樂研化學薄層層析硅膠板涂層的主要成分為SiO2.nH2O，化學性質穩(wěn)定，除強堿和氫氟酸外，不與其他酸堿反應。具有分離效果好，塔板數(shù)高，點樣斑點小，分離時間短，靈敏度高，斑點清晰，不擴散等特點；適用于醫(yī)藥，化工，生化，環(huán)保等系統(tǒng)的科研和檢測；對于某些微量以及成分復雜的化合物有很好的分離效果，適用于定性和半定量分析。

經(jīng)典操作和注意事項：
1、點樣
分析板：
點樣一般為圓點（不能太大），點樣基線距底邊0.5~1.0 cm，點樣直徑為1~2 mm，點間距離約為0.5~1.0 cm，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜；

注意事項：
（1）配制樣品溶液時應選用對組分溶解度較好的溶劑；溶劑的粘度不宜過高，以便于點樣；溶劑的沸點要適中，沸點過低，樣品溶液中溶劑易揮發(fā)，會改變溶液濃度導致較大誤差。沸點過高，會使樣品溶液的溶劑殘留于原點，導致展開劑極性異常變化，最常用的溶劑為甲醇；
（2）點樣時要控制力度，避免損傷涂層表面；
（3）點樣后必須待溶劑揮發(fā)完全后，再進行展開，但要避免長時間高溫加熱，以免改變待測組分的性質。

制備板：
取一塊制備板，在距離底部2~3 cm處用鉛筆畫一條直線；取一次性滴管，在吸管口處嵌入適量脫脂棉后吸入待分離樣品溶液，沿著制備板上的基線均勻移動，然后用吹風機吹干，反復操作，直至上樣完成；將制備板置于展開缸中，硅膠面背對展缸玻璃面；展開結束后，取出、晾干，在紫外燈下面用鉛筆標出所需的色帶，用刮刀刮下，選擇大極性溶劑，浸泡攪拌1~2小時，過濾、洗滌、旋干即可。

注意事項：
（1） 待分離的樣品必須在硅膠中穩(wěn)定；且難溶性樣品不適合此方法；
（2）上樣量的計算方法：1 mm厚的硅膠板的負載量不要超過5 mg/cm3。以20*20 cm，厚度為1 mm厚硅膠板為例：若上樣帶寬是0.5 cm，板子兩邊空出0.5 cm邊際，上樣量約為0.5*19*5=47.5 mg，以此類推；
（3）基線必須保持在展開劑的液面以上，防止待分離樣品溶于展開劑；
（4）為保證溶出效率，需將刮下的硅膠碾碎。安全起見，操作者應帶口罩，在風速小的環(huán)境下進行；
（5）浸泡硅膠常用的溶劑是二氯甲烷/甲醇：20/1~10/1，注意不能超過這個比例，否則硅膠中的部分物質會被溶解；
（6）制備板展開前后，所有使用的容器都要確保干凈，盡量避免使用真空油脂；

2、展開劑
（1）化合物分離效率大小用Rf（化合物距離基線的距離除以溶劑的前沿距基線的距離）值表達，Rf值最好在0.15~0.85之間，盡量控制主要物質Rf值在0.3~0.7之間，Rf值與展開劑的相對極性有密切關系。其中常用溶劑的極性順序如下：水（最大）>甲酰胺>乙腈>甲醇>乙醇>丙醇>丙酮>二氧六環(huán)>四氫呋喃>甲乙酮>正丁醇>乙酸乙酯>乙醚>異丙醚>二氯甲烷>三氯甲烷>溴乙烷>苯>四氯化碳>二硫化碳>環(huán)己烷>己烷>煤油（最小）；
（2）展開劑的選擇：單一的溶劑往往不能達到很好的分離效果，正常使用混合溶劑即高極性與低極性組成的混合體系（不限于2種，有可能是3種以上，根據(jù)底物的性質決定），常用的溶劑組合有：石油醚/乙酸乙酯、二氯甲烷/甲醇、石油醚/丙酮、石油醚/二氯甲烷、乙酸乙酯/甲醇、乙酸乙酯/四氫呋喃、氯仿/乙酸乙酯、乙腈/水等，具體比例要結合實際情況，或參考文獻中報道的展開劑配比；
（3） 薄層層析硅膠板展開過程中部分樣品會有拖尾現(xiàn)象，主要是因為樣品具有酸或堿的化學成分，且部分在溶液中電離，展開時存在分子，離子兩種狀態(tài)，主要解決方法是：若樣品酸性比較大，一般在展開劑中加酸（0.1%~0.5%甲酸，乙酸）；若樣品堿性比較大，一般在展開劑中加堿（0.1%~0.5%氨水，三乙胺）。

3、展開室
薄層展開室需預先用展開劑飽和，可在室中加入足夠量的展開劑，并在壁上貼二條與室一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，密封室頂?shù)纳w，使系統(tǒng)平衡。將點好樣品的薄層層析硅膠板放入展開室的展開劑中，浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5~1.0cm(切勿將樣點浸入展開劑中)，密封室蓋，待展開至規(guī)定距離，取出薄層板，晾干，并進行后續(xù)的檢驗。

4、常用顯色劑及其配制方法

5、儲存與活化
薄層層析硅膠板具有很強的吸濕性，應存放于密封干燥處，請勿與易揮發(fā)性物質一起存放。拆封后未用完的硅膠板應立刻密封，以免吸潮或吸附其他化學物質而影響分離性能；若硅膠板吸潮，可活化后再使用（放置于110oC的烘箱中，烘30分鐘）

6、安全防護措施
薄層層析硅膠板的使用中需要全程帶手套，若不小心被玻璃板劃傷，可參考如下方式做緊急處理：
（1）若傷口不大不深，出血不多，傷口干凈，可用酒精消毒傷口周圍，不要將消毒液弄進傷口內，待干后用消毒紗布覆蓋包扎，或用創(chuàng)可貼粘貼；
（2）若傷口不干凈，要先用碘酒沿周圍皮膚消毒一次，再用酒精消毒兩次，然后用少量生理鹽水沖洗傷口，沖洗時用藥棉輕輕擦拭傷口，去除異物，最后再對傷口周圍的皮膚進行再一次消毒，并用紗布覆蓋包扎；
（3）若傷口較深，接觸到化合物，還須速去醫(yī)院，進行專業(yè)的醫(yī)護處理，必要時注射破傷風育苗。