移液器的校準(zhǔn),意味著確定分配體積和選定體積之間的差異。
移液器校準(zhǔn)是指通過校對調(diào)整移液器,使分配的體積在一定的規(guī)格范圍內(nèi)。工廠校準(zhǔn)期間,可以通過不同的稱量在量程的MAX體積和MIN或MAX體積的 10%(以較高者為準(zhǔn))檢查性能。當(dāng)您購買移液器時(shí),您應(yīng)該選擇一款能夠針對不同溫度和各種粘性液體進(jìn)行重新校準(zhǔn)和調(diào)整的移液器。
在質(zhì)量體系中校準(zhǔn)移液器
質(zhì)量系統(tǒng)中移液器校準(zhǔn)的主要目標(biāo)是確保以預(yù)期的精度進(jìn)行測量。誤差限制通常來自制造商的規(guī)格,而執(zhí)行工作所需的精度要低得多。移液器的校準(zhǔn)實(shí)質(zhì)是根據(jù)公認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)(DIN 12650 或 ISO 8655)設(shè)置限制。根據(jù)
質(zhì)量體系中校準(zhǔn)移液器的程序如下:
一、設(shè)備要求和測試條件
1.平衡度測定:
天平的刻度值應(yīng)根據(jù)所選的移液器體積來選擇。
注意:使用已知砝碼定期檢查您的天平校準(zhǔn)情況。
2.測試液體要求:
蒸餾水或去離子水,“3 級”,符合 ISO 3696。測試水在校準(zhǔn)前至少在校準(zhǔn)室中放置 2 小時(shí),以達(dá)到與測試室條件的平衡。
測試室條件要求:
3.測試在 20C 至 25C 的恒定 (+/- 0.5C) 溫度下在無氣流的房間中進(jìn)行。建議相對濕度在 45% 以上。尤其是體積在 50 vl 以下的情況下,空氣濕度應(yīng)盡可能高,以減少蒸發(fā)損失的影響。
- 測試室內(nèi)的移液器、水和空氣應(yīng)處于相同溫度。
- 新吸頭應(yīng)預(yù)先潤濕 1 至 3 次以提高準(zhǔn)確性。
- 始終從水箱中吸取水,不要從天平中取回水。
- 根據(jù)使用頻率和應(yīng)用情況定期檢查校準(zhǔn),但至少每年一次。如果每天使用,建議間隔三個(gè)月。
二、一般移液器校準(zhǔn)程序
1.收到需要校準(zhǔn)的移液器后,每個(gè)移液器都小心地打開包裝并檢查是否有任何可見的損壞跡象。發(fā)現(xiàn)的任何可見損壞都會(huì)立即報(bào)告給客戶。客戶將被告知損壞是否可以修復(fù)以及將收取哪些額外費(fèi)用。客戶將發(fā)出新的工作訂單以支付維修費(fèi)用。
2.對每個(gè)移液器進(jìn)行輻射污染掃描。發(fā)現(xiàn)的任何輻射污染都會(huì)立即報(bào)告給客戶,并且移液器將被拒絕校準(zhǔn)。
3.所有客戶的移液器都經(jīng)過計(jì)數(shù),并與提供的工作訂單上報(bào)告的數(shù)量進(jìn)行比較。任何數(shù)量差異都會(huì)立即報(bào)告給客戶?蛻魧⒂袡C(jī)會(huì)找到任何缺失的數(shù)量,否則工作訂單將需要修改并由客戶簽署。
4.每個(gè)工作訂單將被放置在一個(gè)單獨(dú)的內(nèi)部存儲箱中,直到計(jì)劃進(jìn)行校準(zhǔn)。
為每個(gè)工作訂單分配單獨(dú)的工作 ID 號。
6.檢查客戶信息與存檔信息的任何差異,并在需要時(shí)進(jìn)行更正。所有移液器都在分配的作業(yè) ID 號下輸入 Cal Lab 數(shù)據(jù)庫,并為每個(gè)儀器分配 ID 號。
三、預(yù)校準(zhǔn)程序
- · 在校準(zhǔn)和任何移液器調(diào)整之前獲得和記錄的數(shù)據(jù)也將被記錄下來。
- · 每個(gè)移液器都將在制造商指定的MIN和MAX量程點(diǎn)進(jìn)行測試。每個(gè)點(diǎn)進(jìn)行十次測試。
- · 作為預(yù)防性維護(hù)的一部分,每個(gè)移液器都根據(jù)制造商的圖表進(jìn)行拆卸,并用適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)溶液徹底清潔。
- · 所有零件都經(jīng)過仔細(xì)檢查,活塞在大多數(shù)情況下都經(jīng)過拋光,活塞密封和 O 形圈以及所有有缺陷和故障的零件都已更換。完成后,將根據(jù)制造商的圖表和程序重新組裝每個(gè)移液器。再次目視檢查移液器的功能是否正常。
四、移液器校準(zhǔn)步驟
1.在
移液器校準(zhǔn)開始時(shí),每個(gè)移液器在進(jìn)行任何調(diào)整之前都會(huì)預(yù)先檢查 3 次。如果移液器失敗,將執(zhí)行適當(dāng)?shù)男?zhǔn)調(diào)整。校正后,每臺儀器將在最低和最高量程點(diǎn)進(jìn)行校準(zhǔn),每個(gè)測試點(diǎn)進(jìn)行10 次測試。
2.校準(zhǔn)數(shù)據(jù)將被記錄并報(bào)告在校準(zhǔn)報(bào)告中。
