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作為腫瘤治療的革命性創(chuàng)新，免疫治療在多種腫瘤治療領(lǐng)域取得了重大突破。除了阻斷共抑制途徑（如CTLA-4和PD-1介導(dǎo)的途徑）外，新的有前景的方法包括激活共刺激途徑以增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)。糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的腫瘤壞死因子受體（glucocorticoid-induced TNF receptor，GITR）是表達(dá)于細(xì)胞毒性T細(xì)胞和Treg細(xì)胞的共刺激受體，它的活化能夠阻斷Treg細(xì)胞的抑制作用，增強(qiáng)細(xì)胞毒性T細(xì)胞的功能，因此活化GITR是比較有前景的治療方案之一。

GITR屬于TNFRS超家族的一種1型跨膜蛋白，可以與兩個(gè)內(nèi)源性配體相互作用：GITR配體（GITRL）（一種2型跨膜蛋白）和SECTM1A，它既可以作為跨膜蛋白也可以作為分泌蛋白表達(dá)。在小鼠中，發(fā)現(xiàn)SECTM1A可以激活GITR和CD7，但是它觸發(fā)GITR的作用尚不清楚。反之，已知GITR/GITRL系統(tǒng)在免疫反應(yīng)和炎癥中起重要作用。
 

表1. GITR在免疫系統(tǒng)細(xì)胞中的功能

近年來(lái)，GITR作為一個(gè)藥理作用靶點(diǎn)得到了廣泛的研究。激動(dòng)劑抗GITR mAb對(duì)GITR的共激活可增強(qiáng)免疫反應(yīng)、炎癥并從而增強(qiáng)抗腫瘤反應(yīng)。而通過(guò)拮抗劑mAb抑制GITR可以抑制T細(xì)胞活化和免疫反應(yīng)，因此GITR激動(dòng)劑mAb已被進(jìn)一步開(kāi)發(fā)為抗腫瘤藥物。在腫瘤模型中，GITR mAb的抗腫瘤活性主要基于增強(qiáng)CD8+和CD4+效應(yīng)T細(xì)胞活性的能力以及對(duì)腫瘤浸潤(rùn)Treg的抑制/消耗。重要的是，GITR在腫瘤本身上不表達(dá)，但在幾種人類癌癥類型（包括肺癌，腎細(xì)胞癌，頭頸癌和黑色素瘤）的腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（TIL）上表達(dá)。

GITR和其他共刺激分子一樣，對(duì)T細(xì)胞的激活起著關(guān)鍵作用，它的活性可以通過(guò)協(xié)同作用增強(qiáng)其他抗癌療法�？筆D-1和GITR激動(dòng)劑單抗聯(lián)合治療可在卵巢癌和乳腺癌小鼠模型中獲得長(zhǎng)期存活，刺激產(chǎn)生IFN-γ的常規(guī)T細(xì)胞，抑制免疫抑制的Tregs和髓系來(lái)源的抑制細(xì)胞。在CT26（結(jié)腸癌）和CMS5a（纖維肉瘤）小鼠腫瘤模型中，聯(lián)合應(yīng)用GITR單克隆抗體和抗CTLA-4可導(dǎo)致80%的腫瘤響應(yīng)，減少腫瘤內(nèi)Treg（通過(guò)GITR）和刺激CD8+T細(xì)胞（通過(guò)CTLA-4）。靶向GITR和OX40激動(dòng)劑（OX40配體融合蛋白）對(duì)CT26荷瘤小鼠表現(xiàn)出協(xié)同抗腫瘤作用，盡管聯(lián)合用藥的毒性可能是臨床發(fā)展的一個(gè)限制。目前，一些臨床研究正在進(jìn)行中，特別是與其他治療相結(jié)合，期待開(kāi)發(fā)GITR刺激療法能夠獲得進(jìn)一步利好的結(jié)果。
 

表2. 激活GITR的療法正在進(jìn)行的臨床試驗(yàn)（部分）

賽業(yè)生物GITR人源化小鼠，助力腫瘤研究
品系背景：C57BL/6N

品系構(gòu)建策略：
將人源GITR基因的胞外結(jié)構(gòu)域序列插入小鼠GITR基因座，取代小鼠的GITR的胞外結(jié)構(gòu)域，由小鼠GITR內(nèi)源啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)，表達(dá)人源GITR胞外結(jié)構(gòu)域和小鼠GITR的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域。

品系說(shuō)明：
■ hGITR在小鼠體內(nèi)表達(dá)具有正常的生理表達(dá)和調(diào)節(jié)模式。
■ 小鼠的免疫系統(tǒng)功能健全。
■ 缺乏小鼠靶基因的表達(dá)，從而避免了交叉反應(yīng)。

研究應(yīng)用：
能在免疫系統(tǒng)功能健全的小鼠中進(jìn)行靶向人免疫檢查點(diǎn)GITR的免疫腫瘤藥物的體內(nèi)功效評(píng)估和分析。

模型驗(yàn)證：

圖1. hGITR在免疫細(xì)胞上被誘導(dǎo)表達(dá)。被αCD3/αCD28刺激的脾細(xì)胞（2d），流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)到hGITR在人源化GITR小鼠的Treg（CD4+Foxp3+）、傳統(tǒng)CD4 T細(xì)胞（CD3+CD4+）、CD8（CD3+CD8+）和B細(xì)胞（CD3-CD19+）細(xì)胞上有表達(dá)。
 

圖2. 體外實(shí)驗(yàn)中hGITR在效應(yīng)T細(xì)胞和Treg中具有功能。Treg（CD4+Foxp3+）分別被小鼠或人源GITRL刺激2h后，再與用CFSE標(biāo)記的CD4 T細(xì)胞（CD4+CD25-）共培養(yǎng)，并用αCD3+/-human GITRL激活。
 

圖3. hGITR在腫瘤浸潤(rùn)細(xì)胞中（TILs）被誘導(dǎo)表達(dá)。從接種MB49膀胱癌的hGITR純合子小鼠體內(nèi)分離脾細(xì)胞和腫瘤浸潤(rùn)細(xì)胞，hGITR在Treg（CD4+Foxp3+）、傳統(tǒng)CD4 T細(xì)胞（CD3+CD4+）、CD8（CD3+CD8+）細(xì)胞上都有表達(dá)。
 

圖4. hGITR單抗具有抗腫瘤作用。野生型和hGITR純合子小鼠分別接種MB49膀胱癌細(xì)胞，用αhGITR治療能夠抑制hGITR純合子小鼠體內(nèi)腫瘤增殖。

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參考文獻(xiàn)：
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3. Kim I K,Kim B S,Koh C H,et al.Glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor–related protein co-stimulation facilitates tumor regression by inducing IL-9–producing helper T cells[J].Nature medicine,2015,21(9):1010.