SK-LU-1（人低分化肺腺癌細胞）傳代標準操作流程
細胞基本信息
--細 胞 基 本 信 息---
細胞名稱： SK-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)
細胞別稱： SK-Lu-1；SK LU 1；SK-Lu1；SK-LU1；SKLU-1；SKLU1；SKLU01
細胞貨號： SNL-229
生長特性： 貼壁
培養(yǎng)條件： DMEM+10% FBS+1% P/S
培養(yǎng)環(huán)境： 空氣，95%；二氧化碳 (CO2)，5%
細胞簡介： SK-LU-1細胞來源于一名64歲患有肺腺癌（III級）的白人女性。SK-LU-1細胞在免疫耐受大鼠中是致瘤的。SK-LU-1細胞支原體污染于1971年被發(fā)現(xiàn)并消除，可以用于3D細胞培養(yǎng)。
SK-LU-1細胞正常生長形態(tài)照片
SK-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)的特點
1、細胞顆粒感較重
細胞傳代培養(yǎng)時細胞內(nèi)黑點及細胞外顆粒較多，建議使用優(yōu)質(zhì)血清及培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞；
2、傳代、復(fù)蘇注意細胞狀態(tài)
細胞消化或者復(fù)蘇操作不當容易導(dǎo)致細胞死亡裂解產(chǎn)生大量碎片及顆粒，進而影響活細胞狀態(tài)，注意消化或復(fù)蘇過程盡量輕柔，嚴格控制消化時間和復(fù)蘇操作規(guī)范，傳代或復(fù)蘇24h后建議觀察細胞，建議換液一次去除死亡細胞；
細胞收貨攻略
常溫細胞
1. T25瓶收貨后，拆開外包裝，用75%酒精消毒T25瓶表面，放37℃培養(yǎng)箱靜置2-4h；
2. 吸走大部分培養(yǎng)基并留10-12 ml，顯微鏡下拍照保存細胞狀態(tài)照片，觀察細胞密度，若細胞密度大于80%即可按比例傳代（首次傳代比例建議1：2），若細胞密度低于70%可以留10-12 ml繼續(xù)培養(yǎng)至細胞密度80%以上再進行傳代培養(yǎng)；
凍存細胞
1. 細胞收貨后盡快開箱檢查，若干冰充足可以取出細胞迅速置于-80℃冰箱（2-3天內(nèi)復(fù)蘇）短期保存或液氮中長期保存，若干冰完全揮發(fā)建議立即復(fù)蘇細胞并聯(lián)系銷售人員解決；
2. 凍存細胞建議盡快復(fù)蘇一管培養(yǎng)檢查，以免超出售后期，復(fù)蘇步驟參考復(fù)蘇攻略；
3. 復(fù)蘇一管細胞出現(xiàn)異常及時聯(lián)系銷售人員，在專業(yè)技術(shù)支持的指導(dǎo)下進行下一步操作；
Tips：
1. 細胞收貨出現(xiàn)漏液、培養(yǎng)瓶破損、干冰完全揮發(fā)等異常情況時，及時拍照聯(lián)系銷售人員；
2. 該細胞貼壁生長，一般T25瓶運輸過程中較少出現(xiàn)大量細胞脫落并聚團的情況，少量細胞脫落是正常狀態(tài)，不影響細胞生長，按正常操作步驟繼續(xù)培養(yǎng)即可。
3. 尚恩生物T25瓶發(fā)貨的細胞內(nèi)含對應(yīng)細胞的完全培養(yǎng)基，可以收集原裝培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基經(jīng)1500rpm離心5min后，取上清于4℃保存用于后續(xù)細胞培養(yǎng)；
細胞傳代攻略
1. 先盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基，再加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s，吸走潤洗的PBS；
2. T25瓶加1ml左右胰酶，輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層，將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化；
3. 消化到細胞間隙變大，但未完全脫落時加2-3ml完全培養(yǎng)基終止胰酶消化；
4. 混勻細胞，900rpm離心3-5min，棄上清；
5.加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里，補足完全培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；
Tips：
1. 對于消化細胞程度，客戶如果經(jīng)驗不多，無法準確掌控胰酶作用時間，建議客戶按照下述操作：胰酶首先復(fù)溫到室溫后加入細胞，放入37度培養(yǎng)箱，然后每隔30秒，即吹打下細胞（此時吹打細胞應(yīng)盡量輕柔，不能強行將細胞吹下，否則細胞可能出現(xiàn)機械損傷），如果能夠吹打散細胞，說明細胞消化完成可以終止消化，如果30秒吹打不下，再等30秒重復(fù)操作直至能夠輕柔的吹下細胞；
2. T25瓶加10-12ml完全培養(yǎng)基，10cm皿加12-15ml，2-3天換液一次。
3. 細胞收貨后首次傳代建議按1：2傳代，后續(xù)培養(yǎng)可以視具體細胞生長狀態(tài)和密度情況決定傳代比例；
4. 傳代后24h建議觀察細胞并換液一次去除死亡細胞；
文獻引用
CAT#: SNL-492
Product name： SK-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)
Date: 2022/12/23
Journal: Nature Communications
Impact Factor: 17.694
Title:
USP5-Beclin 1 axis overrides p53-dependent senescence and drives Kras-induced tumorigenicity
Weblink:
https://doi.org/10.1038/s41467-022-35557-y
DOI:
https://doi.org/10.1038/s41467-022-35557-y
PMID: PMID: 36528652
相關(guān)產(chǎn)品
【SNL-492】SK-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)
https://www.sunncell.com.cn/product/SNL-492
【SNLM-492】SK-LU-1細胞專用培養(yǎng)基
