延胡索乙素（THP）是罌粟科紫堇屬植物延胡索的主要活性成分，又稱為四氫巴馬汀。具有鎮(zhèn)痛、催眠、降低冠脈阻力及增加血流量等多個(gè)與中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)的藥理作用，臨床上應(yīng)用較為廣泛。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)延胡乙素的研究多集中在體內(nèi)（即血漿中）藥動(dòng)學(xué)研究，且其研究多采用組織勻漿的方式，但其藥物治療的作用靶部位在腦部，故對(duì)腦部藥物的監(jiān)測(cè)十分必要。

微透析具有活體連續(xù)取樣、動(dòng)態(tài)觀察等特點(diǎn)，尤其適合于深部組織和器官的活體生化研究。本實(shí)驗(yàn)擬采用微透析技術(shù)進(jìn)行清醒大鼠腦局部藥動(dòng)學(xué)研究，消除了麻醉狀態(tài)對(duì)藥物分布的影響，獲得的生理參數(shù)最接近動(dòng)物正常指標(biāo)，為其腦靶向制劑的研究與開(kāi)發(fā)提供實(shí)驗(yàn)參考。

腦微透析探針套管的埋植及探針的植入

大鼠麻醉后（10％水合氯醛3.0ｍＬ·ｋｇ^-１腹腔注射）固定在立體定位儀上，頭部備皮并消毒，于頭蓋骨平行與矢狀縫做一個(gè)２cm的中線切口，暴露頭頂顱骨，分離骨膜等軟組織。按照大鼠腦圖譜以前鹵作為定位基點(diǎn)，坐標(biāo)為（左側(cè)大腦）ＡＰ：+0.2ｍｍ；ＭＬ：+3.5ｍｍ；ＤＶ=-3.5ｍｍ。定位后用顱骨鉆鉆一個(gè)直徑為1.2ｍｍ的小孔，刺破硬腦膜，植入帶管心針的套管，而后用牙科水泥固定，保證套管不隨動(dòng)物的正�；顒�(dòng)而移動(dòng)或松動(dòng)。待牙科水泥硬結(jié)后，往大鼠腹腔注射青霉素（８萬(wàn)Ｕ），在25～30 ℃條件下飼養(yǎng)３～４ｄ，恢復(fù)至正常的行動(dòng)與飲食，外形無(wú)萎靡不振等不良手術(shù)反應(yīng)。探針套管埋植成功后，將浸泡在肝素鈉注射液中３０min的腦探針以硬腦膜為標(biāo)準(zhǔn)向腹側(cè)垂直插入，固定于大鼠紋狀體。

體內(nèi)回收率樣品的收集與測(cè)定

探針植入后，用延胡索乙素質(zhì)量濃度為1.1721μｇ·ｍＬ^-１的 含藥人工腦脊液以1.5μＬ·min^-１流速灌流探針。平衡１ｈ后，每隔20min收集一次透析液樣品，灌流 10ｈ，測(cè)定含藥人工腦脊液和透析液樣品中藥物濃度，用反透析法測(cè)定延胡索乙素的體內(nèi)回收率。按以下公式計(jì)算體內(nèi)回收率。結(jié)果見(jiàn)下圖。

延胡索乙素腦微透析探針體內(nèi)回收率的穩(wěn)定性

結(jié)果表明，當(dāng)灌流液流速為1.5μＬ·min^-１時(shí)，10ｈ內(nèi)，腦探針中延胡索乙素體內(nèi)平均回收率為32.03％，RSD為5.65％。延胡索乙素的體內(nèi)回收率在10ｈ內(nèi)能保持相對(duì)穩(wěn)定。

本實(shí)驗(yàn)研究了清醒動(dòng)物組織內(nèi)游離藥物濃度隨時(shí)間變化趨勢(shì)及其藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。一般情況下，體內(nèi)真正發(fā)揮作用的是游離的藥物濃度，而與血漿蛋白或者其他特殊組織結(jié)合的部分只能起到藥物的一種臨時(shí)儲(chǔ)庫(kù)的作用。所以，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可反映組織中真正起藥效作用部分的延胡索乙素的藥動(dòng)學(xué)特征。腦部微透析取樣方法可在體評(píng)價(jià)含延胡索乙素的腦部靶向制劑，為靶向制劑的開(kāi)發(fā)與臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)參考。

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