冷凍超薄切片原理和使用
冷凍超薄切片技術是一種為了研究更接近于生物生活狀態(tài)結構和功能而發(fā)展起來的電鏡樣品制備技術。它是把樣品進行冷凍固定后，進行超薄切片，省去了經典超薄切片法的長時間的固定、脫水和也埋等處理。樣勵在切片前后，不經過強烈的化學處理，約胞結構能得到很好的保存；尤其是可溶性成分小會被抽提，使得電鏡圖像更接近于生物的生活狀態(tài)�？捎糜诩毎庖呋瘜W、可溶性成分自顯影、尤其在X射線微區(qū)成分分析等研究中。冷凍超薄切片機操作：在超薄切片機上加上高壓冷凍儀冷凍附件就可進行。冷凍超薄切片的制備程序可為兩類：
2.固定樣品制備法：包括取材、醛類闌定、樣品包埋或不包埋、冷凍保護處IR、快速冷凍切片、染包及鏡檢等步驟。適用于進行形態(tài)學、細胞化學和免疫細胞化學研究。
用戶經培訓后取得資格可自行使用超薄切片機，使用步驟如下：
1）開機
2）檢查是否處于切片模式，檢查頂光底光是否亮度正常；
3）將包埋塊放入適當夾頭并用六角扳手旋緊，以固定包埋塊；（然后將夾頭安裝在修快臺進行修快）；
4）將夾頭放入機械臂，并用手旋好螺絲上緊夾頭（不可用六角扳手）；
5）將玻璃刀/鉆石刀安裝在刀臺上，用手旋好螺絲以固定刀，并注意檢查刀臺是否固定于底座上；
6）檢查刀間隙角，調整刀臺角，選擇適當的夾頭角度等；
7）設定切片窗口（上下范圍）；
8）對刀；
9）選擇所用切片速度和厚度；
10） 在刀槽內注水，注意水面平整；
11） 切片、撈片；
12） 關機、清理切片機，拿走個人物品，保持切片臺面整潔；
13） 登記使用記錄。
