使用CCM-300測(cè)量樣品中葉綠素含量

瀏覽次數(shù)：4211　發(fā)布日期：2018-12-26　來源：北京澳作生態(tài)儀器有限公司

——解決了非常小的葉片以及難以測(cè)定的樣品中葉綠素含量的測(cè)量

研究者通常使用化學(xué)分析法或吸收法計(jì)算葉綠素的含量。近年來，作為快速、非破壞性測(cè)量方法的吸收法得到了廣泛的應(yīng)用，但該方法仍然受到諸多的限制，尤其是對(duì)非常小的葉片，以及針葉、地衣等樣品的測(cè)定非常困難。Opti-sciences根據(jù)Gitelson等的研究結(jié)果，研制的CCM-300葉綠素測(cè)量?jī)x可很好的解決上述問題。

1、材料和方法
對(duì)三個(gè)不同的物種：山毛櫸 (Fagus sylvatica L.)，榆樹 (Ulmus minor Miller) 和地錦 (Parthenocissus tricuspidata L.) 進(jìn)行葉綠素含量和熒光的測(cè)量，研究葉片發(fā)射熒光的比率和葉綠素含量間的關(guān)系。

2、結(jié)果
2.1 不同波長(zhǎng)與不同物種葉綠素含量的關(guān)系
當(dāng)波長(zhǎng)大于735nm時(shí)，吸收光和反射光均對(duì)葉綠素含量不敏感；在700nm~710nm范圍內(nèi)吸收和反射光均對(duì)葉綠素含量敏感（圖1）。葉片對(duì)685nm波長(zhǎng)的發(fā)射熒光吸收最強(qiáng)。

圖1 不同波長(zhǎng)的紅外和近紅外光同葉綠素含量的關(guān)系，A)吸收光 B)反射光。實(shí)線表示該波長(zhǎng)下最合適的線性模型。研究中使用的激發(fā)光為430nm（Gitelson, et al., 1999）。

2.2 不同波長(zhǎng)的熒光比率與反射熒光的關(guān)系
不同波長(zhǎng)的熒光與F735的比值同葉綠素反射應(yīng)具有相近的線性關(guān)系，其中F700/F735同葉片對(duì)熒光的反射相關(guān)性最強(qiáng)（圖2）。

圖 2 發(fā)射熒光從685nm到720nm與735nm的比值（Fi/F735）同680~720nm范圍內(nèi)反射熒光（Ri）的關(guān)系；插入的圖為Fi/F735 vs. Ri對(duì)應(yīng)的決定系數(shù)。研究中使用的激發(fā)光為430nm（Gitelson, et al., 1999）。

2.3 不同物種葉綠素含量與熒光比率的關(guān)系
根據(jù)2.2的結(jié)果，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)葉綠素含量在41 mg·m-2到675 mg·m-2間時(shí)，F(xiàn)735/F700的比值與其呈顯著的線性關(guān)系（圖3）。

圖 3 A) 測(cè)量的F735/F700熒光比率與總?cè)~綠素含量間的關(guān)系；B) 使用F735/F700的比率預(yù)測(cè)的葉綠素含量與化學(xué)分析的葉綠素含量間的關(guān)系；研究中使用的激發(fā)光為430nm，結(jié)果表明葉綠含量與F735/F700間存在著如下關(guān)系：Chl=634*F735/F700-391（Gitelson, et al., 1999）。

2.4 CCM-300對(duì)葉綠素含量的測(cè)定
CCM-300使用調(diào)制光（具有15nm半峰寬的430nm二極管），在很低的光強(qiáng)水平下利用F735/F700比率進(jìn)行葉綠素測(cè)量，顯著降低了葉片對(duì)葉綠素?zé)晒獾闹匚眨岣吡藴y(cè)量精度。

3、結(jié)論
結(jié)果表明，F(xiàn)735/F700可以很好的作為葉綠素含量測(cè)量的指標(biāo)。因此，CCM-300利用該技術(shù)測(cè)量葉綠素的含量，可將Kautsky效應(yīng)將至最小。同時(shí)設(shè)備采用了調(diào)制光技術(shù)，可將背景光的影響降至最低，并具有溫度補(bǔ)償和發(fā)射熒光強(qiáng)度顯示功能，可以獲得精確可靠的測(cè)量結(jié)果。
相對(duì)于傳統(tǒng)的吸收技術(shù)，該設(shè)備提高了葉綠含量的測(cè)量范圍（41 mg·m-2到675 mg·m-2），并且不受測(cè)量室的大小、葉片厚度及均一性的限制，可對(duì)針葉、未成熟的水稻葉、生于巖石上的絲狀藻、地衣、草皮草、仙人掌、龍舌蘭屬植物、菠蘿、擬南芥、水果、苔蘚、葉莖、葉柄等的葉綠素含量。

4、參考文獻(xiàn)
Gitelson A. A., Buschmann C., Lichtenthaler H. K. The Chlorophyll Fluorescence Ratio F735/F700 as an Accurate Measure of Chlorophyll Content in Plants. Remote Sens. Enviro, 1999, 69: 296-302.

Buschmann C. Variability and application of the chlorophyll fluorescence emission ratio red/far-red of leaves. Photosynthesis Res, 2007, 92: 261-271.

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