病毒包裝技術1——病毒與非病毒載體介紹
基于轉化醫(yī)學的研究理念，銳賽知道，每一項臨床疾病的致病源頭或表象最初都是由個體體內某個基因的突變導致了。所以每一項臨床疾病的研究，整體課題項目開展的最初源頭也必須從一個基因開始。
銳賽在多年的轉化醫(yī)學研究中，在于各個臨床醫(yī)師的整體項目合作中，探討得出的不僅是轉化醫(yī)學臨床研究課題的整體思路，一般實驗方向，更有各個環(huán)節(jié)單項具體實驗的操作紀要。
現(xiàn)將整體實驗的一般實驗方案，各單項技術的實驗方法在此分享給大家，不僅是為了大家實驗室的需要更是為了進一步提高轉化醫(yī)學的效率，為病患之需而行。
對于整體項目的一般實驗思路：
基因-基因化學合成/調取-載體構建-病毒包裝-穩(wěn)轉株構建-細胞功能實驗-動物實驗/臨床樣本分析-數(shù)據(jù)分析統(tǒng)計，研究
病毒包裝技術1——病毒與非病毒載體
病毒載體的優(yōu)勢
特點
病毒載體來源于對病毒基因組進行操作和改造，消除致病性基因，保留其感染活性，使之成為具有生物活性的基因載體。使它攜帶上外源基因并被包裝成病毒顆粒就構成了基因導入系統(tǒng) （gene delivery system）。
由于病毒的多樣性及與機體復雜的依存關系，人們至今對許多病毒的生活周期、分子生物學、與疾病發(fā)生及發(fā)展的關系等的認識還很不全面，對其進行改造在技術上有很大的局限，使不是所有病毒種類都能被改造、消除其致病性用于人體。近20年，幾種病毒如反轉錄病毒（包括HIV 病毒）、腺病毒、腺病毒伴隨病毒、皰疹病毒（包括單純皰疹病毒、痘苗病毒及EB病毒）被成功地改造成為基因轉移載體并開展了不同程度的應用。但是分子病毒學和生物技術手段的發(fā)展將反向遺傳學方法應用到病毒載體構建，使如RNA病毒如Sindbis病毒、流感病毒、仙臺病毒等被成功地改造成病毒載體。
用于基因導入并能在臨床開展研究的病毒載體一般特點有
（1）攜帶外源基因并能包裝成病毒顆粒；
（2）能感染目的細胞并介導基因表達；
（3）對人體不致病并不能在一般環(huán)境中傳播、增殖。
非病毒載體
非病毒載體包括質粒DNA、反義寡核苷酸、Ribozyme、siRNA 等。常用與組成非病毒載體導入系統(tǒng)的物質包括脂類、多糖、多肽或蛋白質、多聚組氨酸或多聚賴氨酸、多價陽離子化合物、類固醇等。用這些物質不同的組合和配比來構建能包裹于載體DNA或其它核酸物質，這類“人工外殼”能模擬細胞膜的結構成分構成脂質體骨架。常見的成分有脂質體、殼聚糖、多價陽離子聚合物如PEI、多聚賴氨酸或組氨酸、多聚陽離子化合物。同時加上靶向性多肽、毒來源的多肽、細胞膜融合、流感病毒HA蛋白的一個肽段能幫助載體靶向導入、融合、從內吞體中釋放等功能。但是目前非病毒載體導入系統(tǒng)在轉導效率、顆粒均一性、穩(wěn)定性等方面仍不理想，因此限制了其進一步發(fā)展的空間。
持續(xù)發(fā)布中......
