哺乳動(dòng)物表達(dá)常用的細(xì)胞系簡(jiǎn)介
瀏覽次數(shù):1112 發(fā)布日期:2024-3-28
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在哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中,受體細(xì)胞是用于表達(dá)外源基因或蛋白質(zhì)的宿主細(xì)胞。哺乳動(dòng)物細(xì)胞在重組蛋白的生產(chǎn)中起著至關(guān)重要的作用,并且選擇哺乳動(dòng)物細(xì)胞是綜合有效表達(dá)外源基因、支持適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)折疊和翻譯后修飾以及提供高蛋白質(zhì)產(chǎn)量的能力等因素。以下是哺乳系統(tǒng)表達(dá)中使用的一些常見哺乳動(dòng)物細(xì)胞及其各自的特征:
1.中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞:
特性:CHO細(xì)胞是最廣泛用于蛋白質(zhì)表達(dá)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系之一,來源于中國倉鼠(Cricetulus griseus)的卵巢,具有高轉(zhuǎn)染效率、強(qiáng)大的生長特性和進(jìn)行復(fù)雜翻譯后修飾的能力。
優(yōu)點(diǎn):CHO細(xì)胞蛋白表達(dá)通過適當(dāng)?shù)恼郫B、糖基化和分泌產(chǎn)生高水平的重組蛋白,CHO細(xì)胞適用于瞬時(shí)和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法,并與各種表達(dá)載體和培養(yǎng)條件兼容。
應(yīng)用:CHO細(xì)胞通常用于CHO細(xì)胞蛋白表達(dá)、生產(chǎn)單克隆抗體等。
2.人胚胎腎(HEK)293細(xì)胞:
特點(diǎn):HEK 293細(xì)胞來源于人胚胎腎組織,轉(zhuǎn)染效率高,培養(yǎng)生長快,并且在生產(chǎn)重組蛋白方面是有效的,由于它們能夠在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生高水平的重組蛋白,因此被廣泛用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。
優(yōu)點(diǎn):HEK 293細(xì)胞表達(dá)蛋白具備人類來源的優(yōu)勢(shì),可通過HEK 293細(xì)胞生產(chǎn)具有翻譯后修飾的重組蛋白,適合大規(guī)模生產(chǎn)蛋白質(zhì),并且可以容易地適應(yīng)懸浮培養(yǎng)用于基于生物反應(yīng)器的生產(chǎn)。這些細(xì)胞具有生長快、轉(zhuǎn)染效率高、能夠進(jìn)行適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)折疊和翻譯后修飾等優(yōu)點(diǎn)。
應(yīng)用:HEK 293細(xì)胞表達(dá)蛋白、病毒載體和病毒疫苗,以及蛋白質(zhì)定位和相互作用研究,HEK293細(xì)胞通常用于研究,包括蛋白質(zhì)表征、功能研究和用于基因治療應(yīng)用的病毒載體的生產(chǎn)。
3.小倉鼠腎臟(BHK)細(xì)胞:
特征:BHK細(xì)胞來源于幼倉鼠(Mesocricetus auratus)的腎組織,通常用于表達(dá)病毒載體和生產(chǎn)疫苗。它們對(duì)多種病毒高度寬容,通常用于生產(chǎn)病毒疫苗,如流感、狂犬病和脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗,表現(xiàn)出良好的轉(zhuǎn)染效率,并且適用于粘附培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)。
優(yōu)點(diǎn):BHK細(xì)胞支持病毒載體的有效復(fù)制,并經(jīng)常用于生產(chǎn)重組病毒,包括逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒和腺病毒。由于它們能夠在懸浮培養(yǎng)中生長到高細(xì)胞密度,因此非常適合大規(guī)模生產(chǎn)。
應(yīng)用:BHK細(xì)胞用于生產(chǎn)用于基因治療、疫苗開發(fā)和病毒學(xué)研究的病毒載體。
4.NS0和SP2/0骨髓瘤細(xì)胞:
特點(diǎn):NS0和SP2/0骨髓瘤細(xì)胞是小鼠來源的骨髓瘤細(xì)胞系,通常用于生產(chǎn)單克隆抗體。這些細(xì)胞表現(xiàn)出與產(chǎn)生抗體的B細(xì)胞的高融合效率,并且可以用于產(chǎn)生用于產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞系。
優(yōu)點(diǎn):NS0和SP2/0細(xì)胞具有高水平的抗體分泌能力,可適應(yīng)懸浮培養(yǎng)大規(guī)模生產(chǎn)。提供穩(wěn)定和連續(xù)的抗體生產(chǎn),并與各種表達(dá)載體和選擇系統(tǒng)兼容。
應(yīng)用:NS0和SP2/0細(xì)胞用于生產(chǎn)單克隆抗體,用于治療、診斷和研究目的。
5.小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEFs):
特征:MEFs是來源于小鼠胚胎的原代成纖維細(xì)胞,通常用于誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)的產(chǎn)生和重組蛋白的生產(chǎn)。它們表現(xiàn)出良好的轉(zhuǎn)染效率,并且可以支持體細(xì)胞有效地重編程為iPSC。
優(yōu)點(diǎn):MEF為iPSC的培養(yǎng)提供了一個(gè)飼養(yǎng)層,并支持其在未分化狀態(tài)下的擴(kuò)增和維持。它們可用于生產(chǎn)用于基因治療應(yīng)用的重組蛋白和病毒載體。
應(yīng)用:MEFs用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的iPSC生成、蛋白質(zhì)表達(dá)和基因編輯研究。
6.人細(xì)胞系(例如,HEK293T、HeLa、A549):
在哺乳系統(tǒng)表達(dá)中會(huì)使用各種人類細(xì)胞系,例如HEK293T、HeLa和A549。這些細(xì)胞系提供了諸如類人蛋白表達(dá)和翻譯后修飾模式等優(yōu)勢(shì),使其特別適用于涉及人類蛋白或蛋白質(zhì)復(fù)合物表達(dá)的應(yīng)用。人類細(xì)胞系通常用于研究目的,包括功能研究、蛋白質(zhì)相互作用和藥物篩選。
每種哺乳動(dòng)物細(xì)胞系都提供了適合不同應(yīng)用的特定優(yōu)勢(shì)和特性,哺乳動(dòng)物細(xì)胞的選擇取決于各種因素,如所表達(dá)蛋白質(zhì)的性質(zhì)、所需的翻譯后修飾和預(yù)期的下游應(yīng)用。