https://www.sunncell.com.cn/product/SNLM-492
【SNT-001】0.25%胰酶（不含EDTA）
https://www.sunncell.com.cn/product/SNT-001
--細 胞 基 本 信 息---
細胞名稱： SK-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)
細胞別稱： SK-Lu-1；SK LU 1；SK-Lu1；SK-LU1；SKLU-1；SKLU1；SKLU01
細胞貨號： SNL-229
生長特性： 貼壁
培養(yǎng)條件： DMEM+10% FBS+1% P/S
培養(yǎng)環(huán)境： 空氣，95%；二氧化碳 (CO2)，5%
細胞簡介： SK-LU-1細胞來源于一名64歲患有肺腺癌（III級）的白人女性。SK-LU-1細胞在免疫耐受大鼠中是致瘤的。SK-LU-1細胞支原體污染于1971年被發(fā)現(xiàn)并消除，可以用于3D細胞培養(yǎng)。
SK-LU-1細胞正常生長形態(tài)照片
SK-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)的特點
1、細胞顆粒感較重
細胞傳代培養(yǎng)時細胞內(nèi)黑點及細胞外顆粒較多，建議使用優(yōu)質(zhì)血清及培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞；
2、傳代、復(fù)蘇注意細胞狀態(tài)
細胞消化或者復(fù)蘇操作不當容易導(dǎo)致細胞死亡裂解產(chǎn)生大量碎片及顆粒，進而影響活細胞狀態(tài)，注意消化或復(fù)蘇過程盡量輕柔，嚴格控制消化時間和復(fù)蘇操作規(guī)范，傳代或復(fù)蘇24h后建議觀察細胞，建議換液一次去除死亡細胞；
細胞收貨攻略
常溫細胞
1. T25瓶收貨后，拆開外包裝，用75%酒精消毒T25瓶表面，放37℃培養(yǎng)箱靜置2-4h；
2. 吸走大部分培養(yǎng)基并留10-12 ml，顯微鏡下拍照保存細胞狀態(tài)照片，觀察細胞密度，若細胞密度大于80%即可按比例傳代（首次傳代比例建議1：2），若細胞密度低于70%可以留10-12 ml繼續(xù)培養(yǎng)至細胞密度80%以上再進行傳代培養(yǎng)；
凍存細胞
1. 細胞收貨后盡快開箱檢查，若干冰充足可以取出細胞迅速置于-80℃冰箱（2-3天內(nèi)復(fù)蘇）短期保存或液氮中長期保存，若干冰完全揮發(fā)建議立即復(fù)蘇細胞并聯(lián)系銷售人員解決；
2. 凍存細胞建議盡快復(fù)蘇一管培養(yǎng)檢查，以免超出售后期，復(fù)蘇步驟參考復(fù)蘇攻略；
3. 復(fù)蘇一管細胞出現(xiàn)異常及時聯(lián)系銷售人員，在專業(yè)技術(shù)支持的指導(dǎo)下進行下一步操作；
Tips：
1. 細胞收貨出現(xiàn)漏液、培養(yǎng)瓶破損、干冰完全揮發(fā)等異常情況時，及時拍照聯(lián)系銷售人員；
2. 該細胞貼壁生長，一般T25瓶運輸過程中較少出現(xiàn)大量細胞脫落并聚團的情況，少量細胞脫落是正常狀態(tài)，不影響細胞生長，按正常操作步驟繼續(xù)培養(yǎng)即可。
3. 尚恩生物T25瓶發(fā)貨的細胞內(nèi)含對應(yīng)細胞的完全培養(yǎng)基，可以收集原裝培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基經(jīng)1500rpm離心5min后，取上清于4℃保存用于后續(xù)細胞培養(yǎng)；
細胞傳代攻略
1. 先盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基，再加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s，吸走潤洗的PBS；
2. T25瓶加1ml左右胰酶，輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層，將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化；
3. 消化到細胞間隙變大，但未完全脫落時加2-3ml完全培養(yǎng)基終止胰酶消化；
4. 混勻細胞，900rpm離心3-5min，棄上清；
5.加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里，補足完全培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；
Tips：
1. 對于消化細胞程度，客戶如果經(jīng)驗不多，無法準確掌控胰酶作用時間，建議客戶按照下述操作：胰酶首先復(fù)溫到室溫后加入細胞，放入37度培養(yǎng)箱，然后每隔30秒，即吹打下細胞（此時吹打細胞應(yīng)盡量輕柔，不能強行將細胞吹下，否則細胞可能出現(xiàn)機械損傷），如果能夠吹打散細胞，說明細胞消化完成可以終止消化，如果30秒吹打不下，再等30秒重復(fù)操作直至能夠輕柔的吹下細胞；
2. T25瓶加10-12ml完全培養(yǎng)基，10cm皿加12-15ml，2-3天換液一次。
3. 細胞收貨后首次傳代建議按1：2傳代，后續(xù)培養(yǎng)可以視具體細胞生長狀態(tài)和密度情況決定傳代比例；
4. 傳代后24h建議觀察細胞并換液一次去除死亡細胞；
文獻引用
CAT#: SNL-492
Product name： SK-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)
Date: 2022/12/23
Journal: Nature Communications
Impact Factor: 17.694
Title:
USP5-Beclin 1 axis overrides p53-dependent senescence and drives Kras-induced tumorigenicity
Weblink:
https://doi.org/10.1038/s41467-022-35557-y
DOI:
https://doi.org/10.1038/s41467-022-35557-y
PMID: PMID: 36528652
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標簽：
細胞
細胞培養(yǎng)
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