Westernblot熒光印跡膜成像：干膜or濕膜 ？

干膜，還是濕膜成像：這是一個問題。

經(jīng)過漫長的一天實驗做熒光蛋白印跡，首先成像，以便可以看到實驗成果。 這項工作流程沒有任何問題，但這可能無法生成最佳圖像。 如果您正在進行定性實驗或具有高豐度的蛋白，那么對膜進行成像是很好的。 然而，許多研究人員已經(jīng)轉(zhuǎn)向熒光蛋白印跡法來定量分析低表達目的蛋白。

濕膜不適合成像，因為它們在成像過程中會慢慢變干，導致數(shù)據(jù)不一致。 由于濕膜的自發(fā)熒光與干膜不同，因此需要特別注意防止膜在成像過程中變干。 這意味著在成像過程添加緩沖液或?qū)⒂≯E膜放在塑料包裝中以防止干燥。 如果您曾經(jīng)對濕的印跡進行成像，您就知道在長時間曝光期間防止膜干燥是一件麻煩事。 使用熒光印跡的一大優(yōu)勢是隨時可進行成像。濕膜經(jīng)歷長時間曝光時，看到高背景并不罕見。 高背景對靈敏度產(chǎn)生負面影響，使低豐度目標的檢測更具挑戰(zhàn)性。

濕膜成像顯然是不方便的，并且不太理想，但這并不意味著您需要等待數(shù)小時才能使膜干燥。 熒光蛋白印跡后快速干燥膜的方法是將其浸入甲醇中。 所需要的是PVDF膜在100％甲醇中快速浸泡15秒。 硝酸纖維素膜不耐化學品，因此使用20％甲醇代替。 酒精會從膜的孔隙中代出水分，加速干燥，讓您更快地對印跡進行成像。 這個快速提示將立即為您提供一個完美的印跡!

熒光干膜成像提高靈敏度