小鼠尾巴(左)和大鼠尾巴(右)
大鼠尾靜脈注射過程
一、準備工作
大鼠固定器,1ml注射器,酒精棉球,醫(yī)用膠帶,加熱裝置等。
二、找準尾靜脈,并擴張血管
大鼠尾靜脈到底是哪條?大鼠尾靜脈組成與小鼠類似,由于兩外側(cè)靜脈血管,最明顯,因此注射一般選擇位于尾巴兩側(cè)的血管,注意是顯青色那條,腹部方向偏紅色的血管是動脈。
擴張靜脈血管(3種途徑)
1.鑒于尾靜脈細小并且不明顯,所以在注射之前需要將血管擴張,便于注射。
2.將大鼠尾部在45~50℃左右溫水浸浴2-3min,以擴張靜脈,軟化角質(zhì);
3.用酒精擦拭血管,可使血管擴張,使靜脈血管相對清晰一點,同時也可軟化表皮角質(zhì);
4.利用紅外線烤燈加熱鼠尾3-5min,使靜脈充盈。
三、大鼠固定
由于大鼠體積較大,尾靜脈注射時,必須使動物處于相對穩(wěn)定狀態(tài)才可操作。
一般是使用大鼠固定器:使動物整個身體置于固定器中,尾巴從固定器孔中露出來,固定器前端是鏤空的小孔,保障動物呼吸順暢;并且前端可調(diào)節(jié),根據(jù)動物大小適當調(diào)節(jié)達到最合適的部位。
大鼠固定器
注:為了注射方便,可以使動物處于側(cè)躺,血管正面向上
四、注射(最關鍵最困難部分)
1.左手捋順固定尾巴找到尾靜脈,在尾尖向尾根方向3-5cm(距尾尖1/3~1/2段)處酒精擦拭消毒;
2.用1ml注射器穿刺尾靜脈,針尖斜面朝上,針頭與鼠尾保持15-30°的夾角刺入,針尖刺破表皮后,平行進針;
3.接著繼續(xù)向尾根部方向進針大約1cm停止前進,稍微回抽,注射器看到有回血比較順暢的流出時即可開始慢慢推注;
4.注射結(jié)束拔出注射器,醫(yī)用膠帶綁上傷口,防止出血。
具體操作如下圖所示:
具體操作步驟,請參考下面視頻:
常見問題分析
1. 大鼠尾靜脈注射成功的關鍵點?
1)提前加熱動物尾巴,使靜脈血管看起來有明顯的擴張,易辨別;
2)切記分清尾巴上的靜脈位置,動物正常站立情況下,尾巴左右兩側(cè)才是靜脈;
3)穿刺時一定要準確刺中靜脈血管,不能橫向刺進太多,以免刺穿血管不回血,再注射容易出現(xiàn)鼓包。
4)注射時的速度應慢慢推進,推注太快容易使動物感到不適,會出現(xiàn)掙扎,容易出現(xiàn)意外狀況。
2. 注射成功的特點?
1)進針時,針頭可見回血(如上圖),代表注射到靜脈。
2)注射到靜脈,推液幾乎沒有阻力。
3)隨著藥液推進,能清晰看到液體在血管流動。
4)藥物注射結(jié)束后,尾巴沒有明顯的腫脹及藥物溢出。
3. 注射失敗的特點?
1)如果注射到靜脈以外,強行推液,阻力較大;
2)沒有回血注射時,液體無法進入靜脈而集聚在注射部位,從而導致血管部位腫脹變白;
3)藥物注射出針后,對于有大量血或者藥液大量滲出,則進入體內(nèi)藥量無法保障;
4)尾部注射部位會有少量淤血,尾巴顏色變暗并腫脹。
4. 注射位置的選擇?
一般選擇距尾尖1/3處注射,有2個原因;一是因為隨著往根部走,大鼠尾巴的角質(zhì)層增厚,尾靜脈不再那么淺顯;二是若是失敗,同一部位不宜再次注射可以逐步向尾根移動。若是技術很嫻熟,也可以根據(jù)自己經(jīng)驗選擇注射位置,因為每個位置的注射力度不同的,需要自己體會。
5. 如何防止刺入皮下?
很多時候你覺得進了血管打的卻是皮下,這與進針的位置和深度有很大關系。注射時既不能偏離血管刺入,也不能刺入太深,這樣容易刺穿血管。刺入血管的手感是稍微不同于刺入表皮的,刺入后看看針頭是否隨尾巴向根部方向與血管平行著移動;另外需要進針深一些,最好是進入到?jīng)]過針頭總長的三分之二,這樣注射器針頭就平穩(wěn)的在血管里面了。
6. 尾靜脈注射對大鼠周齡的要求?
大鼠隨著年齡的增長,體重增加,體型增大,同時尾巴皮膚的角質(zhì)層也開始增厚。尾巴慢慢的由清晰可見血管脈絡的淺色變成顏色發(fā)黃發(fā)暗的黃褐色形成厚厚的角質(zhì)層,靜脈血管脈絡也不清晰可見了。如下圖為老年鼠的尾巴:
一般大鼠在6-8周時,相對于年紀更大的大鼠來說尾巴是比較清晰的,也比較容易靜脈注射。但對于10周以上的老年鼠,不建議尾靜脈注射,可以考慮其他給藥方式開展實驗。
7. 大鼠尾靜脈注射常用于什么實驗?
常用于藥代動力學實驗,急性毒性實驗,也可用于注射細胞病毒等。