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                                                              English | 中文版 | 手機(jī)版 企業(yè)登錄 | 個(gè)人登錄 | 郵件訂閱
                                                              當(dāng)前位置 > 首頁 > 技術(shù)文章 > 鼎昊源全自動(dòng)轉(zhuǎn)印儀Blotstainer在蛋白免疫印跡上的應(yīng)用

                                                              鼎昊源全自動(dòng)轉(zhuǎn)印儀Blotstainer在蛋白免疫印跡上的應(yīng)用

                                                              瀏覽次數(shù):2603 發(fā)布日期:2013-9-27  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
                                                              由于蛋白免疫印跡的步驟操作較為繁瑣,要求精度較高,實(shí)驗(yàn)中一步出現(xiàn)操作失誤就會(huì)導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)的白白浪費(fèi)。并且一抗二抗試劑也比較寶貴,所以采用儀器操作可以降低實(shí)驗(yàn)的風(fēng)險(xiǎn),保證實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。
                                                               
                                                              鼎昊源推出的全自動(dòng)轉(zhuǎn)印儀就是替代人工操作的好選擇,它配有自動(dòng)移液系統(tǒng),溫控系統(tǒng)和孵育搖床。自動(dòng)移液系統(tǒng)包括10個(gè)管路,相互獨(dú)立,避免交叉感染。溫控系統(tǒng)范圍在4℃到80℃之間,滿足蛋白免疫印跡,核酸分子雜交實(shí)驗(yàn)的孵育溫度。整套系統(tǒng)根據(jù)客戶自定義的操作程序自動(dòng)完成。為了方便客戶使用,全自動(dòng)轉(zhuǎn)印儀出廠預(yù)設(shè)了免疫印跡,核酸雜交,原位雜交和免疫組化的自動(dòng)程序。
                                                                  內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)蛋白免疫印跡程序如下:
                                                              Step
                                                              Task
                                                              Time
                                                              Action
                                                              Buffer
                                                              Memo
                                                              Execute x times
                                                              1
                                                              Set temp
                                                               
                                                              Off
                                                               
                                                              Temperature to RT
                                                               
                                                              2
                                                              Incubate
                                                              00:05
                                                              Wash
                                                              PBST
                                                              Wash membrane
                                                              X2
                                                              3
                                                              Set temp
                                                               
                                                              ON, 10℃
                                                               
                                                              Temperature 10℃
                                                               
                                                              4
                                                              Incubate
                                                              01:00
                                                              Blocking
                                                              Block solution
                                                              Blocking
                                                               
                                                              5
                                                              Incubate
                                                              02:00
                                                              AB-step
                                                              Primary antibody
                                                              Primary antibody
                                                               
                                                              6
                                                              Incubate
                                                              00:05
                                                              Wash
                                                              PBST
                                                              Wash membrane
                                                              X4
                                                              7
                                                              Incubate
                                                              00:30
                                                              Sec. antibody
                                                              Second antibody
                                                              Second antibody
                                                               
                                                              8
                                                              Set temp
                                                               
                                                              Off
                                                               
                                                              Temperature to RT
                                                               
                                                              9
                                                              Wash
                                                              00:05
                                                              PBST wash
                                                              PBST
                                                              PBST wash
                                                              X10
                                                              10
                                                              Ready to stain in dark room
                                                               
                                                               
                                                               
                                                               
                                                               
                                                               
                                                               
                                                              1、  設(shè)置溫度到室溫
                                                              2、  用0.01M PBS洗膜,5min ×2次。
                                                              3、  設(shè)置溫度到10℃
                                                              4、加入包被液,平穩(wěn)搖動(dòng),1hr。
                                                              5、加入一抗(按合適稀釋比例用0.01M PBS稀釋,液體必須覆蓋膜的全部),2hr。
                                                              6、棄一抗,用0.01M PBS分別洗膜,5min×4次。
                                                              7、加入二抗(辣根過氧化物酶偶聯(lián))(按合適稀釋比例用0.01M  PBS稀釋),0.5hr。
                                                              8、設(shè)置溫度到室溫
                                                              9、棄二抗,用0.01M PBS洗膜,5min×10次。
                                                              10、加入顯色液,避光顯色至出現(xiàn)條帶時(shí)放入雙蒸水中終止反應(yīng)。
                                                               
                                                              全自動(dòng)轉(zhuǎn)印儀在上述程序中可以實(shí)現(xiàn)在蛋白免疫印跡孵育過程中的溫控,更加保證一抗二抗的活性,這是一般手工操作所達(dá)不到的。
                                                              整套程序5個(gè)小時(shí)內(nèi)自動(dòng)完成,不需要人工換液和取出薄膜。當(dāng)然上述程序可以按照用戶實(shí)際需要來調(diào)整全自動(dòng)轉(zhuǎn)印儀的程序。
                                                              來源:鼎昊源(天津)生物科技有限公司
                                                              聯(lián)系電話:010-64838766
                                                              E-mail:[email protected]

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