主要用途
YIJI蛋白樣品沉淀法去內毒素試劑是一種旨在通過特殊多肽化合物溶液結合脂多糖類物質,達到清除
蛋白樣品中混雜的內毒素分子的權威而經典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明
的。其適用于各種重組蛋白制備樣品以及血清樣品的純化。產物可用于各種后續(xù)動物和細胞生物學操作。
產品即到即用,性能穩(wěn)定,操作方便,清除效率高。
技術背景
內毒素(Endotoxin)是一種脂多糖(Lipopolysaccharides;LPS),革蘭氏陰性細菌細胞膜的組成成分。在
重組蛋白純化過程中,細菌裂解釋放出內毒素,伴隨著目標蛋白,嚴重干擾后續(xù)實驗。YIJI去內毒素
技術采用了高度電荷性的兩性環(huán)脂肽化合物(amphiphilic cyclic peptidolipid)溶液,通過特異性結合脂多糖
分子的脂質A 區(qū)域(lipid A region),產生復合物,中和內毒素,充分有效地清除樣品中高濃度內毒素(4000
至 40000 EU/毫升)和其它親脂性物質,高達99%以上效率。
產品內容
YIJI去毒液(Reagent A) 毫升
產品說明書 1 份
保存方式
保存在-20℃冰箱里,避免反復凍融,有效保證6 月
用戶自備
1.5 毫升離心管:用于樣品操作的容器
微型臺式離心機:用于沉淀分層
渦旋震蕩儀:用于混勻反應物
恒溫水槽:用于孵育反應物
平式搖蕩儀:用于混勻反應物
實驗步驟
1. 從-70℃冰箱里取出蛋白樣品,置于冰槽里融化
2. 移取1 毫升蛋白樣品(1 至5 毫克蛋白總量)到1.5 毫升離心管
3. 加入 微升YIJI去毒液(Reagent A)
4. 渦旋震蕩15 秒
5. 在 4℃條件下,置于平式搖蕩儀上孵育2 小時,速度為50RPM
6. 放進微型臺式離心機離心10 分鐘,速度為1000g(或3500RPM,例如EPPENDORF 5415)
1
7. 小心移取上清液到新的1.5 毫升離心管
8. 保存在-70℃冰箱里備用或即刻進行后續(xù)實驗
注意事項
1. 本產品為20 次操作
2. 操作時,須戴手套
3. 使用時,避免污染母液
4. YIJI去毒液(Reagent A)避免反復凍融
5. 不同樣品容量的操作,建議相應調整試劑用量:樣品容量與試劑用量之比為10:1
6. 如果樣品中內毒素含量過高,建議重復操作
7. 血清樣品采用相同操作步驟,但須無菌操作
8. 100 毫升菌液的平均內毒素含量可高達15000 EU(30 微克),介于5000 至50000 EU
9. 去內毒素程度取決于樣品中內毒素含量和樣品性質(細菌來源、融合蛋白特性),可以通過多次處理,
達到徹底清除的效果;如果效果不甚理想,建議使用本公司的其它相關產品
10. 經過本產品處理后的產物內毒素含量可低于0.03EU/毫升
11. 本公司提供系列內毒素處理試劑產品
質量標準
1. 本產品經鑒定性能穩(wěn)定
2. 本產品經鑒定去內毒素程度高