黃曲霉毒素是一類真菌（如黃曲霉和寄生曲霉）的有毒的代謝產物，它們具有很強的致癌性，主要存在于谷物、堅果、棉籽以及一些和人類血液，動物飼料相關的產品中。其毒性遠遠高于氰化物、砷化物和有機農藥的毒性，其中以B₁毒性最大。當人攝入量大時，可發(fā)生急性中毒，出現(xiàn)急性肝炎、出血性壞死、肝細胞脂肪變性和膽管增生。當微量持續(xù)攝入，可造成慢性中毒，生長障礙，引起纖維性病變，致使纖維組織增生。

 

近年來，國家制定了多個檢測黃曲霉毒素的方法標準，并同時出臺食品及飼料中黃曲霉毒素的限量要求，可見黃曲霉毒素的危害之大，用有效方法檢測黃曲霉毒素，從而控制有毒食品對動物和人體的危害至關重要，華安麥科作為國內最早從事霉菌毒素檢測研究的高新技術企業(yè)對黃曲霉毒素檢測也有深刻的探索研究，下面就我們的實踐和大家分享一下。

 

 

 

 

怎么選擇檢測方法和不熟悉儀器檢測法困擾著很多檢測人員，這次主要給大家介紹一下儀器法中相對性價比高也是不少檢測人員常用的高效液相法（HPLC）：

 

 

樣品經甲醇-水提取，提取液經過濾、稀釋，濾液經過含有黃曲霉毒素特異抗體的免疫親和柱層析凈化，黃曲霉毒素交聯(lián)在層析介質中的抗體上，此抗體對黃曲霉毒素B₁、B₂、G₁、G₂具有專一性，用水將免疫親和柱上雜質除去，以甲醇通過免疫親和柱洗脫，再經光化學衍生器柱后衍生，以提高檢測準確性。

ToxinFast^®氣控操作架：含氣泵

ToxinFast^®玻璃微纖維濾紙 ：直徑11cm、孔徑1.5µm

ToxinFast^®玻璃試管：直徑12mm，長75mm，無熒光特性

ToxinFast^®注射器：10ml、20ml

 

樣品粉碎——提取——洗脫液進樣、親和柱凈化——化學衍生——檢測數(shù)值（做過液相的都知道這些步驟的，在這里就簡單提一下，主要是為什么用到氣控操作架和化學衍生器在下面解釋一下�。�

在樣品粉碎后需要過親和柱凈化，也就是怎么方便親和柱使用操作的問題，氣控操作架能有效地提高這個環(huán)節(jié)的工作效率（很方便操作的），如圖示：

1 連接組裝好的氣控操作架，將免疫親和柱、注射器針筒與氣控操作架連接

2 將處理后的溶液上樣；

3 調節(jié)空氣泵旋鈕以控制流速，使樣液以1-2d/s的速度流出；

4，待樣液完全排干，用去離子水或蒸餾水以2-3d/s的流速洗滌兩次，每次10ml；

5，待液體完全排干，將樣品瓶置于親和柱下方，上樣1ml甲醇以1d/s的速度流出至完全排干。

以上操作步驟是用免疫親和柱--高效液相法檢測黃曲霉毒素的必經步驟，如使用氣控操作架就能很好的固定親和柱并以可控流速操作，既高效也能使操作誤差減到最小。

華安麥科ToxinFast^®氣控操作架具有6支可控支流，能同時有效檢測多個樣本，還適用于

1ml和3ml多種規(guī)格免疫親和柱。

由于黃曲霉具有較強的紫外吸收和產生熒光的特性，因此可以進行HPLC-紫外或熒光檢測，但是同時黃曲霉毒素中的B₁、G₁由于其在含水的流動相中容易產生熒光淬滅，因此在很多的實驗中都會采用衍生法測定黃曲霉毒素。

衍生的方法也很多：有柱前的，柱后的，在線的，柱前衍生一般采用三氟醋酸(TFA)衍生，柱后衍生一般采用碘化或者溴化，還有采用在線的光化學衍生的，在線衍生的優(yōu)勢跟大家說一下（無需任何化學試劑、對人員無傷害；無需人員直接操作、避免誤差; 無需擔心衍生液腐蝕檢測器）

 

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