微量移液器的正確使用方法及步驟
瀏覽次數(shù):6724 發(fā)布日期:2023-1-4
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移液器俗稱移液槍,是一種用于液體處理的實驗室儀器的,廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、化學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品、石油化工等領(lǐng)域,由于它所處理的液體可以精確到UL,所以也常被稱為微量移液器,那么如何正確使用微量移液器?下面小編歸納一下移液器的正確使用方法和移液器校準保養(yǎng)方法,記得收藏備用。
一、如何正確使用微量移液器
一個完整的移液循環(huán),包括吸頭安裝——容量設(shè)定——吸液放液——卸去吸頭等步驟。每一個步驟都有需要遵循的操作規(guī)范。
1、吸頭安裝
對于單道移液器,移液器末端垂直插入吸頭,輕壓左右微微轉(zhuǎn)動即可上緊;
對于多道移液器,移液器的第一道對準第一個吸頭,傾斜插入,前后稍許搖動上緊即可。
不可反復(fù)撞擊移液器來確保吸頭氣密性,長期以這種方式裝配吸頭,會導(dǎo)致移液器的零部件因強烈撞擊而松散,甚至?xí)䦟?dǎo)致調(diào)節(jié)刻度的旋鈕卡住。
2、移液器量程的選擇和容量設(shè)定
量程設(shè)定原則:從大體積調(diào)節(jié)至小體積時,逆時針旋轉(zhuǎn)至刻度即可;從小體積調(diào)節(jié)至大體積時,可先順時針調(diào)過設(shè)定體積,再回調(diào)至設(shè)定體積,可保證最佳的精確度。不可將調(diào)節(jié)旋鈕旋出量程范圍外,否則會損壞移液器內(nèi)機械裝置。
① 移液范圍選擇在滿量程的 35% 到 100% 時,可以保證較好的準確性和重復(fù)性。選擇合適的量程可以提高 1% 移液精度!盡量避免將移液器量程設(shè)置為MAX值的 10% 以下。
② 設(shè)定齒輪控制的移液器量程時,始終保持「下調(diào)」到所需量程,當由小量程調(diào)節(jié)到大量程時,旋轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)旋鈕到達超過所需量程 1/3 圈處,然后回調(diào)到所需量程準確位置,這樣能夠減少機械回沖或者齒輪滑動帶來的影響。
3、吸液和放液
吸液移液器按鈕按至第一檔,釋放按鈕,進行吸液。切記不能過快,否則液體進入吸頭過快會導(dǎo)致液體倒吸入移液器內(nèi)部。
放液:緊貼容器壁,先按到第一檔,略作停頓,再按至第二檔排除余液。移液器吸液操作需要注意以下幾點:
A.浸入的深度和角度
將吸頭浸入合適的深度可以提高 5% 的準確性。吸頭浸入太深會導(dǎo)致吸液偏多,相反,浸入太淺,會吸入空氣。
各種型號規(guī)格的移液器推薦的吸頭浸入深度如下所示:
規(guī)格 |
浸入深度 |
2~10 μL |
1~2 mm |
20~200 μL |
2~3 mm |
200~2,000 μL |
3~6 mm |
2,000 μL 以上 |
6~10 mm |
② 手持移液器的角度也會影響準確性。保證吸液或排液時偏離垂直不超過 20°,可以提高 2.5% 的準確性。
B.潤洗:
潤洗是一種快速,簡單的提升移液準確性高達 0.2% 的方法。 為什么呢?因為液體可能會在吸頭內(nèi)壁上殘留形成液體薄膜,這樣所得的錯誤值將小于理論值。想要獲得更好的移液精度,可以在安裝新吸頭后, 用相同樣品對吸頭進行 2~3 次潤洗,這樣薄膜會保持相當?shù)暮愣,從而提高移液的準確性和重復(fù)性。
C.吸液
保證吸液的一致性可以提高 5% 的準確性。移取不同樣品時,使用一致的移液節(jié)奏,按壓或釋放按鈕的速度平穩(wěn)一致,到達第一停止點的用力應(yīng)保持一致。快速或不平穩(wěn)的吸液會使液體噴濺、產(chǎn)生氣霧、套柄污染以及樣品量損失。
D.分液
良好的分液技巧也能提高 1% 的準確性。分液時用吸頭接觸容器壁時可以獲得更好的一致性。將吸頭的孔口端沿著容器壁向上滑動可以去除孔口端殘留的液體。另外兩種技巧同樣非常適用于水溶(非粘性)液。
總體來說,移液器吸液時需要掌握以下要領(lǐng):
● 垂直吸液。
● 5mL和10mL的移液器,吸頭需浸入液面5mm,慢吸液體,達到預(yù)定體積后,在液面下停頓3秒,再離開液面。
● 吸液時緩慢松開控制器,否則液體進入吸頭過快會導(dǎo)致液體倒吸入移液器內(nèi)部
● 吸取揮發(fā)液體時,需潤洗吸頭4-6次,讓套筒室內(nèi)的蒸汽飽和,可以避免產(chǎn)生漏液。
4、移液器的正確放置
使用完畢,可以將其豎直掛在移液槍架上,但要小心別掉下來。當移液器槍頭里有液體時,切勿將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。
如不使用,要把移液槍的量程調(diào)至最大值的刻度,使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護彈簧。
5、常見的錯誤操作
(1)裝配吸頭時,反復(fù)撞擊吸頭,導(dǎo)致吸頭難以脫卸,甚至損壞移液器。
(2)吸液時,移液器傾斜,導(dǎo)致移液不準確,同時液體容易進入移液器套柄。
