什么顏色?切片染色?
這個聽上去很神秘的操作
對于病理科醫(yī)生而言,每天都要遇到的
讓我們一起來探秘吧!
就使用蘇木精和伊紅染色的組織而言,理想的最終結(jié)果取決于幾乎無限 多個因素。
病理醫(yī)師在切片厚度、染色強度和顏色對比度方面存在個人偏好。
選擇使用哪種試劑時,必須考慮:成本、染色方法、是購買商業(yè)現(xiàn)成試劑還是由技術(shù)人員自制試劑、安全性、管理政策、便利性、可用性、質(zhì)量、技術(shù)限制以及個人偏好。
為什么要染色?為了提供臨床診斷,必須在顯微鏡下觀察組織。
組織標本經(jīng)實驗室處理并貼附到載玻片上后,需要進行適當?shù)娜旧拍茉陲@微鏡下評估。這是因為未染色的組織缺乏對比度:在顯微鏡下觀察時,一切結(jié)構(gòu)都呈現(xiàn)出相同的暗灰色。
未染色的組織 蘇木精伊紅 (H&E) 染色的組織
“染色”有什么作用?
讓不同的細胞形成鮮明對比
突顯特定形態(tài)特征
闡明不同的細胞結(jié)構(gòu)
檢測組織中的浸潤或沉積物
檢測病原體
不同的染色技術(shù)可用來揭示細胞的不同結(jié)構(gòu)
什么是 H&E 染色?
H&E 染色同時使用蘇木精和伊紅這兩種染料。
它通常被稱為“常規(guī)染色”,因為它是給原本透明的組織標本染色的最常用方式。H&E 可用于快速進行組織形態(tài)學(xué)評估,而且成本相對低廉。首次使用于大約 150 年前,目前仍在使用,幾乎沒有變化。
如何進行染色?
組織或細胞內(nèi)成分不會任意地著色,實際上染料會利用組織的化學(xué)差異有區(qū)別地對各種成分進行著色。
離子鍵是組織學(xué)染色技術(shù)中存在的最重要的鍵合類型。它涉及正負電荷的離子之間的靜電引力,其中一個在組織中,另一個在染料中。
蘇木精帶正電荷,可與帶負電荷的細胞成分(如細胞核內(nèi)的核酸)反應(yīng)。結(jié)果這些成分染成藍色。
伊紅帶負電荷,可與組織中帶正電荷的成分(如細胞質(zhì)種蛋白質(zhì)的氨基)反應(yīng)。結(jié)果這些成分染成深淺不一的紅色和粉色。
H&E 染色示例
H&E 染色
Böhmer 和 Fischer 于 1875 年發(fā)表了這種染色方法,使用歷史悠久。
H&E 是形態(tài)學(xué)評估和評估疾病過程相關(guān)改變的主要診斷技術(shù)。
H&E 仍然是世界上最常用的組織染色劑,估計每天有 250 萬至 300 萬張載玻片用它染色。
它是實用的多用途染色劑,使用起來方便快捷,所以能經(jīng)受住時間的考驗。
客戶期望或偏好較為主觀。