生物抗體應(yīng)用

標(biāo)記蛋白質(zhì)氨基的活化生物素：N-羥基丁二酰亞胺酯（BNHS）。

標(biāo)記蛋白質(zhì)醛基的活化生物素：酰肼（BHZ）和肼化生物胞素（BCHZ）。

標(biāo)記蛋白質(zhì)巰基的活化生物素：3-（N-馬來(lái)酰亞胺-丙酰）-生物胞素（MPB）。

標(biāo)記蛋白質(zhì)核酸的活化生物素：常用于標(biāo)記核酸分子的活化生物素有光生物素、生物素脫氧核苷三磷酸、BNHS和BHZ。

生物抗體的常識(shí)問(wèn)題

活化生物素通過(guò)側(cè)鏈與蛋白分子連接；

一個(gè)蛋白分子可被多個(gè)生物素標(biāo)記－多價(jià)性；

對(duì)BNHS多標(biāo)記抗體, BHZ則多標(biāo)記微酸性抗原；抗原、抗體標(biāo)記后活性不變；

可對(duì)標(biāo)記材料（如酶）標(biāo)記：堿性磷酸酶標(biāo)記后活性將降低；

生物抗體標(biāo)記蛋白質(zhì)：

根據(jù)生物抗體衍生物的特性可以將生物素化蛋白質(zhì)衍生物分為兩類：

生物素化的大分子生物活性物質(zhì)（如抗原、抗體），
標(biāo)記材料（如酶）結(jié)合生物素后制成的標(biāo)記物。

生物抗體注意事項(xiàng)：

依抗原或抗體分子所帶可標(biāo)記基團(tuán)的種類（氨基、醛基或巰基）以及分子的酸堿性，選擇相應(yīng)的活化生物素和反應(yīng)條件；
標(biāo)記反應(yīng)時(shí)，活化生物素與待標(biāo)記抗原或抗體應(yīng)有適當(dāng)?shù)谋壤�；生物素：IgG 用量比(mg/mg)宜為2:1, IgG應(yīng)用濃度0.5~5μg/ml; 生物素1~3個(gè)/Ag，3~5個(gè)/Ab；
為減少空間位阻影響，可在生物素與被標(biāo)記物之間加入交聯(lián)臂樣結(jié)構(gòu)；
生物素與抗原、抗體等蛋白質(zhì)結(jié)合后，不影響后者的免疫活性；標(biāo)記酶時(shí)則結(jié)果有不同。