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實(shí)驗(yàn)室常見離心方法的示意圖與步驟介紹

瀏覽次數(shù):9405 發(fā)布日期:2022-11-7  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

細(xì)胞離心是常見細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中不可缺少的一步,它不僅可以使掛壁的樣品完全沉降到管底,也可以幫助確認(rèn)細(xì)胞濃度,用于后續(xù)的如原代細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞傳代培養(yǎng)、單細(xì)胞測序等相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

對于不同的細(xì)胞/細(xì)胞器分離,其離心分離法各不相同,適合的場合也不盡相同。那么常見的細(xì)胞離心分離方法都有哪些呢?

01差速離心法
差速離心法是利用在離心力場中不同的粒子沉降系數(shù)的差別,通過逐漸提高離心力,使非均勻混合液內(nèi)的不同大小、形狀的粒子分步沉淀的離心方法。主要用于實(shí)驗(yàn)室樣品分離,例如分離細(xì)胞器線粒體、葉綠體、蛋白質(zhì)和病毒等。

分離步驟 第一步:設(shè)置較低的離心速度(相對離心力),先讓較大的顆粒沉降到管底,而混合液中小的顆粒仍然懸浮在上清液中。

第二步:收集沉淀,設(shè)置較高的離心速度(相對離心力)離心懸浮液,將較小的顆粒沉降,后續(xù)依此類推,最終可分離不同大小顆粒的。
 


圖一.差速離心示意圖

 

02密度梯度離心法
密度梯度離心法又稱為區(qū)帶離心法,可分為速率區(qū)帶離心法等密度離心法。

 1.速率區(qū)帶離心法
主要用于分離密度相近而大小不等的細(xì)胞或細(xì)胞器。離心管內(nèi)先裝入蔗糖、甘油、CsCl、Percoll等密度梯度介質(zhì),樣品粒子的密度必須大于梯度液柱中任一點(diǎn)的密度,被分離的粒子在梯度液中沉降速度不同,離心時(shí),混合樣品中不同的組分將在梯度液柱的不同位置分別形成各自的區(qū)帶,達(dá)到彼此分離的目的。
 

圖二.速率區(qū)帶離心示意圖


2.等密度離心法
適用于分離密度不等的顆粒。細(xì)胞或細(xì)胞器在連續(xù)梯度的介質(zhì)中經(jīng)足夠大離心力和足夠長時(shí)間則沉降或漂浮到與自身密度相等的介質(zhì)處,并停留在那里達(dá)到平衡,從而將不同密度的細(xì)胞或細(xì)胞器分離。常用介質(zhì)有Percoll,而CsCl、Cs2SO4和三碘甲酰葡萄糖胺經(jīng)長時(shí)間離心后也可產(chǎn)生穩(wěn)定的梯度。
 


圖三.密度梯度離心示意圖


瑞沃德M1416R高速臺式冷凍離心機(jī)
瑞沃德M1416R高速臺式冷凍離心機(jī),不僅可以應(yīng)用在細(xì)胞的密度梯度離心,還可應(yīng)用在細(xì)胞沉淀,細(xì)胞的懸浮純化;病毒的沉淀及PEG沉淀,病毒的密度梯度離心;蛋白質(zhì)、核酸分離;生物制品、化學(xué)高分子制品、納米材料純化處理;臨床的血液、體液、排泄物等的分離。應(yīng)用廣泛,性能卓越。
 

  • 轉(zhuǎn)速可達(dá)30,000 X g,在較高轉(zhuǎn)速也可使樣品穩(wěn)定離心

  • 9/10升降速可調(diào)節(jié),有利于密度梯度離心

  • 多種轉(zhuǎn)子可選,可實(shí)現(xiàn)單管2mL-400mL的離心需求

  • 自鎖轉(zhuǎn)子搭配快鎖蓋子,實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)自切換及離心

  • 搭配動平衡實(shí)時(shí)監(jiān)測系統(tǒng),保證樣本安全

來源:深圳市瑞沃德生命科技股份有限公司
聯(lián)系電話:400-966-9516
E-mail:rwd@rwdls.com

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