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免疫檢查點是指免疫細胞擁有的一組具有調(diào)節(jié)和控制免疫應答持久性同時保持自我耐受的信號通路分子。免疫檢查點可以是刺激性或抑制性的。免疫應答的功效由共刺激信號和共抑制信號之間的微妙平衡決定。程序性死亡蛋白配體1（PD-L1）是臨床實踐中唯一獲準使用的生物標志物，已被證明在選擇患者接受免疫檢查點抑制劑治療方面是不完善的。因此，需要新的生物標志物和新的治療靶點以最大化免疫療法的功效。

 

T細胞活化的V結(jié)構(gòu)域Ig抑制因子（V-domain Ig suppressor of T-cell activation, VISTA）是一種新的免疫調(diào)節(jié)受體，廣泛表達于髓系和淋巴細胞上，常被認為是多種癌癥預后不良的指標。臨床前研究的動物模型上通過基因敲除或抗體阻斷VISTA都能激活T細胞對腫瘤細胞的響應。

圖1. VISTA在抗腫瘤免疫中的抑制性免疫檢查點作用。VISTA在腫瘤細胞和/或免疫細胞上的陽性表達可誘導多種癌癥類型的免疫抑制環(huán)境。

 

但是VISTA調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)活化和抑制過程的機制尚未完全闡明。近期浙江大學的研究人員通過文獻梳理和計算機測算對VISTA在不同種癌癥所呈現(xiàn)的結(jié)果進行分析發(fā)現(xiàn)，與對免疫系統(tǒng)的抑制作用相反，VISTA的高表達與幾種特定癌癥類型的良好預后密切相關(guān)。因此，VISTA具有作為抗腫瘤免疫的刺激性檢查點的潛力，其機制值得進一步研究。

 

目前有兩項針對VISTA的癌癥治療藥物的臨床試驗正在進行中：CA-170和 CI-8993。2015年10月，Curis獲得了首個口服小分子拮抗劑CA-170的許可。CA-170選擇性靶向PD-L1和VISTA（兩者都是抑制性檢查點，可以抑制T細胞增殖）。今年2月，Curis宣布CA-170將進入IIb/III期隨機研究，在約240例nsNSCLC患者中評估CA-170聯(lián)合放化療的療效。CI-8993是一種針對VISTA的單克隆抗體，具有潛在的抑制性檢查點調(diào)節(jié)和抗腫瘤活性。CI-8993是一種針對VISTA的單克隆抗體，具有潛在的抑制性檢查點調(diào)節(jié)和抗腫瘤活性。

 

VISTA的作用正在評估中，當前可獲得的安全性和有效性數(shù)據(jù)并不排除進一步的研究。為了更好地了解VISTA參與和調(diào)控的分子途徑，并在體內(nèi)鑒定其配體，對于確定該生物標記物在免疫檢查點調(diào)節(jié)劑中的作用及其作為治療靶點的意義可能至關(guān)重要。

 

參考文獻：

1. Tagliamento M , Bironzo P , Novello S . New emerging targets in cancer immunotherapy: the role of VISTA[J]. ESMO Open, 2020, 4(Suppl 3):683.

2. VISTA: an immune regulatory protein checking tumor and immune cells in cancer immunotherapy[J]. Journal of Hematology & Oncology, 2020, 13(1):1-13.

 

賽業(yè)生物VISTA人源化小鼠，助力腫瘤研究

品系背景：C57BL/6N

 

品系構(gòu)建策略：

在小鼠VISTA位點敲入人源VISTA基因的胞外區(qū)和跨膜區(qū)序列，保留鼠源VISTA基因的胞內(nèi)區(qū)，構(gòu)建嵌合型的VISTA人源化小鼠模型。

 

品系說明：

■ hVISTA在小鼠體內(nèi)表達具有正常的生理表達和調(diào)節(jié)模式。

■ 小鼠的免疫系統(tǒng)功能健全。

■ 缺乏小鼠靶基因的表達，從而避免了交叉反應。

 

研究應用：

■ 能在免疫系統(tǒng)功能健全的小鼠中進行靶向人免疫檢查點VISTA的免疫腫瘤藥物的體內(nèi)功效評估和分析。

■ 條件性基因敲除小鼠可以對化合物的特異性和毒性進行組織特異性評估。

■ 與hPD-1小鼠雜交（hPD-1/hVISTA）：這種雙人源化的hPD1/hVISTA模型能夠在免疫系統(tǒng)功能健全的小鼠中評估靶向人VISTA和/或人PD-1的兩種化合物。

 

模型驗證：

圖2. hVISTA在VISTA人源化小鼠中的表達模式與mVISTA在野生型小鼠中的表達模式一致。hVISTA和mVISTA分別在VISTA人源化小鼠和野生型小鼠的 (A) Tregs（viable, CD3+CD4+CD25+Foxp3+）、（B）CD11bHigh (viable, CD3-CD19-）、(C) CD4+T細胞 (viable, CD3+CD4+Foxp3-) 和 (D) CD8+T細胞 (viable, CD3+CD8+) 上表達。在純合VISTA 敲除小鼠的細胞上未檢測到VISTA。

 

圖3. hVISTA對效應T細胞發(fā)揮功能。從脾臟和淋巴結(jié)分離T細胞（CD4+CD25-），并用αCD3和hVISTA-Fc、mVISTA-Fc或IgG-Fc激活3天。（A）用CFSE稀釋法測定細胞增殖；（B）ELISA法測定細胞上清中IL-2的產(chǎn)生。結(jié)果以均數(shù)±標準差表示。

 

圖4. 人源VISTA單抗聯(lián)合抗小鼠PD-1發(fā)揮抗腫瘤作用。野生型和人源化VISTA小鼠接種MC38腫瘤細胞，并采取αKLH（對照），αmPD-1（鼠源PD-1單抗），αhVISTA及αmPD-1+αhVISTA（鼠源PD-1單抗和人源VISTA單抗聯(lián)合用藥）四種治療方式。測量（A）野生型和（B）純合hVISTA小鼠在不同時間點的腫瘤體積。（C）分析純合hVISTA小鼠在接種MC38腫瘤后50天內(nèi)的存活率。在VISTA人源化小鼠中，αmPD-1+αhVISTA聯(lián)合用藥的抗腫瘤效果最好。

 

引用文獻精選：

1. Eltanbouly M A, Zhao Y, Nowak E C, et al. VISTA is a checkpoint regulator for naïve T cell quiescence and peripheral tolerance. Science, 2020, 367(6475).

2. Johnston R J, Su L J, Pinckney J, et al. VISTA is an acidic pH-selective ligand for PSGL-1. Nature, 2019, 574(7779): 565-570.

 

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