重組蛋白通常通過將重組DNA轉(zhuǎn)染到宿主細(xì)胞中來產(chǎn)生，隨后培養(yǎng)宿主細(xì)胞并轉(zhuǎn)錄和翻譯轉(zhuǎn)染的DNA�？梢赃x擇不同的宿主細(xì)胞用于重組蛋白的生產(chǎn)，其選擇取決于需要產(chǎn)生的蛋白質(zhì)的類型、其功能活性和所需的產(chǎn)量。 



哺乳動物系統(tǒng)
哺乳動物系統(tǒng)通常用于表達(dá)哺乳動物蛋白質(zhì)，因為它們代表了生理相關(guān)的環(huán)境。該系統(tǒng)用于生產(chǎn)人類抗體、復(fù)合蛋白和其他用于基于細(xì)胞的檢測的蛋白質(zhì)。哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)也可用于細(xì)胞系內(nèi)蛋白質(zhì)的瞬時或穩(wěn)定表達(dá)。瞬時表達(dá)可在一到兩周內(nèi)產(chǎn)生大量蛋白質(zhì)，而具有穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞系可用于多次實驗。瞬時表達(dá)系統(tǒng)使用懸浮培養(yǎng)并具有產(chǎn)生克/升產(chǎn)量的能力。此外，與其他系統(tǒng)相比，哺乳動物系統(tǒng)具有更高水平的天然折疊和翻譯后修飾。

昆蟲表達(dá)系統(tǒng)
昆蟲細(xì)胞是產(chǎn)生重組蛋白的另一種選擇。昆蟲細(xì)胞具有許多優(yōu)點，其主要優(yōu)點是該系統(tǒng)可以按比例放大并適用于功能上與哺乳動物蛋白質(zhì)相似的蛋白質(zhì)的大規(guī)模表達(dá)。此外，昆蟲表達(dá)系統(tǒng)可以產(chǎn)生高達(dá) 500ug/L 的產(chǎn)量。然而，該系統(tǒng)的缺點包括與原核系統(tǒng)相比更具挑戰(zhàn)性的過程和培養(yǎng)條件的冗長。

酵母菌和絲狀真菌的作用
釀酒酵母是第一個用于制造重組蛋白的酵母菌。該物種與其他幾種酵母物種一起將新產(chǎn)生的重組蛋白分泌到培養(yǎng)基中。與原核系統(tǒng)相比，酵母細(xì)胞還可以對哺乳動物蛋白質(zhì)進(jìn)行正確的折疊和翻譯后修飾。該系統(tǒng)的一個缺點是與哺乳動物細(xì)胞相比，酵母細(xì)胞中表達(dá)的蛋白質(zhì)的糖基化存在差異。酵母系統(tǒng)可用于產(chǎn)生不需要糖基化的蛋白質(zhì)。胰島素是一個值得注意的例子，因此酵母系統(tǒng)已被廣泛用于生產(chǎn)這種蛋白質(zhì)。

絲狀真菌也已被用于產(chǎn)生各種重組蛋白。真菌可分泌高達(dá) 30g/L 的蛋白質(zhì)。然而，真菌也會產(chǎn)生蛋白酶，這限制了它們用于產(chǎn)生重組蛋白的用途。

細(xì)菌系統(tǒng)
細(xì)菌可以很容易且相當(dāng)快速地培養(yǎng)和生長，使該系統(tǒng)受到研究人員的歡迎。細(xì)菌細(xì)胞也可以產(chǎn)生高水平的重組蛋白。

該系統(tǒng)的主要缺點是非功能性蛋白質(zhì)的表達(dá)，因為細(xì)菌不具備實現(xiàn)哺乳動物蛋白質(zhì)折疊或翻譯后修飾的內(nèi)部機(jī)制。在某些情況下，這些蛋白質(zhì)也可能變得不溶，因此需要使用苛刻的變性劑和蛋白質(zhì)重折疊程序來回收重組蛋白質(zhì)。

無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)
在無細(xì)胞系統(tǒng)中，可以使用與翻譯相容的全細(xì)胞提取物在體外 進(jìn)行蛋白質(zhì)的合成。這些細(xì)胞提取物包含轉(zhuǎn)錄、翻譯和翻譯后修飾重組蛋白所需的所有分子和酶。通過額外補(bǔ)充輔因子，可在數(shù)小時內(nèi)形成感興趣的蛋白質(zhì)。然而，該系統(tǒng)可能不適用于重組蛋白的大規(guī)模生產(chǎn)。該系統(tǒng)的優(yōu)點包括無需細(xì)胞培養(yǎng)即可合成蛋白質(zhì)；此外，還可以同時表達(dá)多種蛋白質(zhì)。

化學(xué)蛋白質(zhì)合成
該方法用于合成具有非天然氨基酸或具有毒性的蛋白質(zhì)的重組蛋白質(zhì)。雖然這種方法提供了一種產(chǎn)生純蛋白質(zhì)的方法，但產(chǎn)品的數(shù)量是有限的。此外，對于較長的多肽鏈，該方法可能很昂貴。

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