針對膀胱癌的研究少不了細(xì)胞和動物模型的加持。怎么選擇這些工具能夠幫助我們更好的進行研究,獲得陽性數(shù)據(jù),發(fā)表論文,申請基金,登上人生巔峰,你有了解嗎?今天就給大家聊一聊膀胱癌研究中,體內(nèi)外模型的選擇,以及病毒工具的應(yīng)用。且聽在下慢慢道來。
一、我需要哪種細(xì)胞模型?是否易于操作?
俗話說,實驗要想做好,細(xì)胞必不可少。細(xì)胞模型有三個優(yōu)點:周期短,背景干凈,易出結(jié)果,所以一般都作為所有研究的第一步。膀胱癌中,移行細(xì)胞癌約占患者總數(shù)的90%以上,因此也是基礎(chǔ)研究的重點。下面總結(jié)了一些常用膀胱癌細(xì)胞的特性:
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二、細(xì)胞實驗效果不錯,那動物實驗怎么做?
做完體外的細(xì)胞實驗,要想發(fā)高分文章,必須要有體內(nèi)部分的數(shù)據(jù)來證明。膀胱癌研究中,最常用的動物模型當(dāng)屬皮下移植瘤模型,該模型操作簡單、成瘤率較高,已廣泛應(yīng)用于腫瘤基礎(chǔ)性研究和抗腫瘤藥物研發(fā)中。另外,原位模型因為其在膀胱上直接成瘤,能夠較好地再現(xiàn)人膀胱癌疾病,也在臨床研究上發(fā)揮日益重要的作用。
原位膀胱癌模型的建立方法有兩種:誘導(dǎo)法、腫瘤細(xì)胞移植法。誘導(dǎo)法由于時間跨度過大,限制了其發(fā)展應(yīng)用,目前實驗中多采用腫瘤細(xì)胞移植法。今天給大家介紹的是通過手術(shù)方法將癌細(xì)胞直接注入小鼠膀胱建立原位移植瘤動物模型,如以下文獻:
三、體內(nèi)外模型選好了,那么我的實驗需要使用哪種方法對基因進行操作呢?
由于細(xì)胞和動物模型的不同特點,常常導(dǎo)致基因操作的難易程度不一樣。慢病毒是一種非常高效的基因操作工具,不僅在細(xì)胞系中具有高效的表現(xiàn),在做體內(nèi)實驗的時候,也會經(jīng)常使用,比如原位組織注射研究基因的功能。下面我們就來看一看,如何選擇合適的慢病毒載體對基因進行操作吧~
啟動子、熒光標(biāo)記、抗性標(biāo)簽是我們選擇載體需要考慮的三大要素。實驗不同,這些元件也需要相應(yīng)變化。對于膀胱癌研究來說,UPII是較為常用的組織特異性啟動子。按例祭出神圖一張,定制你的專屬載體,就是這么簡單!
上海吉凱基因化學(xué)技術(shù)有限公司成立于2002年,擁有BSL-2級別的慢病毒包裝實驗室。病毒生產(chǎn)線通過ISO9001質(zhì)量管理體系驗證,月均定制基因病毒產(chǎn)品包裝超過1000次。慢病毒生產(chǎn)采用6項QC檢測、病毒純度分級純化以及病毒滴度絕對定量檢測確保病毒質(zhì)量。
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參 考 文 獻
【1】Zhi Yuwang et al. “Evaluation of thymosin4 in the regulation of epithelial-mesenchymal transformation in urothelial carcinoma." Urologic Oncology 30 (2012): 167-176.
【2】Wang, Jia-bin, et al. “Long non-coding RNA LOC572558 inhibits bladder cancer cell proliferation and tumor growth by regulating the AKT–MDM2–p53signaling axis.” Cancer Letters 380 (2016): 369-374.
【3】Zhao Fengjin et al. “Knockdown of a novel lincRNA AATBC suppresses proliferation and induces apoptosis in bladder cancer.” Oncotarget 6.2 (2014): 1064-1078.
【4】Zhang, Qi, et al. "MiR-193a-5p Targets the Coding Region of AP-2α mRNA and Induces Cisplatin Resistance in Bladder Cancers." Journal of Cancer 7 (2016): 1740-1746.
【5】Heng Li et al. “Cisplatin-induced epigenetic activation of miR-34a sensitizes bladder cancer cells to chemotherapy.” Molecular Cancer. 13.8 (2014): 1-11.
【6】 Uchino, Keita, et al. "Therapeutic effects of microRNA-582-5p and-3p on the inhibition of bladder cancer progression." Molecular Therapy 21.3 (2013): 610-619.
之前幾期給大家分享了幾種大癌種的體內(nèi)外模型和工具總結(jié),想再看看的,請戳下面:
長按加關(guān)注