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                                當(dāng)前位置 > 首頁 > 技術(shù)文章 > 鼎昊源全自動(dòng)轉(zhuǎn)印儀Blotstainer在蛋白免疫印跡上的應(yīng)用

                                鼎昊源全自動(dòng)轉(zhuǎn)印儀Blotstainer在蛋白免疫印跡上的應(yīng)用

                                瀏覽次數(shù):2603 發(fā)布日期:2013-9-27  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
                                由于蛋白免疫印跡的步驟操作較為繁瑣,要求精度較高,實(shí)驗(yàn)中一步出現(xiàn)操作失誤就會(huì)導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)的白白浪費(fèi)。并且一抗二抗試劑也比較寶貴,所以采用儀器操作可以降低實(shí)驗(yàn)的風(fēng)險(xiǎn),保證實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。
                                 
                                鼎昊源推出的全自動(dòng)轉(zhuǎn)印儀就是替代人工操作的好選擇,它配有自動(dòng)移液系統(tǒng),溫控系統(tǒng)和孵育搖床。自動(dòng)移液系統(tǒng)包括10個(gè)管路,相互獨(dú)立,避免交叉感染。溫控系統(tǒng)范圍在4℃到80℃之間,滿足蛋白免疫印跡,核酸分子雜交實(shí)驗(yàn)的孵育溫度。整套系統(tǒng)根據(jù)客戶自定義的操作程序自動(dòng)完成。為了方便客戶使用,全自動(dòng)轉(zhuǎn)印儀出廠預(yù)設(shè)了免疫印跡,核酸雜交,原位雜交和免疫組化的自動(dòng)程序。
                                    內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)蛋白免疫印跡程序如下:
                                Step
                                Task
                                Time
                                Action
                                Buffer
                                Memo
                                Execute x times
                                1
                                Set temp
                                 
                                Off
                                 
                                Temperature to RT
                                 
                                2
                                Incubate
                                00:05
                                Wash
                                PBST
                                Wash membrane
                                X2
                                3
                                Set temp
                                 
                                ON, 10℃
                                 
                                Temperature 10℃
                                 
                                4
                                Incubate
                                01:00
                                Blocking
                                Block solution
                                Blocking
                                 
                                5
                                Incubate
                                02:00
                                AB-step
                                Primary antibody
                                Primary antibody
                                 
                                6
                                Incubate
                                00:05
                                Wash
                                PBST
                                Wash membrane
                                X4
                                7
                                Incubate
                                00:30
                                Sec. antibody
                                Second antibody
                                Second antibody
                                 
                                8
                                Set temp
                                 
                                Off
                                 
                                Temperature to RT
                                 
                                9
                                Wash
                                00:05
                                PBST wash
                                PBST
                                PBST wash
                                X10
                                10
                                Ready to stain in dark room
                                 
                                 
                                 
                                 
                                 
                                 
                                 
                                1、  設(shè)置溫度到室溫
                                2、  用0.01M PBS洗膜,5min ×2次。
                                3、  設(shè)置溫度到10℃
                                4、加入包被液,平穩(wěn)搖動(dòng),1hr。
                                5、加入一抗(按合適稀釋比例用0.01M PBS稀釋,液體必須覆蓋膜的全部),2hr。
                                6、棄一抗,用0.01M PBS分別洗膜,5min×4次。
                                7、加入二抗(辣根過氧化物酶偶聯(lián))(按合適稀釋比例用0.01M  PBS稀釋),0.5hr。
                                8、設(shè)置溫度到室溫
                                9、棄二抗,用0.01M PBS洗膜,5min×10次。
                                10、加入顯色液,避光顯色至出現(xiàn)條帶時(shí)放入雙蒸水中終止反應(yīng)。
                                 
                                全自動(dòng)轉(zhuǎn)印儀在上述程序中可以實(shí)現(xiàn)在蛋白免疫印跡孵育過程中的溫控,更加保證一抗二抗的活性,這是一般手工操作所達(dá)不到的。
                                整套程序5個(gè)小時(shí)內(nèi)自動(dòng)完成,不需要人工換液和取出薄膜。當(dāng)然上述程序可以按照用戶實(shí)際需要來調(diào)整全自動(dòng)轉(zhuǎn)印儀的程序。
                                來源:鼎昊源(天津)生物科技有限公司
                                聯(lián)系電話:010-64838766
                                E-mail:chenyajing@herosbio.com

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