肺癌研究中慢病毒工具在體內(nèi)外模型中的應(yīng)用
作為世界范圍內(nèi)第一大常見腫瘤，肺癌也是臨床科學(xué)研究的一大熱門領(lǐng)域。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，肺癌相關(guān)的國自然項(xiàng)目接近腫瘤項(xiàng)目總數(shù)的10%，每年發(fā)表SCI文章逾萬篇。縱觀這些標(biāo)書和文章，最經(jīng)典的思路就是研究某個(gè)抑癌基因的失活或者原癌基因的激活了。那么問題來了，如何根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，對目的基因進(jìn)行有效的操作呢？ 古人云“工欲善其事，必先利其器”。對于這些操作工具的了解，其實(shí)也不可小視。
今天就給大家分享肺癌研究中，慢病毒工具的應(yīng)用，14年的經(jīng)驗(yàn)積累傾囊送出，包括吉?jiǎng)P獨(dú)家的預(yù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)哦~一目了然有木有？
慢病毒是一種實(shí)現(xiàn)高效體外體內(nèi)細(xì)胞感染的工具。慢病毒能夠?qū)⑼庠椿蛘先胨拗骷?xì)胞的基因組，使其隨細(xì)胞增殖穩(wěn)定表達(dá)，并且對分裂期和非分裂期的細(xì)胞均有較高感染能力，加之其安全性高、毒性低的特點(diǎn) , 慢病毒已經(jīng)成為現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究中一種廣泛應(yīng)用的基因傳遞工具。
一、我的實(shí)驗(yàn)需要哪種慢病毒載體？
啟動(dòng)子、熒光標(biāo)記、抗性標(biāo)簽是我們選擇載體需要考慮的三大要素。實(shí)驗(yàn)不同，這些元件也需要相應(yīng)變化。下圖幫大家梳理了常用載體的選擇方案，看一看，是否清晰了呢？
二、我需要哪種細(xì)胞模型？慢病毒感染效果如何？
做肺癌研究的筒子可不用擔(dān)心沒好用的工具細(xì)胞，這里有各種腺癌、鱗癌、大/小細(xì)胞及其他肺癌的常用細(xì)胞系，再也不怕用錯(cuò)細(xì)胞啦！每株細(xì)胞都配有吉?jiǎng)P獨(dú)家的預(yù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和吉?jiǎng)P病毒發(fā)表的參考文獻(xiàn)，快來瞅瞅吧～
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三、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)效果不錯(cuò)，那動(dòng)物實(shí)驗(yàn)怎么做？
肺癌研究中動(dòng)物實(shí)驗(yàn)主要分為兩種類型：I成瘤實(shí)驗(yàn)；II 病毒直接注射動(dòng)物。
Ⅰ.成瘤實(shí)驗(yàn)的操作較為常規(guī)，先在體外使用病毒感染細(xì)胞，再將感染好的細(xì)胞注射入動(dòng)物體內(nèi)成瘤。接種手法根據(jù)接種部位的不同而不同，肺癌中用到最多的還是皮下和原位兩種。
*注：原位成瘤時(shí)，若不剖開體表成像，推薦使用luciferase。
Ⅱ.病毒直接注射動(dòng)物。大家注意了，因是活體注射，能夠注射入動(dòng)物體內(nèi)的病毒體積有限，此類實(shí)驗(yàn)對病毒質(zhì)量要求更高。所用的病毒需經(jīng)過特殊純化處理，確保滴度高，毒性小，不易引起炎癥反應(yīng)。此處以瘤內(nèi)注射為例。
上海吉?jiǎng)P基因化學(xué)技術(shù)有限公司成立于2002年，擁有BSL-2級別的慢病毒包裝實(shí)驗(yàn)室。病毒生產(chǎn)線通過ISO9001質(zhì)量管理體系驗(yàn)證，月均定制基因病毒產(chǎn)品包裝超過1000次。慢病毒生產(chǎn)采用6項(xiàng)QC檢測、病毒純度分級純化以及病毒滴度絕對定量檢測確保病毒質(zhì)量。
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四、參考文獻(xiàn)
【1】 He D, Wang J, Zhang C, et al. Down-regulation of miR-675-5p contributes to tumor progression and development by targeting pro-tumorigenic GPR55 in non-small cell lung cancer[J]. Molecular cancer, 2015, 14(1): 1.
【2】 Li J, Li X, Ren S, et al. miR-200c overexpression is associated with better efficacy of EGFR-TKIs in non-small cell lung cancer patients with EGFR wild-type[J]. Oncotarget, 2014, 5(17): 7902.
【3】 Fu Q F, Liu Y, Fan Y, et al. Alpha-enolase promotes cell glycolysis, growth, migration, and invasion in non-small cell lung cancer through FAK-mediated PI3K/AKT pathway[J]. Journal of hematology & oncology, 2015, 8(1): 1.
【4】Chen B, Zhang W, Gao J, et al. Downregulation of ribosomal protein S6 inhibits the growth of non-small cell lung cancer by inducing cell cycle arrest, rather than apoptosis[J]. Cancer letters, 2014, 354(2): 378-389.
【5】 Zeng J, Liu D, Qiu Z, et al. GSK3β overexpression indicates poor prognosis and its inhibition reduces cell proliferation and survival of non-small cell lung cancer cells[J]. PloS one, 2014, 9(3): e91231.
【6】 Ni Z, Tao K, Chen G, et al. CLPTM1L is overexpressed in lung cancer and associated with apoptosis[J]. PloS one, 2012, 7(12): e52598.
【7】 Zhang S, Liu L, Wang R, et al. MicroRNA-217 promotes angiogenesis of human cytomegalovirus-infected endothelial cells through downregulation of SIRT1 and FOXO3A[J]. PloS one, 2013, 8(12): e83620.
【8】 Qi W, Chen J, Cheng X, et al. Targeting the Wnt‐Regulatory Protein CTNNBIP1 by microRNA‐214 Enhances the Stemness and Self‐Renewal of Cancer Stem‐Like Cells in Lung Adenocarcinomas[J]. Stem Cells, 2015, 33(12): 3423-3436.
【9】 魏淑珍, 孫宇, 楊志堅(jiān), 等. EGFP標(biāo)記的人肺癌裸鼠原位移植模型的建立[J]. 中國肺癌雜志, 2010 (7): 670-675.
【10】周菁, 徐瑜, 張明慧, 等. 瘤內(nèi)注射慢病毒載體介導(dǎo)的 Bmi1-shRNA 對 A549 皮下移植瘤的抑制作用[J]. 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào), 2010, 32(20): 2177-2180.
長按加關(guān)注
