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動(dòng)物腦電極使用及手術(shù)指導(dǎo)

瀏覽次數(shù):4934 發(fā)布日期:2019-10-17  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
一、電極使用指導(dǎo)
 
1.1電極檢查
 電極固定在海綿中,便于安全裝運(yùn)和存儲(chǔ)。對(duì)剛收到的電極應(yīng)進(jìn)行外觀檢查并確認(rèn)是否完好。在透明包裝盒未開封的情況下,肉眼或借助顯微鏡檢查電極的整體外觀,主要確定電極是否包裝完好,電極在包裝盒內(nèi)是否岀現(xiàn)移動(dòng)或脫落,導(dǎo)致電極絲被破壞掉。如果懷疑電極絲損壞了,可在50×或100×的顯微鏡下檢查,檢查包括電極絲整體整齊度、電極絲尖端是否出現(xiàn)折彎及涂覆層脫落現(xiàn)象。有以上情況的話及時(shí)拍照并給公司相關(guān)負(fù)責(zé)人員反饋。取電極時(shí),一手捏著泡沫夾板,另一只手或鑷子緊緊夾住著電極接口處,不能觸碰電極尖端和表面。另外,只可使用帶有刻度尺的顯微鏡對(duì)電極絲的直徑進(jìn)行測(cè)量,檢查時(shí)切勿使用其他設(shè)備觸碰到電極絲。
 
1.2滅菌
方法一,使用前采用氣體滅菌,滅菌溫度不能超過(guò)110℃。

方法二,電極尖端先在75%酒精中浸泡,切勿將電極尖端觸碰到容器表面,然后用無(wú)菌水順著露岀的電極尖端往下沖洗,避免酒精殘留。對(duì)于硅膠材料的電極如柔性電極應(yīng)盡量避免酒精長(zhǎng)時(shí)間的接觸,可使用無(wú)菌生理鹽水浸泡消毒。
 
1.3阻抗值測(cè)量
a.阻抗測(cè)量?jī)x上有正、負(fù)(參考)兩個(gè)夾子,用1根金屬棒探入生理鹽水,負(fù)的夾子夾在這個(gè)金屬棒上;
b.阻抗測(cè)試儀正的一端接在從電極端口段引出的接線端或插針上,將電極絲尖端浸入生理鹽水液面以下2-3mm處,待儀表上的數(shù)值穩(wěn)定后,進(jìn)行讀數(shù)并記錄(微絲電極的測(cè)試頻率通常為1000Hz)。

電極的阻抗值是一個(gè)范圍,不同廠家選用的電極絲直徑、材質(zhì)、加工工藝都會(huì)導(dǎo)致做出的阻抗值不盡相同,因此應(yīng)以最后能夠采集到信噪比較高的信號(hào)為準(zhǔn)
 
1.4存放電極
 
急性實(shí)驗(yàn)電極可以多次使用,從動(dòng)物體內(nèi)取出后的電極放在酒精液中浸泡一段時(shí)間(硅膠材質(zhì)的電極不能使用酒精長(zhǎng)時(shí)間浸泡),用注射器抽取生理鹽水對(duì)電極絲的部位輕輕沖洗,將電極上殘留的組織清洗干凈。對(duì)于急性單電極(多通道陣列電極不適用),若尖端處沾有難以清洗的組織,可使蘸有酒精的棉球從電極尾部向尖端小心輕輕擦拭,此過(guò)程中切勿對(duì)電極絲受力或反向擦拭。最后用原包裝盒內(nèi)的海綿固定封裝存放(勿將電極絲觸碰到海綿),勿將電極存放于粉塵顆粒物較多的的環(huán)境中。
 
二、植入手術(shù)
本手術(shù)操作以大鼠(體重250-300g)為例。
 
2.1手術(shù)環(huán)境
 
手術(shù)室溫度控制在21-25℃,氣溫較低時(shí)可使用加熱裝置來(lái)保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在手術(shù)中的體溫維持在正常范圍,電熱絲加熱墊會(huì)產(chǎn)生較大干擾噪音,在采集信號(hào)時(shí)應(yīng)將其關(guān)掉。整個(gè)操作環(huán)境盡量保持無(wú)菌狀態(tài)(可在無(wú)菌操作臺(tái)中進(jìn)行)。
 
 
2.2主要實(shí)驗(yàn)器械
 
 
止血鉗、鑷子、手術(shù)剪刀(大剪刀及小剪刀)、縫合針線、手術(shù)刀柄和刀片、顱骨鉆及鉆頭(0.8mm)、螺絲刀、電動(dòng)剃、注射器等,所有的手術(shù)器械在使用前均需經(jīng)過(guò)嚴(yán)格消毒處理。

