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內(nèi)毒素檢測(cè)失敗的原因分析及降低失敗率的操作方法

瀏覽次數(shù):1484 發(fā)布日期:2023-12-4  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

在日常的內(nèi)毒素檢測(cè)中,我們經(jīng)常會(huì)遇到結(jié)果異常或失敗, 常見為空白孔反應(yīng)、標(biāo)準(zhǔn)曲線失敗和CV%值超標(biāo)。

今天我們來聊聊,針對(duì)以上這些,在日常的內(nèi)毒素檢測(cè)中,該怎么應(yīng)對(duì)?
 

1. 空白孔和陰性對(duì)照的失敗

空白孔反應(yīng)是分析方法失敗常見原因之一

● 移液過程中,避免灰塵、毛發(fā)、皮膚細(xì)胞和其他顆粒物對(duì)反應(yīng)孔造成污染
● 樣品準(zhǔn)備時(shí),移液吸頭不應(yīng)經(jīng)過空白孔或陰性對(duì)照孔
● 制備標(biāo)準(zhǔn)品時(shí),確保充分混勻,保證最低濃度點(diǎn)和空白點(diǎn)有濃度差
● 切勿使用可能被污染的LAL試劑水制備空白孔
● 通過使用可靠廠商的試劑耗材,進(jìn)一步降低污染的可能性

 

2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線和陽性對(duì)照的失敗

這類實(shí)驗(yàn)的失敗通常是與實(shí)驗(yàn)人員和移液過程相關(guān)
 



● 標(biāo)準(zhǔn)品制備過程中正確使用已校準(zhǔn)的移液器和匹配的吸頭
● 實(shí)驗(yàn)人員需專注于標(biāo)準(zhǔn)品、樣品制備和96孔板制備過程(*非常重要)
● 添加鱟試劑時(shí)推薦使用多通道移液器降低方法變異性

 

3. “熱孔”或單孔污染

在空白、陰性對(duì)照或內(nèi)毒素含量較低的樣品孔中,常?赡馨l(fā)生熱孔或單孔污染。通常表現(xiàn)為復(fù)孔中一個(gè)較另一個(gè)相比,有明顯的高內(nèi)毒素信號(hào)。“熱孔”確切原因尚不清楚,如果確認(rèn)多次的重新測(cè)試是由于96孔板的原因,建議更換新批次的96孔板。
 

以上所提到的情況中,大多數(shù)與人工操作有關(guān),Lonza的PyroTecTM PRO 系統(tǒng)是一個(gè)靈活、強(qiáng)大和用戶友好的自動(dòng)化細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)系統(tǒng),能有效減少人工手動(dòng)過程中的移液和加樣錯(cuò)誤,大大降低實(shí)驗(yàn)人員操作時(shí)間、提高實(shí)驗(yàn)效率。
 

此外,PyroTecTM PRO系統(tǒng)樣品配置高度靈活、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備時(shí)間短(<10min/42樣品)、操作便利等特點(diǎn)。

來源:上,|馳儀器有限公司
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