WB，蛋白質印跡(Western blotting)又稱免疫印跡(immunoblotting)，是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術，具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。

轉膜（Transmembran）是將電泳后分離的蛋白質轉移到固相載體（PVDF膜或NC膜）上的過程。通常有兩種方法，毛細管印跡法和電泳印跡法，常用的電泳印跡法有濕轉和半干轉兩種。兩者基本原理相同，只是在用于固定膠/膜疊層和施加電場的裝置不同。近些年，有些公司也推出了快速轉膜的儀器，有的也得到了一部分用戶的認可。這些轉膜方法各有什么優(yōu)缺點，我們將從多方面分析一下。

濕轉
 

濕轉是將膠/膜疊層裝置浸入緩沖液中，在膠/膜疊層的兩側加電場，電流會從膠/膜疊層中穿過，使帶電的蛋白在電流的作用下轉移到膜上。電流除了從膠/膜疊層穿過，還可以從緩沖液的其他區(qū)域流過，加上膠/膜疊層的電阻也比其他區(qū)域的電阻大，大部分電流優(yōu)先從沒有膠/膜疊層區(qū)域的緩沖液中流過，也就是說作用到膠/膜疊層的有效電流是很少的。再者，隨著轉膜時間的增加，緩沖液中的有效離子的濃度也會不斷地降低，表現為恒流轉膜時，電壓會不斷上升，恒壓轉膜時，電流會不斷降低。這就導致了濕轉的時間很長，一般在1-2個小時，但是慢也導致了結果的均勻和穩(wěn)定。

半干轉

 
半干轉是用浸滿轉膜緩沖液的濾紙夾住膠/膜疊層裝置，組成三明治結構，在這個三明治結構的兩側加上電極，形成電場。這時電場只作用在三明治結構上，因為三明治結構周圍沒有緩沖液，所以電流不會側漏。幾乎所有的電流都經過了膠/膜疊層，所以半干轉的效率很高，速度很快，一般在半小時以內。但是，由于半干轉用到的緩沖液很少，只有兩側濾紙浸入的一些緩沖液，這就導致了半干轉緩沖液中有效離子的濃度衰減很快，可能幾分鐘后，它的有效離子已經消耗殆盡，這時大分子量的蛋白還沒有完全轉到膜上，如果再增加轉膜時間也是無濟于事的。半干轉還有個問題就是產熱，由于它沒有足夠的緩沖液來降溫，導致它的熱量很難散掉。

快速轉膜
近些年出現的快速轉膜基本上都是在轉膜試劑上做一些優(yōu)化，使轉膜時的電流增大；加大電壓或電流等策略來實現快速轉膜的目的，有的電流能達到1-2A。這種方法沒有從根本上解決上面濕轉和半干轉，電流側漏、有效離子濃度衰減，產熱等問題，大電流還增加了燒膜的風險。

中科通儀M-Blot快速轉膜儀
 
 

中科通儀自主研發(fā)生產的專利產品M-Blot快速轉膜儀是濕轉和半干轉的結合，從根本上解決了傳統濕轉和半干轉的一些問題。

M-Blot快速轉膜儀是在半干轉裝置的基礎上增加持續(xù)補充轉膜緩沖液的功能，使三明治結構處于一個濕轉的環(huán)境中，這時它既有濕轉的均勻和穩(wěn)定，又有半干轉的效率。它有以下特點。
1.新 新型濕轉，轉膜過程中緩沖液每一秒都是新的，持續(xù)補充有效離子。
2.快 轉膜過程只需10-15分鐘。
3.省 節(jié)省試劑，單次只需100ml。
4.通 試劑開放，專用試劑效果更佳。
5.穩(wěn) 恒壓轉膜，電流也穩(wěn)定，高重現性。
6.冰 新緩沖液的補充同時也帶來了更低的溫度。
7.染 不止有轉膜，它還可以染色。
8.簡 全觸屏操作，簡單方便。
 
歡迎在南京中科通儀科技有限公司官網了解詳情www.zktony.com。