《小鼠鏟屎官養(yǎng)成記》,每周為大家介紹一個小鼠繁育與健康的知識點,帶大家成為一個合格的小鼠鏟屎官。在進行實驗研究的時候,小鼠的健康可能會影響到實驗研究結果的準確性與可重復性!今天我們來接著學習健康檢測常用的采樣送檢方式。
opti-spot 血片
圖1. OPTI-SPOT血片
1.用途
可用于送國外檢測機構,進行血清學檢測病原體,例如MHV、MNV、仙臺病毒等。
2.opti-spot試紙條類型
☑ 標準版(見圖1下方):比較常見,除了采血的紙片,還有紙質(zhì)外殼,比較完善;
☑ 簡易版(見圖1上方):只有采血的紙片。
3.使用方法
☑ 從小鼠尾部等取少量血液(血液量至少為25ul),滴入血片的圓圈處。第一滴血通常棄去不用,采集第二滴及以后的血。通常2-3滴血就足夠了;
☑ 圓圈內(nèi)部以及背面,必須全部被血液浸透;
☑ 允許有少量的血液滴在圓圈外,但是圓圈內(nèi)的血液量一定要足;
☑ 做好標記,然后放置晾干,至少1個小時;
☑ 連同干燥劑一起裝入自封袋,以備運輸。
4.注意事項
☑ 每個血片只能用于采集1只動物;
☑ 血片圓圈內(nèi)的血液量要足;
☑ 晾干,并保持干燥。
糞便樣本
1.用途
☑ 可以用于糞便樣本的PCR法檢測病原體;
☑ 可以用于鏡檢腸道內(nèi)寄生蟲;
☑ 可以采集后,轉(zhuǎn)入糞便運輸培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)法檢測。
2.容器
滅菌的2mL或1.5mL的EP管。
3.采集方法
☑ 采集小鼠的糞便顆粒,盡可能新鮮;
☑ 每個樣本至少3顆糞便,最多不超過10顆糞便;
☑ 如果要轉(zhuǎn)入糞便運輸培養(yǎng)基,糞便中加入少量滅菌水,混勻后用配套的拭子粘取糞便糊,插入糞便培養(yǎng)基中。
4.注意事項
☑ 如果要采集糞便用于培養(yǎng)法檢測,糞便顆粒要盡可能新鮮;
☑ 如果要采集糞便用PCR檢測,對糞便的新鮮程度要求會低一點;
☑ 要選擇濕潤的糞便顆粒,不要選用干燥的糞便顆粒。
口腔拭子
圖2. 口腔拭子采樣材料
1.用途
☑ 用于口咽部分泌物的采集;
☑ 可以用于PCR法檢測,也可以轉(zhuǎn)入運輸培養(yǎng)基用于培養(yǎng)法檢測;
2.采樣材料
☑ 口腔拭子(圖2右側):國外比較常用,通常是無菌的,可以直接使用;
☑ 細紙軸棉花棒(圖2左側):經(jīng)檢測機構推薦,在國內(nèi)找到的替代品,需分裝經(jīng)高壓滅菌后使用。
3.采集方法
☑ 每個拭子只能采集一只小鼠的樣本;
☑ 保定小鼠,將拭子插入小鼠的口腔內(nèi),可以輕輕旋轉(zhuǎn),或停頓一下,采集口咽部的分泌物;
☑ 如果進行病原菌的PCR檢測,可以直接把拭子剪斷后放到EP管或15mL離心管里。每管樣本可以包含不超過10根小鼠口腔拭子;
☑ 如果進行病原菌的培養(yǎng)法檢測,需要插到運輸培養(yǎng)基里。
4.注意事項
在采集時,如果要旋轉(zhuǎn)口腔拭子,動作要輕柔。如果操作粗暴,可能會引起小鼠口腔內(nèi)出血。
皮毛拭子
圖3. 皮毛拭子采樣材料
1.用途
用于PCR方法檢測體外寄生蟲。
2.采樣材料
☑ 皮毛拭子(見圖3右側):國外比較常用,通常是無菌的,可以直接使用。和口腔拭子長得很像,但是拭子頭部要粗一些;
☑ 粉頭拭子(見圖3左側):經(jīng)檢測機構推薦,在國內(nèi)找到的替代品。
3.采集方法
☑ 每個拭子只能采集一只小鼠的樣本;
☑ 單手固定小鼠尾部,另一手用拭子在小鼠的被毛上逆毛方向滾動;
☑ 至少要包含頭面部、背部、腹部、肛周等處;
☑ 把拭子剪斷后放到EP管或15mL離心管里;
☑ 每管樣本可以包含不超過10根小鼠皮毛拭子。
4.注意事項
要逆著被毛的方向,滾動采集。
皮毛膠帶玻片
1.用途
用于鏡檢體外寄生蟲。
2.采樣材料
膠帶、載玻片。
3.采集方法
☑ 一人固定小鼠,另一人手持一段透明膠帶(推薦得力1.8cm寬);
☑ 逆著被毛方向,在小鼠被毛上粘;
☑ 至少要包含頭面部、背部、腹部、肛周等處;
☑ 將膠帶貼在載玻片上,做好標記;
☑ 每個膠帶能采集不超過3只小鼠;
4.注意事項
膠帶粘在玻片上時,要盡可能貼合,不要鼓起。
拔毛玻片
1.用途
國外檢測機構比較常用,用于鏡檢體外寄生蟲。
2.采樣材料
膠帶、鑷子、載玻片
3.采集方法
☑ 一手固定小鼠尾部,另一手持鑷子,在小鼠身上拔毛;
☑ 至少要包含頭面部、背部、腹部、肛周等四個部位的被毛;
☑ 將拔下的被毛粘在膠帶上,然后貼在載玻片上,做好標記。
4.注意事項
☑ 膠帶粘在玻片上時,要盡可能貼合,不要鼓起;
☑ 至少4撮被毛。