計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查
1、一般要求
2、胰酪大豆胨瓊脂(TSA)
無菌性檢查:取已滅菌TSA注皿,于30-35℃培養(yǎng)3天,應(yīng)無菌落生長。
試驗(yàn)用菌種:金葡、銅綠、枯草、白念、黑曲
接種方法:
涂布法:分別接種不大于100cfu試驗(yàn)用菌懸液于TSA平板表面;
傾注法:分別接種不大于100cfu試驗(yàn)用菌懸液于無菌平皿中,傾注約15ml該培養(yǎng)基,輕輕搖勻。
適用性檢查:枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌于30-35℃培養(yǎng)不超過3天;白色念珠菌、黑曲霉于30-35℃培養(yǎng)不超過5天。
判斷標(biāo)準(zhǔn):與對照培養(yǎng)基比較,菌落平均數(shù)比值在0.5-2(50%-200%)范圍內(nèi),且菌落形態(tài)大小一致。
3、胰酪大豆胨液體(TSB)
無菌性檢查:取已滅菌的TSB,于30-35℃培養(yǎng)不少于3天,培養(yǎng)基應(yīng)澄清。
試驗(yàn)用菌種:金葡、銅綠、枯草
接種方法:
涂布法:分別接種試驗(yàn)用菌懸液于該培養(yǎng)基中,接種量不大于100cfu,搖勻,培養(yǎng)。
適用性檢查:30-35℃培養(yǎng)不超過3天。
判斷標(biāo)準(zhǔn):金葡、銅綠、枯草接種后,與對照培養(yǎng)基比較,試驗(yàn)菌生長良好。
備注:該培養(yǎng)基同時(shí)用于稀釋液的制備和控制菌檢查時(shí),需考慮同時(shí)滿足計(jì)數(shù)和控制菌檢查培養(yǎng)基適用性檢查控制要求。
4、沙氏葡萄糖瓊脂(SDA)
無菌性檢查:取已滅菌的SDA注皿,于20-25℃培養(yǎng)5天,應(yīng)無菌落生長。
試驗(yàn)用菌種:白色念珠菌、黑曲霉
接種方法:
涂布法:分別接種不大于100cfu允試驗(yàn)用菌懸液于該平板表面
傾注法:接種大于1cfu試驗(yàn)用菌懸液于無菌平皿中,傾注約15ml該培養(yǎng)基,輕輕搖勻。
適用性檢查:白色念珠菌、黑曲霉于20-25℃培養(yǎng)不大于5天
判斷標(biāo)準(zhǔn):與對照培養(yǎng)基比較菌落平均數(shù)比值在0.5-2(50%一200%)范圍且菌落大小、形態(tài)一致。
備注:如該培養(yǎng)基用于控制菌白色念珠菌的檢查時(shí),同時(shí)需要滿足捌菌項(xiàng)下培養(yǎng)基適用性檢查要求。
5、沙氏葡萄糖瓊脂+抗生素
無菌性檢查:取已滅菌的SDA注皿,于20-25℃培養(yǎng)5天,應(yīng)無菌落生長。
試驗(yàn)用菌種:
抑菌性檢查:枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌
促生長能力:白色念珠菌、黑曲霉 。
常用抗生素:
1、慶大霉素:廣譜。對G-,G+菌有較好的抗菌作用。
2、氯霉素:廣譜。對G-菌作用強(qiáng);對G+菌作用不及青霉素與四環(huán)素。
接種方法:
抑菌性:接種枯草、金葡、銅綠菌懸液不少于100cfu。
促生長能力:接種白色念珠菌、黑曲霉菌懸液不大于100cfu。
適用性檢查:
白色念珠菌、黑曲霉于20-25℃培養(yǎng)不大于5天。
與對照培養(yǎng)基比較,菌落平均數(shù)比值在0.5-2范圍內(nèi)。
判斷標(biāo)準(zhǔn):枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌不得生長。