測(cè)試過(guò)程步驟
一、采樣
注:血漿或血清是最能體現(xiàn)人體總的氧化和抗氧化物質(zhì),建議采用血漿或血清作為檢測(cè)樣本
1.血漿樣品用于ORP分析可以是肝素化血漿或血清(或鋰鈉)!嗡鼗獫{收集:肝素化血漿可以獲得從全血收集在鈉或lithium-heparinized真空采血管,血液采集管(即“綠色上衣”)使用標(biāo)準(zhǔn)的靜脈穿刺方法。血液采集管必須在1000 Xg,離心機(jī)10分鐘。頂層(血漿)適用于ORP分析。
2.血清收集:血清可以從收集的全血凝塊獲得激活真空采血管血液采集管(即“紅頂”)使用標(biāo)準(zhǔn)的靜脈穿刺方法,血液凝固后實(shí)現(xiàn)(~30到60分鐘),血液收集管必須離心機(jī)在轉(zhuǎn)速1000 Xg,離心時(shí)間 10分鐘。unclotted,頂級(jí)血液層(即血清)是適用于ORP分析。
備注:轉(zhuǎn)速有離心力(×g)和每分鐘轉(zhuǎn)速(rpm)兩種表示方式,現(xiàn)高檔離心機(jī)設(shè)置有rpm和xg顯示,但多數(shù)普通離心機(jī)沒(méi)有自動(dòng)切換功能。需要用下面的公式進(jìn)行換算:
g=r×11.18×10-6×rpm2
(式中r 為有效離心半徑,即從離心機(jī)軸心到離心管桶底的長(zhǎng)度單位為厘米。)
例如: 轉(zhuǎn)速為3000rpm,有效離心半徑為10 cm,則離心力為
=10×11.18×10-6×30002=1006.2(×g)。
二、準(zhǔn)備工作
1.將檢測(cè)儀放置于平整的桌面準(zhǔn)備血漿或血清,樣品要密封,不要暴露空氣中,樣品量20-40微升。
2.準(zhǔn)備移液器和吸頭,移液器的量程為10-100微升(參考),如圖
3.準(zhǔn)備好檢測(cè)芯片,撕開(kāi)芯片外包裝,把芯片從包裝紙取出,有樣品槽的一面朝上。注:目前芯片為黑色.
三、檢測(cè)樣品
1.開(kāi)機(jī),手指按住電源開(kāi)關(guān)(如圖),指示燈為綠色即表示已開(kāi)機(jī)。
2.開(kāi)機(jī)后,顯示屏?xí)霈F(xiàn)“Insert Sensor”文字,提示可以將芯片傳感器插入卡槽里面;芯片傳感器插進(jìn)卡槽里面,顯示屏?xí)@示文字“Timeout in 2:00”意思是說(shuō)加樣時(shí)間倒計(jì)時(shí)為2分鐘,需要在2分鐘內(nèi)加樣到芯片傳感器上。
3.加樣到芯片傳感器的樣品槽,樣品槽具有海綿吸樣功能,樣品通過(guò)芯片內(nèi)部微型管路到達(dá)參比電極,以便進(jìn)行氧化還原反應(yīng)的檢測(cè)處理過(guò)程。
4.樣品檢測(cè)處理過(guò)程的時(shí)間為4分鐘,顯示屏的菜單以4分鐘倒計(jì)時(shí)(圖1);4分鐘后結(jié)果便出現(xiàn)(圖2),Static ORP(氧化應(yīng)激自由基平衡值)和Capacity ORP(抗氧化儲(chǔ)備容量值)
四分鐘后結(jié)果便出現(xiàn)(如圖),Static ORP(氧化應(yīng)激自由基平衡值)和Capacity ORP(抗氧化儲(chǔ)備容量值)