垂直轉(zhuǎn)子的特點(diǎn):
1、分離時間短。這是由于垂直轉(zhuǎn)子樣品區(qū)帶移動的徑向距離短,可以獲得最小的K值。
2、受管壁效應(yīng)的影響最小。
3、能夠離心較大體積的樣品。
4、分辨率高。由于離心過程中樣品區(qū)帶是沿離心管的長度鋪開,轉(zhuǎn)子降速過程中梯度重新定向,使區(qū)帶間距增大。
5、提供最大的離心力。離心管所插的位置靠近轉(zhuǎn)子的外邊緣,其最小相對離心力比相同直徑的水平轉(zhuǎn)子和角轉(zhuǎn)子都大。
6、梯度容量大。垂直轉(zhuǎn)子梯度的橫截面積大,在梯度上鋪放大量樣品是可行的。
(1)梯度介質(zhì)應(yīng)該是惰性的,至少對被分離顆粒沒有毒性。
(2)梯度介質(zhì)要能夠把懸浮液中的顆粒定量的分離出來,即要求用它所配置的梯度柱要有確定的密度范圍。
(3)應(yīng)知道梯度介質(zhì)的理化特性,能夠利用這些特性中的一種或多種特性(如折射率)精確測定梯度介質(zhì)的濃度。
(4)在給定的密度范圍內(nèi),梯度介質(zhì)對滲透壓敏感的顆粒應(yīng)該是等滲的。
(5) 在給定的密度范圍內(nèi),梯度介質(zhì)的粘度應(yīng)盡可能低。
(6) 梯度介質(zhì)應(yīng)能調(diào)到與被分離顆粒生理狀態(tài)一致的PH值和離子強(qiáng)度,并且不管介質(zhì)濃度如何變化,PH值和離子強(qiáng)度都保持不變,也不會發(fā)生水合作用。
(7)梯度介質(zhì)不會干擾分級分離時樣品區(qū)帶的監(jiān)測。
(8)梯度介質(zhì)應(yīng)該很方便的從分離的顆粒中除去,并且不損失樣品的活性。
(9)能夠消毒,并且分離特性不變,不腐蝕所用的離心管、轉(zhuǎn)子和各種量器。
(10)所用的梯度材料應(yīng)該是純的物質(zhì),價格便宜,貴重材料使用后便于回收再利用。
上述特點(diǎn)是對理想梯度介質(zhì)的嚴(yán)格要求,沒有一種材料能夠全部滿足這些標(biāo)準(zhǔn)。在速率區(qū)帶分離中,蔗糖能夠滿足大多數(shù)顆粒分離的要求,是一種相對理想的介質(zhì)。然而在等密度區(qū)帶分離中,沒有一種介質(zhì)能夠滿足所有類型生物樣品的分離,因此,分離不同類型生物樣品要使用大范圍的梯度介質(zhì)。