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紫外可見(jiàn)光譜理論及分光光度計(jì)的常見(jiàn)應(yīng)用問(wèn)題

瀏覽次數(shù):568 發(fā)布日期:2022-11-15  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
紫外-可見(jiàn)光譜或紫外可見(jiàn)分光光度法(UV-Vis或UV/Vis)是指紫外-可見(jiàn)光譜區(qū)域的吸收光譜或反射光譜。紫外-可見(jiàn) (UV-VIS) 光譜法是一種分析方法,可以根據(jù)分析物接收到的光量來(lái)測(cè)量分析物的量。

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)
紫外/可見(jiàn)區(qū)域 (UV-VIS) 測(cè)量的波長(zhǎng)范圍從大約 200 nm 到 800 nm。紫外線或可見(jiàn)光輻射分子的吸收導(dǎo)致分子的電能水平之間的轉(zhuǎn)變。不同材料的光學(xué)和電子特性,例如薄膜、粉末、整體固體和液體,都適用于表征。

紫外可見(jiàn)光譜是一種經(jīng)濟(jì)、高效、簡(jiǎn)單、通用、無(wú)損的分析技術(shù),適用于大范圍的有機(jī)化合物和一些無(wú)機(jī)物種。作為波長(zhǎng)的函數(shù),紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)量通過(guò)介質(zhì)的光的吸收或透射。
為了對(duì)液流中物質(zhì)的濃度進(jìn)行分類(lèi)和測(cè)量,高效液相色譜和超高效液相色譜中都結(jié)合了紫外可見(jiàn)檢測(cè)器。

紫外可見(jiàn)光譜理論
進(jìn)行紫外可見(jiàn)光分析時(shí),當(dāng)入射輻射和發(fā)色團(tuán)中的電子云之間的相互作用會(huì)導(dǎo)致電子躍遷涉及促進(jìn)一個(gè)或多個(gè)外殼或鍵合電子從基態(tài)進(jìn)入更高能態(tài)時(shí),紫外-可見(jiàn) (UV-Vis) ) 光譜是推導(dǎo)出來(lái)的。通常,物質(zhì)的紫外和可見(jiàn)光譜帶較大。并且可能不會(huì)表現(xiàn)出高度的復(fù)合識(shí)別精度。盡管如此,它們對(duì)于定量分析來(lái)說(shuō)是足夠的,并且可用作檢測(cè)多種物質(zhì)的替代手段。

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的應(yīng)用
在理化實(shí)驗(yàn)室中,紫外可見(jiàn)光譜比較常用。比如:在 QA、QC、檢驗(yàn)所、分析研究院等實(shí)驗(yàn)室中對(duì)分析物進(jìn)行定量分析的常用技術(shù)是紫外可見(jiàn)分光光度法。紫外可見(jiàn)分光光度法的基本原理基于比爾定律。

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)常見(jiàn)問(wèn)題
1.為什么紫外光譜用于藥物分析?

由于紫外分光光度計(jì)測(cè)量紫外光的可見(jiàn)區(qū)域,可以提供有價(jià)值的信息,并檢測(cè)藥物化合物中活性成分水平的任何雜質(zhì)。
2.分光光度法的應(yīng)用有哪些?
分光光度法在天文學(xué)、分子生物學(xué)、化學(xué)和生物化學(xué)、物理學(xué)等多種不同的領(lǐng)域均有應(yīng)用。在分子生物學(xué)中分光光度計(jì)的主要應(yīng)用包括測(cè)量蛋白質(zhì)、DNA 或 RNA、細(xì)菌細(xì)胞形成和酶反應(yīng)等物質(zhì)的濃度。
3.紫外光譜的范圍是多少?
UV-Vis 是一種通用程序,因?yàn)樵?UV-可見(jiàn)波長(zhǎng)光譜中,大多數(shù)分子吸收光。紫外頻率在 100 到 400 nm 之間,可見(jiàn)光譜在 400 到 700 nm 之間。
4.紫外光譜中使用哪種燈?
使用光譜儀將波長(zhǎng)范圍在 190 nm 和 800 nm 之間的光通過(guò)比色皿輻射,并記錄吸收光譜?梢允褂貌煌膶拵 UV-Vis 光源,所以,在光譜儀中通常使用僅發(fā)射單線光譜的汞燈。
5.什么是IR原理?
紅外光譜的原理利用分子似乎吸收獨(dú)特的光頻率的想法,這是分子相應(yīng)結(jié)構(gòu)的典型特征。能量取決于分子表面的形式、與之相關(guān)的振動(dòng)耦合以及對(duì)應(yīng)于原子的質(zhì)量。
6.什么是紫外可見(jiàn)光譜,它是如何工作的?
UV-Vis 是一種快速、方便且廉價(jià)的測(cè)定分析物溶液濃度的方法。在 UV-Vis 中,光束穿過(guò)比色皿中的溶液,波長(zhǎng)范圍在 180 到 1100 nm 之間。樣品在比色皿中吸收這種紫外線或可見(jiàn)光輻射。
常見(jiàn)的比較好用的紫外分光光度計(jì)有哪些?

常見(jiàn)的紫外分光光度計(jì)進(jìn)口的主要是nanodrop one分光光度計(jì),它只需 1-2µL 樣品即可獲得準(zhǔn)確的 DNA、RNA 和蛋白質(zhì)定量分析結(jié)果。
國(guó)產(chǎn)的紫外分光光度計(jì),比如nano-200,nano-300,nano-300等。

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