2.3主要材料及藥品試劑

無(wú)菌生理鹽水、75%醫(yī)用酒精、碘伏、酒精棉及棉簽、脫毛膏、不銹鋼微型螺絲釘(M1*2、M1*3,使用前應(yīng)使用75%酒精充分浸泡清洗),牙科水泥粉、戊巴比妥鈉溶液(1%,現(xiàn)配)、紅霉素眼膏、利多卡因膏、三聯(lián)抗生素、阿托品(1mg/mL)、地塞米松、卡洛芬等。

2.4手術(shù)操作步驟
 
2.4.1稱重
 將大小約20*20*20cm的盒子置于電子秤上,去皮,把大鼠放置在盒子內(nèi)(抓大鼠時(shí)需帶上防咬手套),讀數(shù)。

2.4.2麻醉
 麻醉對(duì)整個(gè)手術(shù)至關(guān)重要,其麻醉的穩(wěn)定性直接影響到手術(shù)結(jié)果的好壞。若要獲得更好的麻醉效果,建議使用異氟烷呼吸麻醉,但由于呼吸麻醉成本較高且麻煩,多數(shù)實(shí)驗(yàn)室還是使用注射麻醉,因此這里以注射麻醉為例。麻醉劑采用1%戊巴比妥鈉溶液(戊巴比妥鈉比水合氯醛麻醉更穩(wěn)定,但容易產(chǎn)痰,需要備吸管幫助吸出痰),劑量為0.5m/100g(50mg/Kg)。腹腔注射前先對(duì)大鼠用異氟烷短暫麻醉,具體操作:將大鼠放進(jìn)透明盒子中,此時(shí)將蘸有異氟烷的棉球丟入盒子內(nèi),密封,待大鼠安靜不動(dòng),呼吸均勻(1次/秒)時(shí)取出。腹腔注射:將大鼠仰面朝向,提起一側(cè)后肢,在大腿根與腹中線的中間位置刺入皮下,在皮下平行于腹中線推進(jìn)針頭3-5mm,再以45°角向腹腔內(nèi)刺入,針尖通過(guò)腹肌后,無(wú)阻力,回抽無(wú)回流物,緩慢注入麻藥。注射麻藥后,對(duì)大鼠進(jìn)行疼痛反射(掐尾端或后腳掌)和眼角膜反射來(lái)判斷麻醉效果。在15min之后還未能完全麻醉的大鼠可適當(dāng)補(bǔ)加0.2-0.5m的1%戊巴比妥鈉溶液。若手術(shù)時(shí)間較長(zhǎng),應(yīng)每隔1h檢查大鼠麻醉狀態(tài),當(dāng)出現(xiàn)疼痛反應(yīng)時(shí),應(yīng)補(bǔ)加05m的1%戊巴比妥鈉溶液。手術(shù)中,應(yīng)將大鼠舌頭從口的一側(cè)拉出,為防止大鼠在麻醉過(guò)程中呼吸道出現(xiàn)過(guò)多分泌物導(dǎo)致窒息,可在麻醉過(guò)程中注射0.5m阿托品(1mg/m)。
 
2.4.3去毛
用左手將麻醉后的大鼠托住,右手手持電動(dòng)剃逆著大鼠毛發(fā)的方向(從后往前)將頭頂?shù)拿l(fā)剃除,一般剃毛范圍是兩耳之間,前至兩眼間,后至頸部始端。若要達(dá)到更好的干凈度,可涂抹少量脫毛膏,使用后需要使用生理鹽水清洗掉殘余物。

2.4.4固定
大鼠固定的好壞會(huì)直接影響到手術(shù)中信號(hào)采集的穩(wěn)定性,甚至?xí)绊懙铰灾踩牒蟮男ЧJ紫葘⒁粋?cè)耳桿固定,找到大鼠耳道稍向前上方的骨性凹陷處(可以用手觸摸到),將其中一側(cè)的凹陷處貼在固定的耳桿上(提前涂抹少量利多卡因藥膏可以避免耳桿對(duì)大鼠刺激),此時(shí)將另一側(cè)耳桿也插入對(duì)應(yīng)的位置,調(diào)節(jié)兩側(cè)耳桿長(zhǎng)度,使之對(duì)稱,固定緊耳桿。左右及上下輕輕移動(dòng)大鼠的頭部,避免出現(xiàn)松動(dòng)及偏斜。在固定好大鼠耳桿后,還需將大鼠的上門齒固定。具體操作:將大鼠上門齒卡進(jìn)門齒桿的槽內(nèi),下頜處于門齒桿的下方,然后下調(diào)兩側(cè)的眼眶固定桿,壓緊并固定。適當(dāng)調(diào)整各固定點(diǎn),使得大鼠的整個(gè)顱骨面保持水平,從各個(gè)方向用力均不能移動(dòng)大鼠的頭部。最后在大鼠的眼部涂抹上紅霉素眼膏或甘油,以防止手術(shù)燈的長(zhǎng)時(shí)間照射造成眼部損傷以及保持眼睛的濕潤(rùn)。另外,要用圓頭鑷子將大鼠的舌頭從口中一側(cè)拉出,防止手術(shù)中出現(xiàn)窒息。
 
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