植物組織可溶性胞漿蛋白粗提制備試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）
主要用途
YIJI植物組織可溶性胞漿蛋白粗提制備試劑是一種旨在使用物理和化學(xué)方法快速充分裂解組織，并在蛋白酶抑制混合劑的幫助下，然后通過差速離心，收集所有細(xì)胞漿內(nèi)可溶性蛋白質(zhì)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種新鮮植物組織，包括葉片（leaf）、谷粒（grain）、種子（seed）等樣品。可直接用于后續(xù)一維或二維蛋白電泳（SDS-PAGE）、西方雜交（Westernblotting）、親和層析純化（affinity chromotagraphy）、免疫沉淀（immunoprecipitation）、酶活性分析（enzymatic activity analysis）、蛋白質(zhì)相互作用分析（protein-protein interaction）、特異性表達(dá)識別（specific expression identification）和質(zhì)譜分析等。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，操作便捷，收集效果好。
技術(shù)背景
通過特殊裂解液和蛋白酶抑制混合劑可以防止裂解后細(xì)胞核內(nèi)各種活性蛋白成分遭到活化的內(nèi)源性蛋白酶
的破壞，充分保留細(xì)胞核內(nèi)蛋白質(zhì)的免疫和生物學(xué)活性。
產(chǎn)品內(nèi)容
YIJI清理液（Reagent A） 毫升
YIJI裂解液（Reagent B） 毫升
YIJI活性液（Reagent C） 微升
產(chǎn)品說明書 1 份
保存方式
保存YIJI清理液（Reagent A）在 4℃冰箱里，其余的保存在－20℃冰箱里，有效保證 6 月
用戶自備
液氮管：用于組織凍存處理
15 毫升錐形離心管：用于組織收集后離心
1.5 毫升離心管：用于樣品操作
60 微米尼龍網(wǎng)（NYLON MESH）：用于去除植物組織殘?jiān)?/P>
4℃臺式離心機(jī)：用于組織收集和去除雜質(zhì)
4℃微型臺式離心機(jī)：用于收集蛋白
DOUNCE 勻漿器：用于組織裂解
實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒里的試劑從－20℃的冰箱里取出，放進(jìn)冰槽里凍融。然后進(jìn)行下列操作。
1. 準(zhǔn)備好植物組織，例如葉片、種子等，并秤重 200 毫克
2. （選擇步驟）放進(jìn)預(yù)冷的 15 毫升錐形離心管
3. （選擇步驟）加入 xx 毫升 YIJI清理液（Reagent A）清洗
4. （選擇步驟）抽去清理液
5. 移入到一個液氮凍存管
6. 即刻放進(jìn)液氮罐過夜
7. 次日從液氮罐里取出，即刻（最快速度）用研磨棒碾碎組織成粉末狀（注意：切莫使組織凍融）
8. 放進(jìn)一個新的預(yù)冷的 15 毫升錐形離心管
9. 加入 xx 毫升預(yù)冷的 YIJI裂解液（Reagent B）
10. 加入 xx 微升 YIJI活性液（Reagent D）
11. 強(qiáng)力渦旋震蕩 30 秒，充分混勻
12. 即刻放進(jìn)預(yù)冷的 DOUNCE 勻漿器，在冰槽里用勻漿棒勻化組織（約 80 下）
13. 將所有組織勻漿物放在 60 微米尼龍網(wǎng)（NYLON MESH）上過濾——此步驟去除組織殘?jiān)?/P>
14. 小心移取去渣液到新的 1.5 毫升離心管
15. 即刻放進(jìn) 4℃微型臺式離心機(jī)離心 5 分鐘，速度為 3000g
16. 小心移取上清液到新的 1.5 毫升離心管
17. （選擇步驟）即刻放進(jìn) 4℃微型臺式離心機(jī)離心 5 分鐘，速度為 20000g
18. （選擇步驟）小心移取上清液到新的 1.5 毫升離心管——此步驟為初級胞漿蛋白
19. 即刻放進(jìn) 4℃微型臺式離心機(jī)離心 5 分鐘，速度為 100000g
20. 小心移取上清液到新的 1.5 毫升離心管——此步驟為純化胞漿蛋白
21. 移取 10 微升進(jìn)行蛋白定量檢測（建議使用 YIJIBradford 蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－YJ30030.1）
22. 放進(jìn)－70℃的冰箱里備用
23. 或放進(jìn)冰槽里，繼續(xù)后續(xù)操作
注意事項(xiàng)
1． 本產(chǎn)品為 20 次操作
2． 所有操作均須在 4℃狀態(tài)下進(jìn)行
3． 操作時須戴手套
4． 建議一次操作的組織重量在 10 至 250 毫克
5． 建議使用新鮮或冰凍保護(hù)良好的植物組織
6． 如果組織含有高濃度的多糖和多酚，建議使用 YIJI多糖/多酚植物組織蛋白制備預(yù)處理試劑盒－
YJ30089
7． 碾碎組織步驟：可以將液氮處理的組織放進(jìn) 15 毫升錐形離心管，然后用針筒擠壓塞研磨
8． 1 克組織通常可以獲得 20 毫克可溶性胞漿蛋白
9． 如果放在－70℃冰箱里儲存?zhèn)溆�，避免反�?fù)凍融
10．本公司提供系列植物組織細(xì)胞分析試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無蛋白酶污染
