膠質(zhì)瘤是最常見的原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤,約占中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的40-60%。 惡性膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的頑疾之一,有著預(yù)后差、復(fù)發(fā)率高等特點(diǎn),現(xiàn)有的治療方法如手術(shù)、放療和化療效果均不滿意。近年來隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,腫瘤的基因治療已成為當(dāng)前神經(jīng)外科領(lǐng)域的熱點(diǎn)課題。子曰:“工欲善其事,必先利其器!毕胱龊媚X膠質(zhì)瘤的研究,疾病模型和基因操作工具不可或缺。So,想“蹭熱點(diǎn)” 的各位“筒子們”趕緊瞪大乃們的眼珠子看過來了,以下內(nèi)容可助你上天和神州十一號肩并肩。
一、我需要哪種細(xì)胞模型?是否易于操作?
俗話說,實(shí)驗(yàn)要想做好,細(xì)胞必不可少。細(xì)胞模型有三個(gè)優(yōu)點(diǎn):周期短,背景干凈,易出結(jié)果,所以一般都作為所有研究的第一步。由于細(xì)胞的不同特點(diǎn),常常導(dǎo)致基因操作的難易程度不一樣。慢病毒是一種非常高效的基因操作工具,不僅在細(xì)胞系中具有高效的表現(xiàn),在做體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,也會(huì)經(jīng)常使用。那么腦膠質(zhì)瘤中,有哪些易于操作的細(xì)胞模型可供選擇呢?下表對一些常用的細(xì)胞系做了一個(gè)總結(jié),每株細(xì)胞都配有吉?jiǎng)P獨(dú)家的預(yù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)哦~
二、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)效果不錯(cuò),那動(dòng)物實(shí)驗(yàn)怎么做?
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)做完,想發(fā)高分文章?沒有體內(nèi)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的證實(shí)怎么行!腦膠質(zhì)瘤研究中,增殖方向常用的體內(nèi)模型為裸鼠皮下成瘤和原位成瘤。
另外,也可通過轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的方式構(gòu)建自發(fā)性腦膠質(zhì)瘤模型。但轉(zhuǎn)基因動(dòng)物成本高、周期長,使用具有很大的局限性。今天就給大家介紹的一個(gè)厲害的:直接向Cre模型鼠腦部特定區(qū)域注射含有l(wèi)oxP位點(diǎn)的原癌基因慢病毒,激活內(nèi)源性信號通路后導(dǎo)致腫瘤形成。
三、體內(nèi)外模型選好了,那么我的實(shí)驗(yàn)需要使用哪種慢病毒載體對基因進(jìn)行操作呢?
問:把基因功能做好,一共分幾步?
答:三步!選模型-基因操作-看表型。
因此,選好模型后,下面需要選擇合適的基因操作載體。啟動(dòng)子、熒光標(biāo)記、抗性標(biāo)簽是我們選擇載體需要考慮的三大要素。實(shí)驗(yàn)不同,這些元件也需要相應(yīng)變化。對于腦膠質(zhì)瘤研究來說,GFAP啟動(dòng)子可作為組織特異性啟動(dòng)子使用。按照慣例,祭出神圖一張,馬上定制你的專屬載體,進(jìn)行表型的觀察。獲得高分SCI、國自然基金,走上人生巔峰,指日可待!
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之前幾期給大家分享了幾種大癌種的體內(nèi)外模型和工具總結(jié),想再看看的,請戳下面:
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