蛋白質(zhì)組學(xué)研究在揭示生物體內(nèi)蛋白質(zhì)表達(dá)和功能方面起著重要作用。然而,由于蛋白質(zhì)組的復(fù)雜性和動(dòng)態(tài)性,傳統(tǒng)的質(zhì)譜技術(shù)在全面解析復(fù)雜蛋白質(zhì)組中存在一定的局限性。幸運(yùn)的是,隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,SWATH(Sequential Window Acquisition of all Theoretical fragment-ion spectra)質(zhì)譜技術(shù)的出現(xiàn)為我們提供了一種突破性的方法,可實(shí)現(xiàn)全面而精確的蛋白質(zhì)組分析。
圖1
1.傳統(tǒng)質(zhì)譜技術(shù)的局限性:
傳統(tǒng)的質(zhì)譜技術(shù),如數(shù)據(jù)依賴的斷裂(data-dependent acquisition,DDA)質(zhì)譜法,已經(jīng)為我們提供了許多重要的蛋白質(zhì)組學(xué)信息。然而,這些方法面臨著一些挑戰(zhàn)。首先,DDA方法在分析復(fù)雜樣品時(shí)往往會(huì)遺漏一些低豐度的蛋白質(zhì),限制了對(duì)全面蛋白質(zhì)組的認(rèn)識(shí)。其次,由于DDA的隨機(jī)性,同一樣品的不同實(shí)驗(yàn)可能會(huì)產(chǎn)生不一致的結(jié)果,影響數(shù)據(jù)的可重復(fù)性和可靠性。
2.SWATH質(zhì)譜技術(shù)的原理和優(yōu)勢(shì):
SWATH質(zhì)譜技術(shù)是一種數(shù)據(jù)無(wú)偏的質(zhì)譜方法,它基于高分辨質(zhì)譜儀和離子傳導(dǎo)斷裂(data-independent acquisition,DIA)的思想。SWATH通過(guò)將整個(gè)質(zhì)譜范圍分為多個(gè)窗口,依次進(jìn)行斷裂,并記錄所有的碎片離子譜,實(shí)現(xiàn)了全面的蛋白質(zhì)組分析。與DDA相比,SWATH具有以下優(yōu)勢(shì):首先,SWATH可以捕獲所有的碎片離子譜,從而提高了蛋白質(zhì)的鑒定和定量的可靠性。其次,由于SWATH采用了相同的窗口劃分策略,不同樣品之間的數(shù)據(jù)可以進(jìn)行直接比較和整合分析,提高了數(shù)據(jù)的可重復(fù)性和可比性。
3.SWATH質(zhì)譜技術(shù)的應(yīng)用:
SWATH質(zhì)譜技術(shù)在多個(gè)領(lǐng)域中都有廣泛的應(yīng)用。在生物醫(yī)學(xué)研究中,SWATH可用于生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)和驗(yàn)證、蛋白質(zhì)相互作用的研究以及疾病機(jī)制的解析。在藥物研發(fā)領(lǐng)域,SWATH可用于藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究、藥物靶點(diǎn)鑒定和藥物安全性評(píng)估。此外,SWATH還可以應(yīng)用于植物學(xué)、微生物學(xué)等領(lǐng)域的研究,為我們深入理解生命系統(tǒng)提供了新的視角。
SWATH質(zhì)譜技術(shù)的出現(xiàn)為我們提供了一種全面解析復(fù)雜蛋白質(zhì)組的突破性方法。與傳統(tǒng)質(zhì)譜技術(shù)相比,SWATH具有更高的鑒定和定量可靠性、更好的數(shù)據(jù)可重復(fù)性,以及更廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域。通過(guò)應(yīng)用SWATH技術(shù),我們可以更深入地了解蛋白質(zhì)組在生物體內(nèi)的表達(dá)和功能,為疾病研究、藥物研發(fā)和基礎(chǔ)生物學(xué)研究提供重要支持。
圖2