǎng)細胞技術來生產新藥品的基礎物質。
還可將rhFN用于醫(yī)療器材、移植物和人工生物材料的表面涂布,可以改善其生物相容性,促進體內纖維化和血管再生,減少炎癥反應和免疫排斥。
四、其它應用
1、rhFN能提高細胞的融合率,縮短融合周期,可應用于許多科研中,如應用于細胞雜交瘤技術等。
2、rhFN具有促進細胞遷移、改變細胞形態(tài)和增強細胞化學活動性的能力,可用于3D細胞培養(yǎng)、組織器官構建和創(chuàng)傷修復中誘導細胞走向定向遷移與黏附。
3、rhFN參與細胞外基質的組裝與重構,可用于改善細胞外基質的完整性,增強其功能和穩(wěn)定性。在某些疾病相關的ECM重構障礙中具有潛在治療作用。
4、rhFN可用于促進內皮細胞遷移與管腔形成,誘導血管發(fā)生,還可用于抗凝血、抗感染和改善組織相容性、創(chuàng)面修復與組織再生、血管發(fā)生與修復、 腫瘤治療、肝臟修復與再生等。
產品特色:
1. 更安全,無任何動物源污染風險;
2. 更可靠,批間穩(wěn)定性好,可實現單批次無限量供應;
3. 更穩(wěn)定,所有生產物料全部國產化,保證供應鏈穩(wěn)定;
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