ELISA測定試劑盒操作技術的影響有哪些
瀏覽次數(shù):1747 發(fā)布日期:2019-11-22
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ELISA測定試劑盒誤差的方法:
1.做實驗時少說話,防止唾液掉進酶標條中。
2.加入一抗二抗需要放入37°。
3.如果同時做多個板子,多個板子別羅一起;盡量少用排槍。
4.加樣時,由低濃度向高濃度加,這樣減少跳孔的幾率。
5.勤換槍頭。
一、移液器的使用,加樣(抗體)等需要準確定量的試劑時不使用排槍,經(jīng)驗證明排槍很不準確,極易跳孔,不要圖便宜買低檔的tips 因為ELISA不但會放大被檢測的目的蛋白,也會放大非特異結合的雜質(zhì)蛋白。
二、倍比稀釋樣品時,稀釋倍數(shù)要小于10。
三、所有的裝跟ELISA測定試劑盒相關試劑的容器,玻璃制品的要干烤過或者使用一次性的樹脂容器。
ELISA測定試劑盒操作技術的影響:
1)應保證清潔,整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸,以上的措施可以使“花板”降至低限度,從而提高檢測的特異性,并得到更準確。
2)合理安排檢測量,ELISA試劑盒以免反應板過多造成洗板等待時間長。
3)加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4)用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干,防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導致“花板”的出現(xiàn)。
5)嚴重溶血:以HRP為標記的ELISA試劑盒測定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性。