納米傅里葉紅外光譜儀助力實(shí)現(xiàn)單個(gè)蛋白質(zhì)的紅外振動(dòng)光譜的檢測
瀏覽次數(shù):1084 發(fā)布日期:2024-3-28
來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
近日,日本分子科學(xué)研究所的西田純助教、熊谷崇副教授的研究團(tuán)隊(duì)利用Neaspec公司研發(fā)的納米傅里葉紅外光譜儀-Nano-FTIR在單蛋白領(lǐng)域取得重要進(jìn)展,實(shí)現(xiàn)單個(gè)蛋白質(zhì)的紅外振動(dòng)光譜的檢測。相關(guān)研究成果以Sub-Tip-Radius Near-Field Interactions in Nano-FTIR Vibrational Spectroscopy on Single Proteins為題,發(fā)表于Nano Letters上[1]。
紅外光譜是研究分子結(jié)構(gòu)和功能的重要工具之一。傳統(tǒng)紅外光譜測量通常需要使用大量的樣品并且空間分辨率較低,難以應(yīng)用于單個(gè)蛋白分子的研究。本文中使用的納米傅里葉紅外光譜儀-Nano-FTIR采用全新的散射式核心技術(shù),有效突破了光學(xué)分辨率的極限,空間分辨率優(yōu)于10 nm,突破性的實(shí)現(xiàn)了單個(gè)蛋白的紅外光譜成像。
納米傅里葉紅外光譜儀-Nano-FTIR
在本研究中,作者將納米傅里葉紅外光譜儀-Nano-FTIR中紅外波段的光源發(fā)出的光,利用邁克爾遜干涉裝置分成兩束,一束經(jīng)透射到達(dá)動(dòng)鏡,另一束經(jīng)反射到達(dá)定鏡。兩束光分別經(jīng)定鏡和動(dòng)鏡反射再回到分束器,動(dòng)鏡以恒定速度作直線運(yùn)動(dòng),因而經(jīng)分束器分束后的兩束光形成光程差,產(chǎn)生干涉。干涉光在分束器會(huì)合后通過針尖,在針尖頂點(diǎn)形成一個(gè)比激發(fā)波長小幾千倍,尺寸只由針尖曲率半徑?jīng)Q定的納米焦點(diǎn)。針尖的天線效應(yīng)將含有樣品近場信息的干涉光反饋給HgCdTe檢測器,然后通過設(shè)備控制器的信號處理模塊,利用傅里葉變換對信號進(jìn)行處理,最終得到透過率或吸光度隨波數(shù)或波長的納米級局部紅外吸收光譜圖。
納米傅里葉紅外光譜儀-Nano-FTIR測量單一蛋白質(zhì)的紅外近場顯微光譜示意圖
隨后,研究團(tuán)隊(duì)利用納米傅里葉紅外光譜儀-Nano-FTIR對由~500個(gè)氨基酸殘基組成的單個(gè)蛋白質(zhì)的酰胺I振動(dòng)進(jìn)行了表征。該單蛋白在空氣氣氛中制備于尺寸僅為4×4×8 nm的原子級平滑的金基底上。該金屬性基底與設(shè)備針尖共同作用,為實(shí)驗(yàn)者提供了純凈的高階信號,并通過針尖曲率半徑所提供的幾何特性,為表征提供了納米級的空間分辨率。
單個(gè)蛋白的納米傅里葉紅外吸收成像及光譜圖
該研究對于理解蛋白質(zhì)功能和相互作用具有重要意義,并且為納米級紅外光譜在各個(gè)領(lǐng)域的應(yīng)用開辟了新的可能性。該研究的成功代表我們向使用中紅外光進(jìn)行超靈敏和高分辨率的成像邁出了重要的一步。研究者所使用的納米傅里葉紅外光譜儀-Nano-FTIR在分子生物學(xué)(用于精確蛋白質(zhì)分析)、材料科學(xué)(用于納米材料表征)以及醫(yī)學(xué)診斷(用于識別疾病分子標(biāo)記)等領(lǐng)域都開辟了多種應(yīng)用。
參考文獻(xiàn):
[1]. Nishida et al., Sub-Tip-Radius Near-Field Interactions in Nano-FTIR Vibrational Spectroscopy on Single Proteins, Nano Lett. 2024, 24, 3, 836–843