藥物在動物體內(nèi)的吸收(Absorption，A)、分布(Distribution，D)、代謝(Metabolism，M)、排泄(Ex—eretion，E)屬于藥物臨床前藥效學研究的內(nèi)容之一，是新藥研究中非常重要的組成部分。試驗結(jié)果的可靠性直接影響著對其藥效學的正確評價，而影響試驗結(jié)果的因素除不可改變的客觀因素如物種之間的差異外，就是試驗手段引入的誤差，因藥物在體內(nèi)的ADME過程是通過研究體液中藥物濃度與時間的變化進行的，其中采樣環(huán)節(jié)是藥動學研究中的關鍵環(huán)節(jié)。目前，常規(guī)的采樣方法是由動物血管抽取全血處理后進行樣品分析或處死動物取組織勻漿后處理分析，而微透析(microdialysis，MD)則是新興的用于藥動學研究的采樣技術，微透析技術是由早期神經(jīng)化學實驗室中的灌流技術發(fā)展而來的，是以透析原理為基礎的一種在體取樣技術，即將微透析探針植于所需的采樣部位，用于細胞問液非常相近(包括電解質(zhì)組成、離子強度、滲透壓、pH值)的生理溶液(即灌流液)或加以改進的含有不同添加劑的灌流液進行灌注，由于膜內(nèi)外待分析物質(zhì)存在濃度梯度，分析物質(zhì)沿濃度梯度順向擴散，組織中待測化合物被灌流液連續(xù)不斷地帶到體外(即透析液)，通過測定透析液中待測物的濃度來研究組織待測物水平，從而達到活體組織連續(xù)、動態(tài)取樣的目的。本文就近年來微透析用于在藥動學研究中的報道進行綜述，為相關研究提供資料借鑒。

 

Hadwiger等¨研究了外消旋異丙腎上腺素(ISP)對映體在大鼠血液中的藥動學，給藥后首個10min內(nèi)收集透析液的間隔為1min，后期間隔為2min，透析液用HPCE—ECD檢測分析，二羥基芐胺為內(nèi)標，甲基一p一環(huán)糊精為手性調(diào)節(jié)劑，能使樣品達到很好的分離。結(jié)果是，(一)ISP和(+)ISP的消除半衰期分別是9．8±2．2min和8．8±2．0min，兩者沒有統(tǒng)計學的差異。Gunaratna等采用腦探針微透析與收集頸靜脈血相結(jié)合的方法，研究灌胃給大鼠奧氮平后其藥效學與藥動學情況，收集腦透析液，一半用HPLC／MS法測定奧氮平的濃度，一半用HPLC—EC測定腦神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺、5一羥色胺等；利用大鼠頸靜脈埋管的方法定時采血進行藥動學評價，并同時檢測了大鼠的自主活動，結(jié)果表明奧氮平能提高腦多巴胺的水平，同時說明通過腦探針微透析與樣品自動收集器聯(lián)合應用能同時獲得藥動學、藥效學及生理活動等信息。Lin等研究了表兒茶素酸酯在大鼠體內(nèi)的藥動學，透析液直接用HPLC—UVD分析，結(jié)果表明藥動學過程符合二房室模型。Anand等研究了熒光素在兔眼玻璃體的藥動學，實驗兔根據(jù)在探針植入手術后是否有恢復期被分為兩組，血-視網(wǎng)膜的完整性通過測定vitreal蛋白的濃度和熒光素的滲透指數(shù)而定，結(jié)果表明vitreal蛋白的濃度在植入探針手術后48h恢復正常，因此設定恢復時間為72h，同時提示探針植入手術沒有危害血一視網(wǎng)膜的完整性，采用微透析采樣技術建立了眼睛后段藥動學研究方法。Lv等為避免探針植入血管由于血流的變化，及血管壁對探針透析膜造成的不可修復的堵塞等因素對探針回收率帶來的影響，以兔為試驗動物在其耳緣靜脈埋針，用可調(diào)速的蠕動泵將兔血以15txl／min的速度抽出后經(jīng)過一個裝有微透析探針的微線管，透析液用熒光分光光度計分析，結(jié)果表明馬來酸麥角新堿的藥動學符合一房室模型。

Tsai等研究了川芎嗪在大鼠腦紋狀體及血液中的動態(tài)變化，HPLC—UVD直接分析透析液，結(jié)果是川芎嗪在血液和腦紋狀體的藥動學符合二房室模型，并且呈現(xiàn)分布、消除快的特點，并且川芎嗪在兩部位的AUC值說明本藥物有比較高的血腦屏障滲透性，2h內(nèi)在腦組織的分布量是血液中的2倍多，與川芎嗪具改善中樞活動的能力相吻合。Huf等同時檢測了血液和腦組織的苯哌啶醋酸甲酯及多巴胺的量，并同時觀察大鼠的活動情況，收集腦透析液和血管透析液，HPLC—UVD直接測定多巴胺和苯哌啶醋酸甲酯的含量，結(jié)果是給藥后每一個20min苯哌啶醋酸甲酯在血液和腦組織達到峰濃度，同時多巴胺的水平也在這個時間點達到最高水平，并且3h后逐漸恢復到正常水平，最大活動量達峰與苯哌啶醋酸甲酯和多巴胺的峰值呈很好的相關性，增高的活動量維持約2．5h。Amal等叫同時測定了大鼠腦和血液中苯丁胺、氯苯丙胺及其代謝產(chǎn)物nor一氯苯丙胺的藥動學，透析液直接衍生化后，用HPLC。FL分析測定，結(jié)果表明氯苯丙胺,n／或nor。氯苯丙胺顯著的改變了苯丁胺在血液和腦組織的藥動學過程，但不影響后者的蛋白結(jié)合。然而，氯苯丙胺在血液及腦組織的藥動學不受與苯丁胺聯(lián)合用藥的影響。Wang等比較了靜脈給藥苯妥英和磷苯妥英(苯妥英的前體藥物)后，苯妥英在外周血和腦脊液藥動學的不同，結(jié)果表明兩者在大鼠內(nèi)的藥動學沒有顯著差異，這與以往采用整個鼠腦勻漿法研究的結(jié)果，即靜注苯妥英比靜注磷苯妥英后，前者在腦組織的濃度高的報道¨不一致，提示用整腦勻漿法得到的研究數(shù)據(jù)能否說明問題的可靠性值得商酌。Ama研究了苯丙醇胺在大鼠血液和腦紋狀體中的藥動學，麻黃堿作為內(nèi)標加入透析液，柱前衍生化后直接用HPLC—FL進行檢測分析，得出了苯丙醇胺在大鼠血液和腦組織液的藥動學，并且通過比較其在腦和血液中的AUC值發(fā)現(xiàn)，兩者沒有統(tǒng)計學差別(P>0．05)。

