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基于HTX TM-Sprayer基質(zhì)噴霧儀提升MALDI質(zhì)譜成像

瀏覽次數(shù):6004 發(fā)布日期:2018-3-5  來源:通用實驗科技
在過去幾十年中,MALDI質(zhì)譜成像技術(shù)已被廣泛應(yīng)用在生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)和藥物研發(fā)等多個領(lǐng)域。但是MALDI質(zhì)譜成像的技術(shù)操作中,要獲得高質(zhì)量、重復(fù)性好的質(zhì)譜結(jié)果,并不容易。組織樣品基質(zhì)的選擇和覆蓋十分關(guān)鍵,要盡可能的滿足組織切片上的蛋白無擴散或移位現(xiàn)象,基質(zhì)與蛋白形成良好的共結(jié)晶,并不是十分容易的事情。然而,美國HTX technologies公司研發(fā)的全自動基質(zhì)噴涂設(shè)備讓這一切變得簡單可行。

 
近期,南卡羅萊納醫(yī)科大學(xué)-細(xì)胞與分子藥理學(xué)&實驗治療學(xué)部發(fā)布了一篇基于MALDI FTMS成像技術(shù)的癌變生物標(biāo)記物N-聚糖的研究。該研究中利用了超高分辨、超高靈敏度的solariX MALDI FTMS質(zhì)譜平臺,通過對福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)組織中的N-聚糖進行質(zhì)譜成像分析,確定了N-聚糖為組織癌變生物標(biāo)志物。
 
實驗操作中,在對5µm厚的FFPE甲狀腺癌組織切片樣品進行酶處理和基質(zhì)覆蓋時均使用了HTX公司的自動噴霧儀產(chǎn)品(TM-Sprayer)來執(zhí)行,而非傳統(tǒng)的手動處理。HTX的這款TM-Sprayer基質(zhì)噴霧儀最大特點就是能夠以精準(zhǔn)模式和可調(diào)節(jié)模式對整個樣品區(qū)或部分區(qū)域進行噴涂,該研究中首先利用TM-Sprayer將濃度為0.1μg/μL的糖苷酶(PNGase F)噴涂在組織切片表面,37℃環(huán)境下孵育。隨后,選用基質(zhì)CHCA進行精確覆蓋,確保了細(xì)膩、均一穩(wěn)定的基質(zhì)涂層。后續(xù)獲得的MALDI成像結(jié)果也顯示了較高的信號強度和分辨率。
 
實驗結(jié)果
 
Figure 1. Example N-glycan signal from a single section of thyroid cancer. A Total average spectrum from the image with example glycoform structures per m/z; B Tile view of example images. Inset top right, photomicrograph of unstained tissue prior to imaging. Abbreviations: GlcNAc, N-acetylglucosamine


Figure 2. Image segmentation showing complexity of N-glycan signatures in a thyroid cancer tissuesection. A Pathologist marked H&E stain of section highlighting adjacent nontumor, anaplastic, and necrotic regions. B SCiLS image segmentation of N-glycans from 2D mapping. White asterisks markcalculated overlaps of anaplastic and necrotic regions.


Figure 3. Quantification of N-glycan signatures from regional areas on tissue. Statistical testing was donecomparing nontumor adjacent and anaplastic regions (ROC-1) or anaplastic versus necrotic (ROC-2).A Photomicrograph depicting areas selected for measuring relative abundance of N-glycan expression.B A high mannose (Man9) structure distinguishing nontumor adjacent compared to anaplastic tumor ornecrotic regions. C A biantennary N-glycan defining necrotic regions with low expression in nontumoradjacent and anaplastic. D A tetrantennary fucosylated structure with low expression in adjacent nontumor and increasing expression in anaplastic and necrotic tissues regions.

 
TM-Sprayer最大的特點就是可以為MALDI質(zhì)譜成像提供高重現(xiàn)性和高質(zhì)量數(shù)據(jù),該產(chǎn)品已被應(yīng)用在多個領(lǐng)域的MALDI成像實驗中,并有相當(dāng)數(shù)量的科研文獻提到應(yīng)用了該款產(chǎn)品獲得優(yōu)質(zhì)數(shù)據(jù)。在質(zhì)譜成像領(lǐng)域勢必將成為MALDI成像的好搭檔。
 
關(guān)于HTX公司
美國HTX科技公司一直致力于組織成像和分子成像技術(shù)的不斷發(fā)展,成像研究集中于樣品制備和 MALDI 質(zhì)譜成像領(lǐng)域。HTX成像研究方面借鑒了HTX科技公司長期以來在科學(xué)儀器領(lǐng)域的經(jīng)驗,包括生物學(xué)、設(shè)備工程、研究應(yīng)用和商業(yè)開發(fā)方面的專業(yè)經(jīng)驗。依托先進的分析平臺為樣品制備和自動化工作流程提供了一系列解決方案。
 
通用實驗科技(中國)有限公司(Labcare Scientific China Limited作為美國HTX公司在中國區(qū)的唯一授權(quán)經(jīng)銷商,全權(quán)負(fù)責(zé)HTX產(chǎn)品的售前、售后技術(shù)支持工作。如有需要請不吝聯(lián)絡(luò)我們設(shè)在中國的業(yè)務(wù)部門和售后服務(wù)中心,聯(lián)系電話:400 821 3360。
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