(3)吸液時拇指迅速放開,這樣會迫使液體形成湍流狀態(tài),液體會直接沖到移液器內(nèi)部。
(4)直接按到第二檔吸液(應(yīng)該按照上述標準方法操作)。
(5)用大量程的移液器移取小體積樣品(應(yīng)該選擇合適量程范圍的移液器)。
(6)平放帶有殘余液體吸頭的移液器(應(yīng)將移液器掛在移液器架上)。
二、微量移液器使用注意事項
(1)吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。
(2)為獲得較高的精度,吸頭需預(yù)先吸取一次樣品溶液,然后再正式移液,因為吸取血清蛋白質(zhì)溶液或有機溶劑時,吸頭內(nèi)壁會殘留一層“液膜”,造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。
(3)濃度和粘度大的液體,會產(chǎn)生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進行設(shè)定。
(4)可用分析天平稱量所取純水的重量并進行計算的方法,來校正取液器,1mL蒸餾水20℃時重0.9982g。
(5)移液器反復(fù)撞擊吸頭來上緊的方法是非常不可取的,長期操作會使內(nèi)部零件松散而損壞移液器。
(6)移液器未裝吸頭時,切莫移液。
(7)在設(shè)置量程時,請注意旋轉(zhuǎn)到所需量程,數(shù)字清清楚楚在顯示窗中。所設(shè)量程在移液器量程范圍內(nèi)不要將按鈕旋出量程,否則會卡住機械裝置,損壞了移液器。
(8)移液器嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體(如,濃酸、濃堿、有機物等)。
(9)嚴禁使用移液器吹打混勻液體。
(10)不要用大量程的移液器移取小體積的液體,以免影響準確度。同時,如果需要移取量程范圍以外較大量的液體,請使用移液管進行操作。
三、微量移液器快速校準的方法
1.校驗機構(gòu)校準:
使用設(shè)備及物品:
電子天平(測量范圍200g;分度值0.1mg);燒杯(50mL)1個;燒杯(100mL)1個;定性濾紙若干小塊;超純水80mL。
步驟:
(1)打開電子天平,空載調(diào)零;
(2)放入小燒杯待天平顯示穩(wěn)定后,按下歸零鍵歸零。給移液器上安裝相應(yīng)的吸液嘴,對移液器的槍頭進行預(yù)洗;
(3)將移液器的容量調(diào)至被檢點。被檢點一般選擇最小,中間和最大容量值?梢允悄骋恢付ǖ娜萘奎c;
(4)使用移液器移取被檢容量的超純水至天平的小燒杯內(nèi);
(5)待天平顯示穩(wěn)定后,馬上讀取并記錄此時電子天平顯示出的數(shù)值。記錄完畢將電子天平復(fù)零;
(6)重復(fù)5次執(zhí)行3-5條。記錄完畢,將移液器的容量調(diào)至下一被檢點繼續(xù)。被檢點遵循從小到大的原則進行調(diào)整。
2.使用移液器驗證儀SmartCheck進行自行校準
SmartCheck移液器驗證儀是一種自動化移液器數(shù)據(jù)校準的簡單儀器,方便快捷,6秒鐘即可出數(shù)據(jù),適用于個品牌移液器。
四、微量移液器的修正方法
(1)將移液器調(diào)整至最小量程,按照校準方法得到當前的實際容量值,根據(jù)與標示容量值的差值,通過移液器上的調(diào)準旋鈕進行調(diào)整;
(2)當調(diào)整后測得的實際容量值與標示容量值符合要求時,將移液器容量調(diào)整至中間量程繼續(xù)測量。中間量程符合要求時,再調(diào)整至最大量程繼續(xù)測量;
(3)如果中間量程或者最大量程有一個不符合要求時,則需重新調(diào)整至最小量程繼續(xù)修正,直到3個量程的值都符合要求為止;
(4)修正完畢的移液器,需重新進行校準;
(5)最小量程低于10μL的,不進行修正。如果最大量程和中間量程符合校準要求的,繼續(xù)使用,否則返廠維修。
五、微量移液器的日常維護保養(yǎng)
(1)如長時間不使用,要把移液槍的量程調(diào)至最大值的刻度,使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護彈簧;
(2)定期清潔移液器外壁,可以用95%酒精或60%的異丙醇,再用蒸餾水擦拭,自然晾干;
(3)使用時要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法是吸取液體后懸空垂直放置幾秒中,看看液面是否下降。如果漏液,則檢查吸液嘴是否匹配和彈簧活塞是否正常;
(4)當移液器吸嘴內(nèi)有液體時,嚴禁將移液器水平或倒置放置,以防液體流入活塞室腐蝕移液器活塞;
(5)使用正確的方法安裝吸頭,切記用力不能過猛,更不能采取剁吸頭的方法來進行安裝。
蘇州阿爾法生物提供的瑞寧單道移液器、多道移液器、電動移液器等實驗室微量移液器和移液槍吸頭等管飯應(yīng)用于實驗室中。梅特勒系列的移液器驗證儀SmartCheck™,可驗證量程在10-1000μL之間的任何品牌的移液器的性能。60秒快速提供驗證的結(jié)果。另外,2022年蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司成為梅特勒托利多-瑞寧特邀售后維修服務(wù)點。當前售后業(yè)務(wù)主要包括Rainin移液器維修,移液槍維護保養(yǎng),移液器校準,移液槍CANS報告辦理等。