Tsai等同時研究了小檗堿在大鼠血液、肝臟、膽汁的藥動學，透析液用HPLC—EVD分析，藥一時曲線表明小檗堿在靜脈給藥后20arin在肝臟和膽汁達到峰濃度，在膽汁的濃度明顯高于在血液和肝臟的濃度，結(jié)果提示小檗堿可能在膽汁中排泄。Tsai等研究了甲硝唑在大鼠血液、腦和膽汁的藥動學，透析液直接用微內(nèi)徑高效液相色譜一UVD分析(微內(nèi)徑柱5 m，150×1mm，I．D．)，結(jié)果表明甲硝唑能通過血腦屏障，并經(jīng)受肝膽排泄，且甲硝唑的這些性質(zhì)可能與p一糖蛋白無關。Wu等引研究了吡嗪酰胺在大鼠血液、腦組織、膽汁的藥動學過程，透析液用HPLC—uV法進行分析，接著用HPLC—MS法驗證了HPLC—uV法的測定結(jié)果，結(jié)果表明外周室和中央神經(jīng)系統(tǒng)吡嗪酰胺有很快的交換和平衡過程，結(jié)果還表明吡嗪酰胺能通過血腦屏障，并經(jīng)受肝膽排泄。Tsai研究了燃料木黃酮在麻醉大鼠血液、腦、膽汁的分布及藥動學，透析液用HPLC．UVD分析，結(jié)果表明，很少一部分燃料木黃酮在靜脈注射給大鼠后，能通過血腦屏障并且經(jīng)受膽汁排泄，AUCbvain／AUCblood和AUCbile／AUCblood值分別分0．04±0．01和1．85±0．42，聯(lián)合用p一糖蛋白阻滯劑環(huán)孢菌素后，該藥在腦和膽汁的分布沒有明顯的改善，結(jié)果提示該藥血腦透析率及肝膽排泄不受p一糖蛋白的控制。Pia等叫進行了多巴胺(DA)激動劑在大鼠內(nèi)的藥動學／藥效學(PK／PD)研究，以精神興奮藥可卡因、哌甲酯和兩個新的候選精神興奮藥NS—A和NS—B為模型展開研究，結(jié)果表明NSA成分進入腦脊液的速度比哌甲酯慢，然而兩個成分在加速外周DA的濃度方面表現(xiàn)出相似的效果NS—B成分進入腦脊液的速度表現(xiàn)出比較快的特點給藥后40rain在腦脊液的濃度即達到最大值，然而，DA值仍然沒有改變，結(jié)果表明NS—B藥增加D濃度比哌甲酯和NS—A藥慢兩倍，同時結(jié)果說明三探針微透析用于研究精神興奮劑在大鼠體內(nèi)PKPD過程的可行性。

Tseng等研究了京尼平苷在大鼠血液、肝臟腦紋狀體、膽汁的藥動學過程，透析液直接用HPLC UVD檢測分析，結(jié)果表明在腦紋狀體部位探針的透析液不能檢測到京尼平苷，說明該藥可能不能通過血腦屏障，血液中藥動學結(jié)果表明，該藥的藥動學特征在10～100arg／kg劑量范圍內(nèi)與劑量呈正相關在10mg／kg劑量下該藥在膽汁的AUC值顯著大于血液AUC值，提示該藥有肝膽排泄，并且發(fā)現(xiàn)針灸太沖(LIV3)和陽陵泉(GB34)兩個穴位，不影響該藥在大鼠血液、肝臟、膽汁的藥動學過程。微透析采樣技術在藥動學研究中的應用，非常

有助于藥物體內(nèi)動力學研究的開展。通過分析文獻認識到，同一部位探針的體內(nèi)回收率不受濃度的影響，是該取樣技術用于體內(nèi)成分分析的前提條件除上述文獻報道中常植入探針的微透析部位外，還有進行腎臟微透析、心臟微透析引、小腸微透析等的報道。當然這種采樣技術也有其局限性即透析液中的藥物濃度代表的是采樣時間間隔內(nèi)藥物的平均濃度，在一定的灌流速度和采樣時間間隔內(nèi)，收集到的可供分析的透析液是有限的，這給分析手段提出了很高的要求，需要高靈敏度的定量分析方法；另外其微透析探針可重復使用性差，故其成本

高也限制了其應用范圍。

（文章來源: 中藥材 第31卷第6期 作者 魏鳳環(huán)）