3.為每個(gè)移液器發(fā)布校準(zhǔn)報(bào)告以及整個(gè)工作的校準(zhǔn)摘要。適當(dāng)?shù)募夹g(shù)人員簽署報(bào)告。
創(chuàng)建校準(zhǔn)標(biāo)簽并貼在每個(gè)移液器上。所有移液器都經(jīng)過交叉核對客戶提供的文書工作以及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)創(chuàng)建的文檔。
4.QC 主管檢查隨機(jī)選擇的移液器的整體性能。
5.如果檢測到任何錯(cuò)誤,則將整個(gè) Job 送回以進(jìn)行重新檢查。
6.QC 主管批準(zhǔn)工作,移液器經(jīng)過仔細(xì)包裝并隨附所有校準(zhǔn)文檔交付給客戶。
移液器誤差的來源:
l 揮發(fā)性液體蒸發(fā)。在飽和空氣中使用。
l 高密度液體下沉。改變技術(shù)。
l 粘性液體會(huì)粘在尖端。改變技術(shù)。
l 親水吸頭將保留液體。預(yù)濕筆尖。
l 浸入式吸頭攜帶液體。浸入 2-3 毫米。
l 有角度的移液器會(huì)吸收更多的液體。保持垂直。
l 表面張力會(huì)降低精度。改變技術(shù)。
l 冷熱液體。在室溫下吸取液體。
l 人的因素。練習(xí)和觀察技術(shù)。
五、移液器校準(zhǔn)計(jì)算公式:
質(zhì)量到體積的轉(zhuǎn)換
V = (w + e) x Z
V = 體積 (vl)
w = 重量(毫克)
e = 蒸發(fā)損失 (mg)
Z = mg/vl 轉(zhuǎn)換的轉(zhuǎn)換系數(shù)
注意:蒸發(fā)損失可能在體積小時(shí)明顯。要確定質(zhì)量損失,請將水分配到稱量容器中,記下讀數(shù)并開始用秒表計(jì)時(shí)。檢查讀數(shù)在 5 秒內(nèi)下降了多少。將此與移液時(shí)間進(jìn)行比較。通常,移液時(shí)間可能為 5 秒,質(zhì)量損失高達(dá) 2 mg。如果在容器上使用蒸發(fā)阱或蓋子,則無需進(jìn)行蒸發(fā)校正。
換算系數(shù) Z 用于計(jì)算在測試溫度和壓力下懸浮在空氣中的水的密度。
準(zhǔn)確度(系統(tǒng)誤差)
準(zhǔn)確度是移液器的分配體積和選定體積之間的差異。
精度在移液器校準(zhǔn)證書上以相對值表示:
精密度(隨機(jī)誤差)
精密度是指移液的可重復(fù)性。它表示為標(biāo)準(zhǔn)偏差 (s) 或變異系數(shù) (cv)。除了移液器的特性外,實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐和用戶體驗(yàn)是影響精度的主要因素。
根據(jù) DIN 12650 的誤差(F 值)
DIN 標(biāo)準(zhǔn)沒有給出準(zhǔn)確度和精密度的單獨(dú)限制,而是使用組合誤差限制:F 值。
F = | 一個(gè) | + 2 xs
計(jì)算相對 F 值:
F% = | % | + 2 x 數(shù)量
表 2 顯示了根據(jù) DIN 12650 標(biāo)準(zhǔn)對單通道空氣置換移液器的誤差限制。對于多道移液器,這些限制加倍。對于可變?nèi)萘恳埔浩,?biāo)稱容量是最大容量。標(biāo)稱體積的絕對 vl 限制適用于整個(gè)體積范圍內(nèi)的每個(gè)選定體積。
例如,對于 20-200UL的移液槍,每個(gè)選定體積的誤差限制為2.0ul。如果移液器的標(biāo)稱體積介于表中的數(shù)值之間,則使用最接近體積的相對誤差限值 F%。如果標(biāo)稱體積正好在表 2 中的兩個(gè)體積之間,則使用較低體積的相對誤差限值 F%。
移液器精密度和準(zhǔn)確度的評估
無差錯(cuò)移液需要精密度和準(zhǔn)確度。許多因素會(huì)影響這些規(guī)格,它們是評估移液器性能的主要定量參數(shù)。
例如當(dāng)設(shè)置體積為 20 vl 時(shí):準(zhǔn)確但不精確:平均體積是正確(設(shè)定)體積,但單獨(dú)移液與設(shè)定體積不同。
精確,但不準(zhǔn)確:單獨(dú)移液之間沒有變化,但平均體積與設(shè)定體積不同。
準(zhǔn)確和精確:平均體積是設(shè)定的體積,不同移液之間沒有差異。
1. 移液器垂直,吸頭浸入液體約 1 cm。
2. 移液器垂直,吸頭浸入液體約 3 cm。
3. 30×40度角移液器;尖端浸入液體中約 3-4 厘米。
梅特勒-瑞寧作為專業(yè)的移液器生產(chǎn)供應(yīng)商,為生物科學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供移液解決方案,除了移液器供應(yīng)和專業(yè)的移液器 校準(zhǔn) 、售后服務(wù),產(chǎn)品也在不斷升級推新,多年來與蘇州阿爾法生物合作密切,所開發(fā)的 LTS輕觸式去吸頭移液器符合人體力學(xué)工程設(shè)計(jì),在保證移液器精確度的同時(shí),也減輕了重復(fù)操作移液器所帶來的疲勞,有效提升液體處理效率。如